微生物培养基种类大全.docx

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微生物培养基种类大全

摘要：

1、营养琼脂（普通琼脂）成份：

牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏

汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：

将上物加热溶解，补足

水，调ph至7.6,过滤分装121C,高压灭菌15分钟。

用途：

作普通琼脂平皿。

2、血琼脂平板（BA）制法：

取营养琼脂（PH7.6）,加热使其溶解待冷至45-50C,以灭菌操作于每100毫升营养

1、营养琼脂（普通琼脂）

成份：

牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升

琼脂（视天气，琼脂质量而定）

制法：

将上物加热溶解，补足水，调ph至7.6,过滤分装121C,高压灭菌15分钟。

用途：

作普通琼脂平皿。

2、血琼脂平板（BA）

制法：

取营养琼脂（PH7.6）,加热使其溶解待冷至45-50C,以灭菌操作于每

100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升，轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。

用途：

1.一般棉拭子均接种此培养基。

2.尿液，脓液

3.分离细菌标本用。

3、基础培养基（肉膏汤BB）

成份：

蛋白豚10克牛肉膏5克

氯化钠5克水1000毫升

制法：

将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121c高压灭菌，20分钟备用。

用途：

1作耐药试验，增菌用分装小管。

2作普通琼脂斜面。

4、血液培养基（大管肉汤培养基）

成份：

1新鲜牛肉浸液1000毫升

2PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕）1g%1毫升

3MgSO4［相当于0.493/100毫升］49.3%1毫升

4枸椽酸钠0.3g

制法：

1将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。

2取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管，行无菌试验三天方可使用。

用途：

作血，骨髓培养用。

5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）

成份：

蛋白冻10克乳糖10克

氯化钠5克琼脂25（22）克

水10004升2%伊红?

§液20毫升

0.5%美兰溶液20毫升

制法：

将蛋白陈，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7.4过滤，补足失水，加入2%伊红?

§液20毫升，0.5%美兰溶液20毫升，（115C高压2吩钟），冷却至50c左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。

（高压以后方可再加乳糖）用途：

用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。

1

6、罗文斯坦培养基

成份：

磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克

枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克

纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升

马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）

2%孔雀绿水溶液20毫升

制法：

1除鸡蛋外（还有孔雀绿）。

可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，局压火困。

2鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

3将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。

4间歇灭菌第一次90C1小时，第二次80c半小时，第三次80c半小时（或放85c烤箱内连续二次）。

质控标准：

1灭菌试验合格。

2接种结核杆菌要求两星期生长良好。

用途：

作结核分枝杆菌培养用。

琼脂1.5克（80小时用甲醇去脂）

1%孔雀绿0.78毫升吐温80（10%）5毫升

加动物血清100毫升

制法：

1除血清外将上述药品均称好，放入煮沸溶解，调PH7。

2

2分管（每管约10毫升）包扎好，高压，121c半小时灭菌。

3待冷后无菌法加无菌血清（绵羊血或兔血）每管约1毫升备用。

4去除琼脂方法：

取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,

放37c温浴80小时，每天摇动一次，冷却后到时取出用滤纸过滤，待琼脂自然冷却后备用。

质控标准：

1无菌实验合格。

2琼脂硬度合适而清亮。

3接种标准结核杆菌用，强度合适即可用。

用途：

培养结核杆菌用。

8、亚硫酸钾血琼脂平板

成份：

琼脂基础100毫升10%葡萄糖2毫升

1%亚硫酸钾4.5毫升绵羊血10毫升

制法：

1将琼脂基础溶解好，加入羊血。

2马上加热使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚硫酸4.5毫

开混合后倒入无菌平板，凝固后存冰箱备用。

质控标准：

接种白喉杆菌生长良好，其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

用途：

供培养及鉴别白喉杆菌用。

9、米培养基

11、血培养基

成份：

蛋白陈10克

氯化钠5克

枸椽酸钠3克

0.5%PABA10毫升

*酚红0.4%6毫升

成份：

白米20克水1000毫升

琼脂20克吐温8010毫升

制法：

1将20克米加水200毫升煮沸4盼钟，煮时将容器盖好。

2用纱布过滤，只要米汤，不要饭，加水至10004升。

3加琼脂20克，吐温-8010毫升煮溶，分装中型管（每管约3毫升），包扎好,高压，121c半小时，消毒备用。

质控标准：

1灭菌。

2要求清亮。

3接种白色念珠菌17-24小时生长良好，并产生厚膜抱子。

用途：

培养白色念珠菌用。

10、蛋白陈水培养基

成份：

蛋白陈1克氯化钠0.5克

水加至100毫升PH调至7.8

制法：

把以上各物称好溶于水，调节PH7.6分装消毒备用

质控标准：

1放置37c无菌生长。

2接种大肠杆菌24小时生长良好。

3可作中国兰平板基础液

可作靛基质基础液（作此试验需要色氨酸蛋白陈）

牛肉膏5克

葡萄糖3克

MgSO4o7H2O20毫升

酵母浸液10毫升0.2克（2%过滤）

水1000毫升

琼脂0.5克

*:

作大BB,小BB时，不要加酚红和琼脂。

制法：

1、除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.4

2、调好PH后再加酚红。

3、硫酸镁、PABA另外无菌再加入（亚细，小BB）

12、沙氏培养基

成份：

蛋白陈1克水100毫升

琼脂1.5克（琼脂粉1克％）葡萄糖或麦芽糖4克

制法：

1将上述物质称好，放入水中煮沸溶解（不必调PH即有5左右）分中号试

管（约4毫升）包扎，高压115c2吩钟。

2趁热斜好，凝固备用。

质控标准：

1无菌试验合格。

2接种霉菌比在其它培养基上生长良好，其它菌生长不好。

用途：

作分离培养霉菌用。

注意：

1接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12.5%氯霉素沙氏斜面培养基上。

2也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。

13、肉渣培养基

成份：

牛肉渣牛肉浸液（牛肉膏）

制法：

将做牛肉浸液的牛肉渣，装入试管，高约3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏汤（PH7.6^^5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高约0.5

厘米（不加也可），121C高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用。

用途：

用于厌氧菌培养。

注意：

如无肉渣也可用牛、羊血等代替，将血块先放入水内煮沸，取出成小块，血块在加热后摇匀成碎颗粒状。

14、单糖发酵管培养基（半固体）

成份：

PH7.6-7.8蛋白月S水1000毫升（0.3克/100毫升）

1.2%酚红液0.4毫升

琼脂0.4-0.5克

10%糖或醇10毫升

制备：

把蛋白陈水，琼脂加热溶解，然后加1.2%酚红液0.4毫升，10%糖10毫升，混匀，分装试管，每管约2-3毫升，经115c高压灭菌20分钟后，分置于试管架上，贴上各类糖或醇类标签备用。

质控标准：

细菌发酵糖类或醇而产生酸，能使培养基PH改变，指示剂由红变黄色，如因发酵产生气体则半固体内产生气泡，如有动力则半固体由清亮变混浊。

15、明胶培养基

成份：

肉浸液1000毫升（牛肉浸膏5克）

明胶12克

制法：

100毫升肉浸液中，加入明胶12克，隔水加热煮化，校正PH7.2,分装小号试管，用阿诺氏间歇灭菌80c30分钟，连续3日，或者108c高压20分钟，冷却，贮存备用。

15-1、碱性蛋白陈水

成份：

蛋白豚20克氯化钠5克

硝酸钾0.1克结晶碳酸钠（NaclCO3.12H2O）0.2克

水1000毫升

制法：

将蛋白陈，Nacl,硝酸钾，结晶碳酸钠称好，溶于1000DW中，校正PH8.4分装试管，121c高压灭菌15分钟后备用。

用途：

用于霍乱弧菌培养。

16、葡萄糖蛋白陈水（M。

V用）

成份：

蛋白陈5克葡萄糖5克

K2HPO45克水1000毫升

制法：

将上述称好溶解分装试管，调PH7.4高压灭菌115c灭菌20分钟，或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管

标准：

灭菌试验合格。

接种大肠杆菌VP阴性，M阳性；接种产气杆菌VP阳性，M阴性。

用途：

作鉴别肠道杆菌用。

17、枸椽酸盐培养基

成份：

磷酸二氢钱0.1克硫酸镁0.02克

磷酸氢二钾0.1克枸椽酸钠0.23--0.5克（0.36）

氯化钠0.5克琼脂1.5克

0.5%澳麝香草酚兰2毫升（调PH6.8再加）

制法：

将上述称好，放入水中煮沸溶解，调PH6.8,然后分装中号试管，高压灭菌，趁热倒呈斜面，凝固后备用。

标准：

1、灭菌试验合格，培养基呈果绿色适宜。

2、接种大肠杆菌，培养基上不生长，也不变色。

3、接种产气杆菌，培养基呈深兰色。

用途：

作鉴别大肠杆菌用。

18、双糖铁培养基

成份：

下层：

蛋白陈1克氯化钠0.5克

葡萄糖0.2克琼脂0.3-0.5克

水100毫升

将上述物质混匀调PH7.6后加1.2%酚红0.4毫升

上层：

蛋白陈1克氯化钠0.5克

乳糖1克硫代硫酸钠0.03克

硫酸亚铁0.02克琼脂1克

水100毫升

制法：

1将下层配好，分装中号试管（1毫升），塞好包扎，15磅高压灭菌半小时,使凝固后备用。

2制上层时，先将蛋白陈水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解PH8.1,再加入酚红分瓶，（每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112c消毒15分钟）。

3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。

5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。

标准：

无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。

19、尿素培养基

成份：

蛋白陈0.1克氯化钠0.5克

磷酸二氢钾0.2克尿素0.2克（或10%2毫升）

葡萄糖0.01克（或10%葡萄糖0.1毫升）

H2O100毫升酚红（0.2%）0.4毫升

制法：

1除葡萄糖，尿素外把其它药品称好放入水中煮沸，使溶解，调PH7.2过滤，15磅高压灭菌15分钟.

2配制尿素（灭菌）液：

每10建开基7内加2毫升.

3配制10%葡萄糖（灭菌）每100毫升加0.1毫升.

4分装小试管待用.

标准：

1灭菌试验合格.

2接种变形杆菌24小时呈红色.

用途：

鉴定变形杆菌用.

20、胆盐中性红琼脂

成份：

蛋白陈琼脂PH7.2-7.45000毫升

胆盐2.5克

乳糖5.0克

对氨基苯甲酸25毫克

1%中性红溶液25毫升

制法：

将胆盐，对氨基苯甲酸，乳糖趁热加入已灭菌之蛋白陈琼脂中，待冷至50-60C时，加入1%中性红液2.5毫升，混合后即倾注平皿，凝固待用.

*:

1%中性红：

1克中性红加酒精60毫升，加水40毫升

21、丙二酸盐培养基（缩苹果酸钠）

成份：

丙二酸钠0.3克酵母浸膏0.1克

Nacl0.2克硫酸俊0.2克

K2HPO40.06克KH2PO40.04克

水100毫升

PH6.8,高压灭菌备用.

0.2%澳麝香酚兰乙醇1.25毫升

制法：

与枸椽酸盐利用试验相类似，是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源.无机俊盐为氨源而生长，生长者使培养基变成碱呈兰色.

鉴定：

克氏杆菌（+）赫夫尼亚（+）

沙门氏菌

（一）痢疾杆菌

（一）