消毒与灭菌技术.ppt

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第三章清洁、消毒与灭菌技术,一、基本概念二、物品清洁法三、物理方法四、化学方法,一基本概念,清洁,是清除物品上的一切污迹,如尘埃,油脂等,消毒,清除或杀灭物品上的病原微生物,灭菌,清除或杀灭物品上的一切微生物,以杀灭芽孢为准,防腐,抑制微生物的生长与繁殖,概念的鉴别,消毒相对的，不一定达到无菌的要求灭菌绝对的，一定达到无菌的要求。

二物品清洁法,常用的清洁方法,清洁方法用于,衣被、家具、地面、墙壁及医疗器械等物体表面的处理或物品消毒、灭菌前的处理,常用去污法,碘酊乙醇甲紫乙醇或草酸溶液陈旧血渍过氧化氢溶液高锰酸钾维生素c或过氧乙酸墨水稀盐酸或草酸也可用氨水或过氧化氢铁锈1%热草酸溶液，也可用热醋酸,擦拭法,高压蒸汽灭菌法,常用消毒灭菌的方法,物理法,化学法,浸泡法,熏蒸法,喷雾法,热力灭菌法,其他法,辐射灭菌法,燃烧法,烤箱法,煮沸法,干热法,湿热法,日光曝晒法,紫外线灯照射法,电子灭菌灯法,电离辐射法,三、物理消毒灭菌法,（physicaldisinfectionsterilization）利用热力或光照等物理作用，使微生物的蛋白质及酶变性或凝固，以达到消毒灭菌的目的常用的有热力、光照、辐射、过滤除菌等方法。

（一）热力消毒灭菌法,（heatdisinfectionsterilization）主要利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡效果可靠、经济方便，使用广泛,1、干热消毒灭菌法,干热是指相对湿度在20%以下的高热，由空气导热，传热较慢，干热消毒灭菌常用的方法,焚烧-最彻底的灭菌方法,烧灼-直接用火焰灭菌方法如接种环、试管口、三角瓶口,干烤-加热160-1702h玻璃器皿、陶瓷,红外线-热效应，与干烤类似,灭菌效果：

可杀死营养体和芽胞,干热消毒灭菌法,湿热由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热消毒灭菌常用的方法：

高压蒸汽灭菌法12115-20mim（杀芽胞）煮沸消毒法水煮1005mim（杀繁殖体）-2h（杀芽胞）流通蒸汽消毒法水蒸汽10015-30mim（杀繁殖体）间歇蒸汽灭菌法反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌（杀芽胞）巴氏消毒法6130mim/7130s（杀致病菌）,2、湿热消毒灭菌法,原理,适用,方法,是热力消毒灭菌中效果最好的一种方法利用高压及饱和蒸汽的高热所释放的潜热灭菌，潜热是指当1g100的水蒸汽变成1g100的水时所释放的热能（2，255J）,临床广泛应用于耐高温、高压、潮湿物品的灭菌，如各类器械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液等是热力消毒灭菌中效果最好的一种,根据排放冷空气的方式和程度的不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌和预真空压力蒸汽灭菌。

高压蒸汽灭菌法,高采用高压饱和蒸汽杀灭微生物，是最有效的灭菌方法115,70.91kPa,30min121，103.1kPa,15-20,培养基,注射液,手提式灭菌锅,灭菌箱,高压蒸汽灭菌,热压灭菌所需温度与相当压力及时间,高压蒸汽灭菌常用设备,软包装灭菌器,高压蒸汽灭菌器,手提式热压灭菌器,高压蒸汽灭菌的效果监测,监测灭菌效果,物理监测法用150或200的留点温度计。

使用前将温度计汞柱甩至50以下，放入包裹内，灭菌后检查其读数是否达到灭菌温度化学监测法主要是通过化学指示剂的化学反应，灭菌后呈现的颜色变化来辨别是否达到灭菌的要求。

临床常用的化学指示卡与化学指示胶带，化学指示卡放在包的中央，化学指示胶带粘贴在包的外面。

监测灭菌效果,生物监测法是最可靠的监测法，利用对热耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽孢作为指示剂，制成每片含106个嗜热脂肪杆菌芽孢的菌纸片,使用时将10片菌纸片分别放于灭菌器四角及中央，待灭菌完毕，用无菌镊取出后再放人培养基内，在56温箱中培养48h至1周，若全部菌纸片无细菌生长则表示灭菌合格。

煮沸消毒法（boilingsterilization）,要求,适用,方法,经510分钟可杀灭繁殖体，达到消毒效果。

将碳酸氢钠加入水中，配成1%2%的浓度时，可提高沸点达105，增强杀菌作用，还可去污、防锈。

适用于耐湿、耐高温的物品如金属、搪瓷、玻璃和橡胶类等,将物品刷洗干净，全部浸没在水中，然后加热煮沸消毒时间从水沸后计算如中途加入物品，则在第二次水沸后重新计时,注意,煮前煮时煮后,应将物品刷洗干净有轴节的器械或带盖的容器应将轴节或盖打开再放入水中空腔导管须先在腔内灌水物品不宜放置过多，大小相同的碗、盆不能重叠，要保证物品各面都与水相接触,根据物品性质决定放入水的时间及消毒时间玻璃器皿应用纱布包裹好后，从冷水或温水中放入，消毒时间为1015min橡胶制品用纱布包好，待水沸后放入，时间为510min金属及搪瓷类物品，消毒时间为1015min；,水的沸点受气压影响，海拔高的地区气压低，水的沸点也低，需适当延长消毒时间；海拔每增高300m，消毒时间延长2min；,应用无菌器械将物品及时取出置于无菌容器内,流通蒸汽消毒法,水蒸汽10030-60（杀繁殖体）适用对象：

不需杀死芽孢的物体的消毒。

适用于一些注射剂生产，尤其是12ml注射剂及不耐高热的品种。

若在药液中加入抑菌剂（0.1%0.5%苯酚等），可杀死芽孢,此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。

低温间歇灭菌法,将灭菌物体置于6080，1h后，置于2025，24h。

反复三次（杀芽胞）,不宜高压灭菌的培养基不耐热的药物和营养物发酵车间的管道等中药注射剂常用该法,适用对象,缺点：

时间长、功效低，消灭芽孢效果差,巴氏消毒法,巴氏消毒法（杀致病菌）6130或711582处理4秒,适用对象：

奶制、果汁、酒、糖浆等食品消毒。

1、紫外线消毒法,概念紫外线消毒法是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的核酸、酶遭到破坏而死亡的一种消毒方法。

紫外线的杀菌力与其波长密切相关，最佳杀菌波长为250270nm.适应范围紫外线消毒适用于空气消毒与物品表面的消毒。

（二）辐射灭菌法,特点：

紫外线穿透力较弱紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体等。

杀灭繁殖体需35s；杀灭芽孢需10min以上。

杀菌机制,使菌体DNA失去转换能力而死亡；破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解变性；降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失；使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭氧。

方法,空气消毒物品消毒,消毒前做好室内清洁卫生，关闭门窗，停止走动每10m2安装30W紫外线灯管一支有效距离不超过2m照射时间3060分钟,消毒时应将物品全部暴露避免遮挡有效距离为2560cm照射时间为2030分钟。

注意事项

（1）保持紫外线灯管清洁，每2周用95乙醇棉球擦拭灯管表面一次。

（2）紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用，照射过程中产生的臭氧对人亦有危害，故一般不在有人的环境中使用，必要时应戴防护镜和穿防护衣。

（3）消毒物品时应定时翻动物品，使其表面受到直接照射。

（4）为保证消毒效果，应定时检测灯管照射强度（一般每36个月测定一次），如灯管强度低于70W/cm2时应更换，或建立使用时间登记本，凡使用时间超过1000h需更换灯管。

（5）定期进行空气培养，以监测灭菌效果。

紫外线消毒法,2、电离辐射,包括：

射线（电子束灭菌，适用薄、密度低的物料）60Co射线（同位素辐射灭菌法）杀菌机理：

产生游离基,破坏DNA。

特点：

射线穿透力强、被灭菌物体温度变化小适用范围：

一次性医用塑料制品的消毒、食品的消毒-不破坏其营养成分,电离辐射灭菌法特点,适用于热敏性药物的灭菌；射线穿透力强,特别适用于已包装密封的药品消毒灭菌可防二次污染；杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固体物料。

有可能使药效活性降低，使用中注意安全保护。

微波是频率在30-300000MHz，波长在00011m左右的电磁波。

微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽孢、真菌孢子等,常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。

3、微波消毒灭菌法,4、光照消毒法,又称辐射消毒，主要利用紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白质发生光解、变性而致细菌死亡。

其特点对杆菌杀菌能力强，对球菌较弱，对生长期细菌敏感，对芽孢敏感性差。

原理,适用,方法,由于日光具有热、干燥和紫外线的作用有一定的杀菌力,常用于床垫毛毯衣服书籍等物品的消毒,方法是将物品放在直射阳光下曝晒6h，定时翻动，使物品各面均能受到日光照射。

日光暴晒法,臭氧消毒法,臭氧在常温下为强氧化剂，稳定性极差，易爆炸，主要依靠强大的氧化作用杀菌可杀灭细菌繁殖体、病毒、芽孢、真菌，并可破坏肉毒杆菌毒素。

床单位臭氧消毒,（三）过滤除菌法,指药液通过无菌滤器，除去活的和死的微生物而得到无菌滤液的方法。

特点：

（1）适用于很不耐热的药物溶液的除菌

（2）必须无菌操作（滤球、容器、药液、环境无菌等过程）。

杀菌机理：

含有微细小孔0.22m,只允许液体或气体及孔径0.22m的颗粒通过，细菌不能滤过。

不能除病毒、支原体适用范围：

血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌。

物理灭菌各种方法的比较,四、化学消毒灭菌法,化学消毒灭菌法是利用化学药物渗透细菌体内，使菌体蛋白凝固变性，干扰细菌酶的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细菌膜的结构，改变其渗透性，破坏其生理机能等，从而达到消毒灭菌目的。

（一）化学消毒剂的使用原则,

（1）根据物品的性能及微生物的特性，选择合适的消毒剂。

（2）严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。

（3）消毒剂应定期更换，易挥发的消毒剂要加盖，并定期检测，调整其浓度。

（4）浸泡前将物品洗净擦干，浸没在消毒液内的物品应注意打开轴节或套盖，管腔内应注满消毒液。

（5）在使用前用无菌生理盐水冲净消毒后的物品，避免消毒剂刺激人体组织,

（二）化学消毒剂的分类,高效消毒剂高效消毒剂可杀灭一切微生物，包括芽孢（碘酊、福尔马林等）中效消毒剂中效消毒剂可杀灭细菌繁殖体，不能杀灭芽孢（乙醇、碘伏等）低效消毒剂低效消毒剂可杀灭细菌繁殖体，不能杀灭结核杆菌、亲水性病毒或芽孢（苯扎溴铵、氯己定等）,（三）化学消毒剂的使用方法,浸泡法侵泡法是将物品洗净、擦干后，浸没在消毒液中进行消毒灭菌的方法。

擦拭法擦拭法是用消毒剂直接擦拭人体或物品表面，如皮肤、桌椅等，达到消毒灭菌的方法。

喷雾法喷雾法是利用喷雾器将消毒剂变成微粒气雾弥散在空气中对空气和物品表面进行消毒灭菌的方法。

熏蒸法熏蒸法是将消毒剂加热或加人氧化剂，使其产生气体来进行消毒灭菌的方法。

（四）常用的化学消毒剂,碘酊iodinetincture过氧乙酸peraceticacid福尔马林formalin（3740%的甲醛溶液）戊二醛glutaraldehyde环氧乙烷ethyleneoxide含氯消毒剂乙醇alcohol碘伏iodophor,碘酊消毒效力：

高效,浓度和用法：

2%用于皮肤消毒，擦后待干，再用70%乙醇脱碘2.5%用于脐带断端消毒，擦后待干，再用70%乙醇脱碘注意事项：

对皮肤有刺激性，不可用于黏膜消毒对金属有腐蚀性，不可用于金属器械的消毒对碘过敏者禁用,过氧乙酸peraceticacid,消毒效力：

高效0.2用于手消毒，浸泡12min0.5用于餐具消毒，浸泡3060min0.20.5用于物体表面消毒，或浸泡10min12用于空气消毒，8mL/m3，加热熏蒸，密闭门窗30-120min,过氧乙酸,注意事项：

对金属有腐蚀性，不可用于金属器械的消毒易氧化分解而降低杀菌力，需现配现用浓溶液有腐蚀性，配制时要戴口罩和橡胶手套存放于阴凉避光处，防高温引起爆炸,福尔马林formalin（3740%的甲醛溶液）,消毒效力：

高效40甲醛210mLm3加水420mL加热，作室内物品及空气消毒40甲醛4060mLm3加高锰酸钾2040g，柜内熏蒸，密闭612h10甲醛可作浸泡器械消毒,福尔马林,注意事项：

蒸汽穿透力弱，因此衣服应挂起消毒消毒效果易受温度、湿度影响，要求室温在18以上，相对湿度在70以上对人体有一定毒性和刺激性，使用时注意防护,戊二醛glutaraldehyde,消毒效力：

高效浓度和用法：

2戊二醛溶液加入0.3碳酸氢钠，成为2碱性戊二醛，用于浸泡不耐高温的金属器械、医学仪器、内镜等，消毒需1030min，灭菌需710h.,戊二醛,注意事项：

每周过滤1次，每2周应更换消毒液1次浸泡金属类物品时，加入0.5亚硝酸钠作为防锈剂消毒灭菌后的物品，使用前用无菌蒸馏水冲净,环氧乙烷ethyleneoxide,消毒效力：

高效环氧乙烷为气体灭菌剂，用于精密仪器、器械、化纤、人造毛类制品等不耐热、不耐湿物品的灭菌。

灭菌剂量为8001200mg/L，温度为542，相对湿度为6010，时间为2.54h.临床上有少量物品时可放入丁基橡胶袋中灭菌；有大量物品时可放人环氧乙烷灭菌柜内灭菌,环氧乙烷,注意事项：

易燃易爆具有一定毒性，工作人员要严格遵守操作程序存放在阴凉通风无火源处储存温度不可超过40，以防爆炸灭菌后的物品须通风处理，清除环氧乙烷残留量后方可使用每次灭菌时，应进行效果检测及评价,含氯消毒剂（常用的有漂白粉、漂白粉精、氯胺T、二氯异氰脲酸钠等）,消毒效力：

中、高效浓度和用法：

0.5漂白粉溶液、0.51氯胺溶液用于浸泡餐具、便器等，浸泡30min13漂白粉溶液、0.53氯胺溶液喷洒或擦拭地面、墙壁及物品表面排泄物消毒：

干粪5份加漂白粉1份搅拌，放置2h，尿液100mL加漂白粉1g，放置1h,含氯消毒剂,注意事项：

消毒剂保存在密闭容器内，置于阴凉、干燥、通风处，减少有效氯的丧失配制的溶液性质不稳定，应现配现用有腐蚀及漂白作用，不宜用于金属制品、有色衣服及油漆家具的消毒3d更换一次消毒液,乙醇alcohol,消毒效力：

中效浓度和用法：

7075用于皮肤消毒95用于燃烧灭菌注意事项：

易挥发，需加盖保存，定期测定，保持有效浓度有刺激性，不宜用于黏膜及创面消毒易燃，故应置于避火处,碘伏iodophor,消毒效力：

中效浓度和用法：

0.5l.0有效碘溶液用于外科手术及注射部位皮肤消毒涂擦2次0.05%有效碘溶液用于黏膜、创面消毒注意事项：

碘伏稀释后稳定性差，宜现配现用避光密闭保存，放阴凉处消毒后不用乙醇脱碘,苯扎漠铵（新洁尔灭）bromogeraminum,消毒效力：

低效0.01005用于黏膜消毒0.10.2用于皮肤消毒0.1%0.2用于金属器械消毒，浸泡1530min（加入0.5亚硝酸钠以防锈）,苯扎漠铵（新洁尔灭）,注意事项：

对肥皂、碘、高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投人纱布、棉花等对铝制品有破坏作用，故不可用铝制品盛装,氯己定（洗必泰）chlorhexidine,0.02用于手消毒，浸泡3min0.05用于创面消毒0.1用于物体表面消毒注意事项：

对肥皂、碘、高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用消毒效力：

低效有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投人纱布、棉花等,常用的消毒防腐剂及应用,作业,1、清洁、消毒、灭菌的概念。

2、化学消毒的原则是什么?

3、叙述紫外线消毒法的注意事项。

1、破伤风病员用过的敷料最好的处理方法是：

A.清洗后消毒B.烧毁C.高压灭菌D.煮沸消毒E.放弃（B）,习题,2、对细菌芽胞无效的化学消毒剂是：

A.碘伏B.20%的碘酊C.甲醛D.0.5%过氧乙酸E.2%戊二醛（A）,3、某病人因急性肝炎收入传染病院，其信笺、钱币用下列何种消毒方法为宜A.高压蒸气灭菌B.喷雾法C.熏蒸法D.擦拭法E.浸泡法（C）,4、下列说法正确的是A.绿脓杆菌污染的敷料可煮沸消毒再次使用B.紫外线消毒从灯亮后计时C.煮沸消毒从物品放入后开始计时D.高压蒸汽灭菌法时，布类物品放在搪瓷E.高压蒸汽灭菌器内物品放置越少灭菌效果越好（D）,5、水中加入哪种药物可提高沸点,减少对金属的腐蚀性A.1%2%碳酸氢钠B.0.1%0.2%碳酸氢钠C.2%4%碳酸氢钠D.10%碳酸氢钠E.2%5%碳酸氢钠（A）,