中药鉴定学实验指导主编颜益志湖北民族学院中药专业教研室Word文件下载.docx

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槟榔、白豆蔻等的鉴别…………29

实验十六全草类中药〔一〕：

麻黄、金钱草、广藿香等的鉴别……30

实验十七全草类中药〔二〕：

薄荷、穿心莲、石斛等的鉴别………31

实验十八各种石细胞的鉴别……………………………………………33

实验十九藻菌类中药：

猪苓、茯苓等的鉴别…………………………34

实验二十各种特异薄壁细胞的鉴别……………………………………35

实验二十一动物类中药〔一〕：

珍珠、蟾酥、土鳖虫等的鉴别………36

实验二十二动物类中药〔一〕：

金钱白花蛇、乌梢蛇、麝香等的鉴别…37

实验二十三复习…………………………………………………………38

实验二十四实验考核……………………………………………………39

根本操作介绍

一.显微镜的使用考前须知

1.使用显微镜之前，应仔细检查其零件有无损失，破损。

2.取镜时一手握镜臂，另一手托住镜座，不可斜提〔防止目镜滑出或损伤螺旋〕，更不可一只手提显微镜。

3.放置时应使镜座轻轻着落，不得使显微镜遭受震动。

4.使用倾斜关节时，一方面要注意显微镜重心，不可倾斜过度，以防止倾倒摔坏；

另一方面要注意检查载玻片上的试剂，防止因倾斜过度而流出后污染或腐蚀载物台。

5.在使用显微镜的中途，假设欲进展其它操作时，需将显微镜的倾斜关节复原，并移至试验台的中央，以免碰落在地。

6.在观察切片之前，要认真检查盖玻片外是否有残留试液，以防腐蚀镜头。

用高倍镜观察时，应先用低倍镜调好距离后，然后转换成高倍镜。

7.观察完后，应先转开镜头，然后拆除切片，以防腐伤或碰伤镜头。

8.使用完后，用纱布揩拭机械局部，用绸布揩拭光学局部。

镜头等模糊时，可用绸布沾少许二甲苯和石油醚轻轻揩拭。

忌用醇清洗。

如遇显微镜机械不灵和光学局部异样，应报告教师解决，严禁擅自拆卸、处理。

9.实验完毕，与时拆除切片，复原各部〔如镜头偏于两侧，聚光器复原等〕，使镜头完全处于非工作状态，放回原处，并填写使用登记卡。

二.中药与成方制剂的显微鉴别法

显微鉴别是指用显微镜观察中草药与成方制剂的组织、细胞等特征，进展鉴别的方法。

鉴别时可选用具有代表性的样品，制作不同的显微制片。

一般作横切片、粉末制片鉴别叶或其它器官的外表制片。

1.横切片或纵切片

选取中草药样品所要观察的局部，截成适当大小的短段，软化后，用徒手切片或滑走切片机横向或纵向切成10~20um的薄片，然后选用适当的试液观察。

必要时可用石蜡切片法制片。

2.外表制片

将样品软化后，切取一局部或撕其外表，再选用适宜的试液制片观察。

3.解离组织制片法

如样品内薄壁组织占大局部，木化组织少或分散存在，可用氢氧化钾法；

如薄壁细胞较少，木化组织较多或集成较大群束，可用硝铬酸法或氯化钾法。

进展解离前，宜先将样品切成直径或宽2mm的条状或片状。

（1）氢氧化钾法：

取上述材料，置试管中，加5%氢氧化钾液适量，加热煮至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。

（2）硝铬酸法：

取上述材料，置试管中，加20%硝铬酸试液适量，放置，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。

（3）氯酸钾法：

取上述材料，置试管中，加50%硝酸溶液与氯酸钾粉少许，缓缓加热，待产生的气泡减少时，再与时参加氯酸钾少许，以维持气泡稳定地发生，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。

4.鉴别中成药时，如为散剂，照粉末制片法制片观察。

如为丸、片剂，可取样品从正中切开，于切开面外至内刮取少量样品，滴加常规的试剂，搅拌均匀，使粘结的细胞、组织解离，再按粉末的特征进展鉴别。

蜜丸可直接挑取少量样品制片。

5.为了使切片和粉末的组织、细胞能观察清楚，常用水合氯醛试液透化后再进展观察。

6.观察细胞内含物的形状，应选用不同的试液制片，一般观察淀粉用水或甘油醋酸试液；

糊粉粒用甘油；

水溶性内含物〔如菊糖、橙皮甙等〕用乙醇或水合氯醛〔不加热〕。

7.细胞壁性质的鉴别

（1）木质化细胞壁加间苯三酚试液1~2滴，稍放置，加盐酸1滴，因木化程度不同，显红色或紫红色。

（2）木栓化或角质化细胞壁加苏丹Ⅲ试液，稍放置或微热，显桔红色至红色。

（3）纤维素细胞壁加氯化锌碘试液；

或先加碘试液湿润后，稍放置，再加硫酸溶液〔33%~50%〕，显蓝色或紫色。

（4）硅质化细胞壁加硫酸无变化。

8.细胞内含物性质鉴定

（1）淀粉粒a.加碘试液，显蓝色或紫色。

b.用甘油醋酸试液装片，置偏光显微镜下观察，未糊化的淀粉粒显偏光现象；

易糊化的无偏光现象。

（2）糊粉粒a.加碘试液，显棕色或黄棕色。

b.加硝酸供试液，显砖红色。

材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚和石油醚进展脱脂后进展实验。

（3）脂肪油、挥发油或树脂a.加苏丹Ⅲ试液，显橘红色、红色或紫红色。

b.加90%乙醇，脂肪油不溶解〔蓖麻油和巴豆油例外〕，挥发油那么溶解。

（4）菊糖加10%a-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并很快溶解。

（5）粘液加钌红试液，显红色。

（6）草酸钙结晶a.加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡产生。

b.加硫酸溶液，逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶。

（7）碳酸钙〔钟乳体〕加稀盐酸溶解，同时有气泡产生。

（8）硅质加硫酸不溶解。

实验一显微测定

1目的要求

掌握显微测定尺的使用方法。

掌握显微那么量的方法。

2仪器、试剂、材料

仪器：

目镜测微尺、载台测微尺、生物显微镜、酒精灯

试剂：

水合氯醛、甘油

药材：

大黄、肉桂

粉末：

三、实验内容

测量大黄簇晶直径、肉桂纤维直径与长度

四、实验方法

1．装好测量目尺和物尺，按以下计算公式校对显微测量目尺。

计算公式：

目尺每小格代表长度=

2．取大黄、肉桂粉末，分别以水合氯醛透化装片，测量大黄簇晶直径、肉桂纤维直径与长度。

五、作业

1．校对显微镜-目尺放大倍数。

2．测量大黄簇晶直径和肉桂纤维直径与长度。

实验二显微描绘

掌握显微描绘方法

熟悉显微描绘器的使用与应用

二、仪器、试剂、材料

目镜测微尺、载台测微尺、显微描绘器、绘图板、生物显微镜

半夏、肉桂

1．描绘半夏针晶、肉桂纤维和石细胞。

2．测量放大倍数。

1．取半夏、肉桂粉末、分别以水合氯醛透化装片。

2．装好描绘目镜和描绘架。

3．描绘半夏针晶和肉桂细胞与纤维。

4．测量放大倍数。

描绘半夏针晶和肉桂纤维与石细胞。

实验三贯众类的鉴别

一、目的要求

掌握贯众类药材的鉴别方法

掌握常用贯众类药材叶柄，残基的显微结构特征

熟悉徒手切片的操作方法

生物显微镜、单、双面刀片

绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊

水合氯醛、1%香草醛溶液、盐酸。

1．观察以上药材性状特征。

2．观察以上药材叶柄残基横切面显微特征。

1．性状鉴别

取绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众、狗脊药材，观察性状特征。

2．显微鉴别

取绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众叶柄残基徒手切片，观察横切面特征。

3．理化鉴别

取绵马贯众叶柄残基或根茎横切面切片，滴加1%香草醛溶液与盐酸，镜检，间隙腺毛呈红色。

绘绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众叶柄残基横切面显微结构简图。

实验四大黄、何首乌的鉴别

掌握大黄、何首乌异型维管束的结构与特征

掌握大黄的显微鉴别方法与特征

掌握微量升华的方法

微量升华装置、滤纸、紫外光灯

氢氧化钠、甲醇、45%乙醇、水合氯醛、甘油

大黄、何首乌

永久制片：

1．大黄、波叶组大黄、何首乌的性状鉴别。

2．大黄、何首乌异型维管束的观察。

3．大黄粉末鉴定与理化鉴别。

取大黄、波叶组大黄进展性状鉴别观察。

①横切面：

取大黄、何首乌永久制片，观察显微特征。

②取大黄粉末分别用稀甘油和水合氯醛装片，观察显微特征。

①取大黄粉末少许进展微量升华，分别收集110℃、130℃、150℃附近升华物镜检，依次见菱形或针状、树枝状、羽毛状黄色结晶，结晶加氢氧化钠试液，那么溶解并显红色。

②取大黄粉末0.2g，加甲醇温浸10分钟，放冷，取上清液10μl点于滤纸上，以45%乙醇展开，取出，晾干，放置10分钟，置365nm紫外光灯下检视，观察结果。

1．绘大黄、何首乌横切面结构简图。

2．绘大黄微量升华产物简图，并注意反响现象。

3．绘大黄粉末显微特征图。

实验五黄连、乌头、甘草等的鉴别

2目的要求

熟悉川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索的性状特征

掌握黄连横切面结构特征与简图

掌握黄连、甘草的粉末显微特征

紫外分光光度计、生物显微镜，分液漏斗、酒精灯

乙醇、稀盐酸、漂白粉、95%硝酸、乙醚、氨试液、硫酸〔0.25mol/L〕、水合氯醛、甘油

川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索

黄连、川乌、甘草

1．观察川乌、附子、黄连、白芍、黄芪、甘草、延胡索的性状特征。

2．观察黄连的横切面与粉末的显微特征。

3．观察甘草粉末显微特征。

4．作黄连理化鉴别试验。

取川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索药材，观察性状特征。

取味连、雅连、云连永久制片、观察显微特征。

②粉末：

取黄连、甘草粉末，以水合氯醛透化装片，观察显微特征。

①取黄连粗粉1g，加乙醇10ml，加热至沸腾，放冷、滤过。

取滤液5滴，加稀盐酸1ml与漂白粉少量，振摇后，溶液显樱红色。

〔小檗碱〕。

②取黄连粉末置载玻片上，加95%乙醇1-2滴与30%硝酸1滴，盖上盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出。

〔硝酸小檗碱〕。

③取川乌粉末0.5g，加乙醚10ml与氨试液0.5ml振摇10分钟，滤过。

滤液置分液漏斗中，加硫酸〔0.25mol/L〕20ml，振摇提取，分取酸液适量，用水稀释，置可见紫外分光光计中测定，在231nm的波长处有最大吸收〔示教〕。

1．绘黄连根茎横切面简图。

2．绘黄连粉、甘草末显微特征图。

3．记录黄连理化反响现象。

实验六人参、桔梗等的鉴别

3目的要求

熟悉人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党参的性状鉴别要点

掌握人参横切面结构特点与粉末显微特点，了解人参理化鉴别方法

熟悉桔梗、当归粉末显微特点

紫外光灯、生物显微镜、酒精灯

甲醇、正丁醇、硅胶G、0.5%CMC、醋酸乙酯、硫酸、水合氯醛、甘油

人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党参

横切片：

人参〔永久制片〕

人参、当归、桔梗。

1．观察人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党参的性状特征。

2．观察人参横切面组织结构特征。

3．观察人参粉末显微特征。

4．观察人参理化鉴别。

1．性状鉴别

取人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党参药材，观察性状特征。

取人参永久制片，观察显微特征。

取人参、当归、桔梗粉末，观察粉末显微特征。

3．理化鉴别〔示教〕

取人参、西洋参粉末〔40目〕各2g，分别加醇25ml，放置过夜，加热回流6个小时，放冷，过滤，取滤液12.5ml，〔相当生药1g〕，蒸干，溶于水15ml中，用乙醚提取2-3次，〔每次15ml〕，醚液弃去，水层用水饱和的正丁醇萃取四次〔每次15ml〕，合并正丁醇提取液，用水洗2-3次，最后将正丁醇减压浓缩至干，残渣溶于2ml甲醇中，做供试品溶液。

取人参皂甙Re、RblRgl对照品，分别加甲醇溶液制成1mg/ml溶液，做对照品溶液。

吸取上述二溶液各10μl，分别点于同一以0.5%CMC为粘合剂的硅胶G薄层板〔用前在105℃，活化40分钟〕上。

以正丁醇一醋酸乙酯一水〔4:

1:

5〕为展开剂，〔展开前饱和15分钟〕。

展距11cm。

取出，晾干，喷以10%乙醇溶液，于105℃烘烤10分钟，斑点显不同程度紫色。

置365nm紫外光下观察，样品可见7-8个斑点，其中有三个斑点与对照品人参皂甙Re、Rb1、Rg1相对应〔示教〕。

1．绘人参横切面结构简图。

2．绘人参、当归、桔梗粉末显微特征图。

实验七、石菖蒲、半夏、天麻等的鉴别

4目的要求

熟悉半夏、水半夏、天南星、虎掌南星、石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲、天麻的性状鉴别特征。

掌握石菖蒲横切面结构特征。

掌握半夏、天麻粉末显微特征。

生物显微镜、酒精灯

水合氯醛、甘油、碘试液

石菖蒲、半夏、水半夏、水菖蒲、天南星、九节菖蒲、虎掌南星、天麻、百部

半夏、天麻

石菖蒲

稀甘油、水合氯醛

1．观察石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲、半夏、水半夏、天南星、虎掌南星和天麻性状特征。

2．观察半夏、天麻粉末显微特征。

观察石菖蒲、九节菖蒲、水菖蒲横切面结构特征。

3．作天麻理化鉴别。

1．取石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲、半夏、水半夏、天南星、虎掌南星药材，观察性状特征。

2．取石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲作徒手切片，以水合氯醛透化后观察横切面显微特征。

取半夏粉末，观察粉末显微特征。

3．取天麻粉末1g，加水10ml，浸泡4小时，时时振摇，滤过，取滤液1ml，滴加稀碘液2滴，观察反响现象。

1．绘石菖蒲横切面结构简图。

2．绘半夏、天麻粉末显微特征图。

实验八关木通、沉香等的鉴别

5目的要求

熟悉关木通、川木通、大血藤、鸡血藤、苏木、降香、沉香、钩藤的性状特征。

掌握关木通、沉香的粉末显微特征。

了解川木通粉末显微特征。

紫外光灯、生物显微镜、滤纸、酒精灯

70%乙醇、稀盐酸、氢氧化钙、氢氧化钠、氨试液、水合氯醛、甘油

关木通、川木通、大血藤、鸡血藤、沉香、钩藤、苏木、降香

关木通、沉香

1．观察关木通、川木通、大血藤、鸡血藤、沉香、钩藤、苏木、降香性状特征。

2．观察关木通、沉香粉末显微特征。

3．观察关木通理化鉴别现象。

四、实验内容

取关木通、川木通、大血藤、鸡血藤、沉香、钩藤、苏木、降香药材，观察性状特征。

取关木通、沉香、川木通粉末，装片，观察显微特征。

①取关木通粉末1g加70%乙醇20ml，回流15分钟，放冷，滤过，取滤液点于滤纸上，晾干后置紫外灯光〔365nm〕下观察，显天蓝色荧光，于点样处加稀盐酸1滴，晾干后呈黄绿色荧光；

用氨试液熏后复显天蓝色荧光。

②取苏木一小块，滴加氢氧化钙试液显深红色〔示教〕。

③取苏木粉末10g，加水50ml，放置4小时，时时振摇，滤过、滤液呈橘红色，置紫外灯光下观察，显蓝色荧光。

再滤液5ml，加氢氧化钠试液2滴，显猩红色，置紫灯光下观察，显蓝色荧光。

再加盐酸使呈酸性后，溶液变为橙色，置紫外灯灯光下观察，显黄绿色荧光〔示教〕。

④沉香、降香火烧试验〔示教〕。

1．绘关木通、沉香粉末显微特征图。

2．记录关木通现化鉴别过程与现象。

实验九厚朴、肉桂、杜仲等的鉴别

6目的要求

熟悉厚朴、肉桂、杜仲、牡丹皮、合欢皮的性状特征。

掌握厚朴、肉桂、杜仲的粉末显微鉴别特征。

了解牡丹皮、肉桂的理化鉴别原理与方法。

紫外分光光度计、生物显微镜，微量升华装置。

三氯化铁乙醇溶液、无水乙醇、氯仿、1%盐酸苯肼。

厚朴、肉桂、杜仲、牡丹皮、合欢皮。

厚朴、杜仲、肉桂、牡丹皮、

1．观察厚朴、肉桂、杜仲、牡丹皮、合欢皮的性状特征。

2．观察厚朴永久切片的显微结构特征。

3．观察厚朴、肉桂、杜仲的粉末显微特征。

4．观察牡丹皮理化鉴别反响现象。

1．性状鉴别：

取厚朴、肉桂、杜仲、牡丹皮、合欢皮药材，观察性状特征。

观察厚朴永久制片显微结构特征。

取厚朴、肉桂、杜仲粉末，水合氯醛透化装片，观察显微特征。

①取牡丹皮粉末适量，微量升华，升华物在显微镜下观察，可见长棱形结晶或针状与羽状簇晶，于结晶上滴加三氯化铁溶液，那么结晶溶液解而呈暗紫色，〔检查牡丹酚〕。

②取牡丹皮粉末0.15g，加无水乙醇25ml，振摇数分钟，滤过、取溶液1ml，用无水乙醇稀释至25ml，在274nm的波长外有最大吸收。

③取肉桂粉末0.1g，加氯仿振摇后，吸取氯仿2滴，滴于载玻片上，待干后，加1%的盐酸苯肼1滴，加盖玻片镜检，可见杆状结晶。

1．观察厚朴横切面结构简图。

2．绘厚朴、肉桂、杜仲粉末显微特征图。

实验十黄柏、秦皮、番泻叶等的鉴别

7目的要求

熟悉黄柏、秦皮、香加皮、地骨皮、五加皮的性状鉴别特征

掌握黄柏、秦皮、大青叶、番泻叶粉末显微鉴别特征

掌握黄柏横切面组织结构特征

掌握秦皮理化鉴别

紫外分光光度计、生物显微镜、蒸馏装置、烧瓶、量瓶、试管。

乙醇、硫酸、氯试液、1%三氯化铁、氨试液。

川黄柏、关黄柏、秦皮、香加皮、地骨皮、五加皮、大青叶、番泻叶。

黄柏。

黄柏、秦皮、大青叶、番泻叶。

1．观察黄柏、秦皮、香加皮、地骨皮、五加皮、大青叶、番泻叶的性状特征。

2．观察黄柏横切面显微特征。

3．观察黄柏、秦皮、大青叶、番泻叶粉末显微特征。

4．观察黄柏、秦皮理化鉴别反响现象。

取川黄柏、关黄柏、秦皮、香加皮、地骨皮、五加皮、大青叶、番泻叶药材，观察性状。

取黄柏永久制片或药材，作徒手切片，以水合氯醛透化后观察显微特征。

取黄柏、秦皮、大青叶、番泻叶药材，装片粉末，观察粉末显微特征。

①取黄柏粉末0.1g，加乙醇10ml，振摇数分钟、滤过、滤液加硫酸1ml，沿管壁滴加氯试液1ml，在两注接界处显红色环〔检查小檗碱〕〔示教。

〕

②取秦皮少许，加热水浸泡，浸出液在日光下可见碧蓝色荧光。

③取秦皮粉末1g，加乙醇10ml，置水浴上回流10分钟，滤过。

取滤液1ml，滴加1%三氯化铁试液2-3滴，显暗绿色，再加氨试液3滴与水6ml，摇匀、对光观察，显深红色〔示教〕。

④取香加皮粉末10g，量250ml烧瓶中，加水150ml，加热蒸馏，馏出液具有特异香气，收集馏出液10ml，置试管中，加1%三氯化铁溶液1滴，即显红棕色〔示教〕。

⑤取香加皮粉末1g，加乙醇10ml，加热回流1小时，滤过，置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度。

取1ml，置20ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，在270nm的波长处有最大吸收〔示教〕。

1．绘黄柏、秦皮、番泻叶粉末显微特征图。

实验十一丁香、洋金花、金银花等的鉴别

8目的要求

熟悉丁香、洋金花、金银花的性状鉴别特征。

掌握丁香、洋金花、金银花粉末的显微鉴别。

掌握掌握整体封藏的处理药材的方法。

酒精灯、生物显微镜

金银花、洋金花、丁香

3观察金银花、洋金花、丁香的性状特征。

4观察金银花整体封藏显微特征。

3．观察金银花、洋金花、丁香的粉末显微特征。

取金银花、洋金花、丁香药材，观察性状特征。

①粉末：

取金银花、洋金花、丁香粉末，以水合氯醛透化装片，观察显微特征。

1．绘金银花、洋金花、丁香粉末显微特征图。

实验十二红花、番红花等的鉴别

10目的要求

掌握菊花、红花、番红花、蒲黄、海金砂、松花粉的性状鉴别特征。

掌握红花、番红花、蒲黄、海金砂、松花粉的显微鉴别。

掌握番红花的理化鉴别。

白瓷板、生物显微镜、烧杯、滤纸、酒精灯

甲醇、硅胶H、绿原酸对照品，醋酸丁酯、甲酸、硫酸、水合氯醛、甘油

菊花、红花、番红花、蒲黄、海金砂、松花粉

菊花、红花、番红花

1．观察菊花、红花、番红花、蒲黄、海金砂、松花粉的性状特征。

2．观察番红花整体封藏显微特征。

3．观察红花、蒲黄、海金砂、松花粉粉末显微特征。

4．观察红花、番红花理化鉴别反响现象。

5．观察松花粉、海金砂、蒲黄的理化鉴别现象。

取菊花、〔杭菊、滁花、贡菊〕、红花、番红花药材，观察性状特征。

取红花、松花粉、海金砂、蒲黄粉末，水合氯醛透化装片，观察显微特征。

②整体封藏：

取西红花，整体封藏后，观察显微特征。

①取红花粉末1g，加稀乙醇10ml，浸渍1h，倾取浸渍液，于浸出液中悬挂一滤纸条，5分钟后将滤纸条放入水中，随即取出，滤纸条上部呈淡黄色，下部显淡红色。

②取西红花少许，置白瓷板上，滴加硫酸1滴，那么出现蓝色，渐变为紫色，后变为红褐色或棕色。

另取西红花少许浸入水中可见橙黄色成直线下降逐渐扩散，水被染成黄色，不显红色，无沉淀，柱头呈喇叭状，有短缝。

1．绘红花、松花粉、海