3.生理条件下（pH7.0左右），蛋白质分子中的________侧链和________侧链几乎完全带正电荷，但_______侧链带部分正电荷。
4.测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在_____，主要由于蛋白质中存在着______、_、______氨基酸残基侧链基团。
5.皮肤遇茚三酮试剂变成色，是因为皮肤中含有所致。
6.Lys的pk1（
）=2.18，pk2（
）=8.95，pk3（
）=10.53，其pI为。
在pH=5.0的溶液中电泳，Lys向极移动。
7.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定
上放出的。
8.一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值和离子强度的缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。
9.决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在的主要因素是由
________来决定的。
10.测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是___________。
11.从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的、、、、。
12.蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括________、________、________等，维系蛋白质二级结构的主要作用力是_____键。
13.蛋白质的
—螺旋结构中，个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升的高度为nm，旋转度。
14.交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的性质。
阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带电荷，可吸引带电荷的蛋白质，然后用带电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。
二、选择题
1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据（）
A.所含的羧基和氨基的极性 B.所含氨基和羧基的数目
C.所含的R基团为极性或非极性 D.脂肪族氨基酸为极性氨基
2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸（）
A.亮氨酸 B.异亮氨酸C.苯丙氨酸 D.酪氨酸
3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸：
（）
A.精氨酸，赖氨酸 B.谷氨酸，谷氨酰胺
C.组氨酸，精氨酸 D.谷氨酸，天冬氨酸
4.含硫的必需氨基酸是（）
A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.苏氨酸D.亮氨酸
5.芳香族必需氨基酸包括（）
A.蛋氨酸B.酪氨酸C.亮氨酸D.苯丙氨酸
6.含四个氮原子的氨基酸是（）
A.赖氨酸B.精氨酸C.酪氨酸D.色氨酸
7.蛋白质中不存在的氨基酸是下列中的哪一种？
（）
A.赖氨酸B.羟赖氨酸C.酪氨酸D.鸟氨酸
8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是（）
A.苏氨酸B.甘氨酸C.半胱氨酸D.谷氨酰胺
9.谷氨酸的PK值为2.19,4.25,9.76;赖氨酸的PK值为2.18,8.95,10.53;则它们的PI值分别为（）
A.2.19和10.53B.3.22和9.74C.6.96和5.56D.5.93和6.36
10.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是（）
A.纸层析B.阳离子交换层析C.电泳D.葡萄糖凝胶过滤
11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是（）
A.Sanger试剂B.Edman试剂C.两者均可D.两者均不可
12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是（）
A.Val（PI5.96）B.Lys（PI9.74）C.Asp（PI2.77）D.Arg（PI10.76）
13.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的？
（）
A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子
14.可使二硫键氧化断裂的试剂是（）
A.尿素B.巯基乙醇C.过甲酸D.SDS
15.Sanger试剂是（）
A.苯异硫氰酸酯B.2,4—二硝基氟苯C.丹磺酰氯D.β—巯基乙醇
16.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（）
A.MetB.SerC.GluD.Cys
17.以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a－螺旋（）
A.PheB.CysC.TrpD.Pro
18.蛋白质分子中α螺旋的特点是（）
A.肽键平面完全伸展B.靠盐键维持稳定C.多为右手螺旋D.螺旋方向与长轴垂直
19.为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入（）
A.硫酸铵B.三氯乙酸C.NH4ClD.氯化汞
20.有一个肽用胰蛋白酶水解得：
①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段，用BrCN处理得：
④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为（）
A.3+2+1B.5+4C.2+1+3D.2+3+1E.1+2+3
21.蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（）
A.生物活性丧失 B.易被降解 C.一级结构改变 D.空间结构改变E.次级键断裂
22.关于蛋白质三级结构的描述，下列哪项是正确的（）
A.疏水基团位于分子内部B.亲水基团位于分子内部
C.羧基多位于分子内部D.二硫键位于分子表面
23.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是（）
A.牛胰岛素（分子量5700）B.肌红蛋白（分子量16900）
C.牛β乳球蛋白（分子量35000）D.马肝过氧化物酶（分子量247500）
24.镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸的替换及位置是（）
A.α链第六位Val换成GluB.β链第六位Val换成Glu
C.α链第六位Glu换成ValD.β链第六位Glu换成Val
三、名词解释
1.α-氨基酸2.氨基酸的等电点3.层析4.蛋白质的沉淀5.蛋白质的变性6.结构域
四、问答题
某八肽的氨基酸组成是2Lys,Asp,Tyr,Phe,Gly,Ser和Ala。
此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。
用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽的氨基酸组成分别为Lys,Ala,Ser和Gly,Phe,Lys。
用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽，四肽的氨基酸组成是Lys,Ser,Phe,Ala,三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNP—Gly。
根据上述结果分析，写出该八肽的氨基酸排列顺序，并简述分析过程。
生化测试二：
酶化学
一、填空题
1.酶的活性中心有__________和_________两个功能部位，其中________直接与底物结合，决定酶的专一性，__________是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
2.温度对酶活性的影响有以下两个方面，一方面，另一方面。
3.酶活力是指_________________，一般用________________________表示。
4.全酶有________和_________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中________决定专一性和效率，__________起传递电子、原子或化学基团的作用。
5.酶活性的快速调节方式包括_________和_________。
6.酶作为生物催化剂的特点为___________、____________、___________、____________。
二、选择题
1.竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关（）
A.作用时间B.抑制剂浓度C.底物浓度D.酶与抑制剂亲和力的大小
E.酶与底物亲和力的大小
2.关于变构酶下列哪一种说法是错的（）
A.变构效应剂多为酶的底物或产物B.存在催化与调节两个活性部位
C.反应符合米-曼氏方程式D.反应曲线呈S形E.一般由多个亚基组成
3.酶的竞争性可逆抑制剂可以使（）
A.Vmax减小，Km减小B.Vmax增加，Km增加C.Vmax不变，Km增加
D.Vmax不变，Km减小E.Vmax减小，Km增加
4.有关全酶的描述下列哪一项不正确（）
A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成B.酶促反应的高效率取决于酶蛋白
C.一种辅助因子可与不同的酶蛋白结合D.酶促反应的特异性取决于辅助因子
5.酶的抑制剂（）
A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性
C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响D.一般为强酸，强碱E.都和底物结构相似
6.同工酶的叙述，正确的是（）
A.结构相同来源不同B.由不同亚基组成
C.电泳迁移率往往不同D.对同一底物具有不同专一性
7.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于（）
A.不可逆抑制B.反竞争性可逆抑制C.竞争性可逆抑制D.非竞争性可逆抑制
8.关于酶的必需基团的错误描述是（）
A.可催化底物发生化学反应B.可与底物结合C.可维持酶活性中心的结构
D.可存在于酶的活性中心以外E.只存在于酶的活性中心
9.某一符合米曼氏方程的酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于（）
A.VmaxB.2/3VmaxC.3/2VmaxD.2VmaxE.1/2Vmax
10．酶的非竞争性抑制作用的特点是（）
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小
11．关于修饰酶的错误描述是（）
A.酶分子可发生可逆的共价修饰B.这种修饰可引起其活性改变
C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应
E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式
三、是非题
1.Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。
（）
2.酶的最适PH值是一个常数，每一个酶只有一个确定的最适PH值。
（）
3.金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。
（）
4.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。
（）
5.从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖（Km=6X10-6mol/l）或果糖（Km=2X10-3mol/l），则该酶对果糖的亲和力更高。
（）
四、名词解释
1.酶的变构调节2.酶的活性中心3.酶的活力单位4.酶的比活力
五、计算题
焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。
一个活力单位规定为：
在标准的测定条件下，37℃，15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量。
问：
1）毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物？
2）每毫克酶中有多少摩尔的活性中心？
（假定每个亚基上有一个活性中心）
生化测试三：
核酸化学
一、填空题
1．和构成核苷，核苷和构成核苷酸，核苷酸残基之间以键相连。
2．tRNA的二级结构呈型，三级结构呈型。
3．DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度，可使其物化性质发生很大改变，如和
，这种现象叫做。
其原因是由于。
4．Watson－Crick提出的双螺旋结构中，__________处于分子外边，___________处于分子中央，螺旋每上升一圈bp数为______________。
5．RNA分子指导蛋白质合成，RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。
6．双链DNA中若_____________含量多，则Tm值高。
7．核酸在260nm附近有强吸收，这是由于_____________。
二、选择题
1．DNA和RNA两类核酸分类的主要化学依据是（）
A.空间结构不同B.所含碱基不同C.核苷酸之间连接方式不同
D.所含戊糖不同E.在细胞存在的部位不同
2．DNA受热变性，下列叙述正确的是（）
A.在260nm波长处的吸光度下降B.多核苷酸键断裂成寡核苷酸键
C.碱基对可形成共价连接D.加入互补RNA链并复性，可形成DNA-RNA杂交分子
3．在一个DNA分子中，若A占摩尔比为32.8%，则G摩尔比为（）
A.67.2%B.32.8%C.17.2%D.65.6%E.16.4%
4．对DNA片段作物理图谱分析，需要用（）
A.核酸外切酶B.DnaseIC.DNA连接酶
D.DNA聚合酶IE.限制性内切酶
5．单链DNA：
5’—pCpGpGpTpA—3’，能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交？
（）
A.5’—pGpCpCpTpA—3’B.5’—pGpCpCpApU—3’C.5’—pUpApCpCpG—3’D.5’—pTpApGpGpC—3’E.5’—pTpUpCpCpG—3’
6．核酶（ribozgme）的底物是（）
A.DNA B.RNA C.核糖体 D.细胞核膜 E.核蛋白
三、是非题
1．生物信息的流向只能由DNA→RNA，而决不能由RNA→DNA。
（）
2．在生物体内存在的DNA分子多为负超螺旋。
（）
3．若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC，则另一条链的顺序为pGpApCpCpTpG。
（）
4．核酸内切酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。
（）
5．核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C糖苷键。
（）
6．限制性内切酶是特异核酸碱基序列专一性水解酶。
（）
7．DNA中碱基摩尔比规律（A=T；G=C）仅适用于双链DNA，而不适用于单链DNA。
（）
8．RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。
（）
9．DNA是生物界中唯一的遗传物质。
（）
10．在一个生物体不同组织中的DNA，其碱基组成不同。
（）
11．DNA双螺旋中A、T之间有3个氢键，G、C之间有2个氢键。
（）
四、名词解释
1.分子杂交2.增色效应3.Tm值4.DNA的变性与复性5.超螺旋：
生化测试四：
生物氧化
一、填空题
1.真核细胞的呼吸链主要存在于线粒体内膜，而原核细胞的呼吸链存在于细胞膜。
2.呼吸链上流动的电子载体包括CoQ和cytC。
3.内膜上能够产生跨膜的质子梯度的复合体是复合体Ⅰ、复合体Ⅲ和复合体Ⅳ。
4.氰化物使人中毒的机理是氰化物阻断了电子从cytaa3向O2的传递，从而抑制了ATP（能量）的生成。
5.典型的呼吸链包括NADH呼吸链和FADH2呼吸链两种，这是根据接受代谢物脱下的氢的受体不同而区别的。
6.填写电子传递链中阻断电子流的特异性抑制剂：
NAD→FMN→CoQ→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2、
7.化学渗透学说主要论点认为：
呼吸链组分定位于线粒体内膜上。
其递氢体有质子泵作用，因而造成内膜两侧的质子浓度差，同时被膜上ATP合成酶所利用，促使ADP＋Pi→ATP。
8.呼吸链中氧化磷酸化生成ATP的偶联部位是复合体Ⅰ、复合体Ⅲ和复合体Ⅳ。
二、选择题
1.关于有氧条件下，NADH从胞液进入线粒体氧化的机制，下列哪项描述是正确的？
（D）
A.NADH直接穿过线粒体膜而进入
B.磷酸二羟丙酮被NADH还原成3-磷酸甘油进入线粒体，在内膜上又被氧化成磷酸二羟丙酮同时生成NADH
C.草酰乙酸被还原成苹果酸，进入线粒体后再被氧化成草酰乙酸，停留在线粒体内
D.草酰乙酸被还原成苹果酸进入线粒体，然后再被氧化成草酰乙酸，再通过转氨基作用生成天冬氨酸，最后转移到线粒体外
E.通过肉毒碱进行转运进入线粒体
2.寡霉素通过什么方式干扰了ATP的合成？
（D）
A.使细胞色素C与线粒体内膜分离B.使电子再NADH与黄素酶之间的传递被阻断
C.阻止线粒体膜上的肉毒碱穿梭D.抑制线粒体膜上的ATP酶
E.使线粒体内膜不能生成有效的氢离子梯度
3.肌肉或神经组织细胞内NADH进入线粒体的主要是（A）
A.磷酸甘油穿梭机制B.柠檬酸穿梭机制C.肉毒碱穿梭机制
D.丙酮酸穿梭机制E.苹果酸-天冬氨酸穿梭机制
4.下列化合物中，除了哪一种以外都含有高能磷酸键？
（D）
A.NAD＋B.ADPC.NADPHD.FMNE.PEP
三、名词解释
1.呼吸链2.氧化磷酸化3.高能化合物4.解偶联作用
生化测试五：
糖代谢
一.填空题
1.糖酵解途径的反应全部在细胞进行。
2.糖酵解途径唯一的脱氢反应是，脱下的氢由递氢体接受。
3.糖酵解途径中最重要的关键酶是。
4.一次三羧酸循环有次脱氢过程和次底物水平磷酸化过程。
5.磷酸戊糖途径的生理意义是生成。
6.肌肉不能直接补充血糖的主要原因是缺乏。
7.酶催化的反应是EMP途径中的第一个氧化反应。
分子中的磷酸基团转移给ADP生成ATP，是EMP途径中的第一个产生ATP的反应。
8.葡萄糖的无氧分解只能产生分子ATP，而有氧分解可以产生分子ATP。
9.丙酮酸脱氢酶系位于上，它所催化的反应是葡萄糖代谢中第一次产生的反应。
10.TCA循环的第一个产物是。
由，和所催化的反应是该循环的主要限速反应。
11.TCA循环中有两次脱羧反应，分别是由和催化。
12.TCA循环中大多数酶位于，只有位于线粒体内膜。
13.EMP途径产生的NADH•H＋必须依靠系统或系统才能进入线粒体，分别转变为线粒体中的和。
14.糖异生主要在中进行。
二.选择题
1.丙酮酸羧化酶催化生成的产物是：
（）
A.乳酸 B.丙酮酸 C.苹果酸D.丙二酸单酰CoA E.草酰乙酸
2.糖有氧氧化、糖酵解和糖原合成的交叉点是在：
（）
A.1-磷酸葡萄糖 B.6-磷酸果糖 C.3-磷酸甘油醛D.6-磷酸葡萄糖 E.5-磷酸核糖
3.对于三羧酸循环，下列哪项是错误的：
（）
A.它是糖、脂肪和蛋白质在体内彻底氧化的共同代谢途径B.反应不可逆
C.催化反应的酶都在线粒体内D.一分子乙酰CoA进入该循环可产生12分子ATP
E.四次脱氢的受氢体均为NAD+
4.有关葡萄糖酵解的描述，下列哪项错误：
（）
A.1分子葡萄糖净生成2分子ATPB.ATP的生成部位在胞浆
C.ATP是通过底物水平磷酸化生成的D.ATP是通过H在呼吸链传递生成的
E.ATP的生成不耗氧
5.催化檬酸转变成α-酮戊二酸的酶是：
（）
A.异檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶 B.琥珀酸脱氢酶与乌头酸酶
C.乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶D.乌头酸酶E.柠檬酸合成酶和苹果酸酶
6.在糖原合成时，葡萄糖单位的供体是：
（）
A.1-磷酸葡萄糖 B.6-磷酸葡萄糖C.1-磷酸麦芽糖 D.GDPG E.UDPG
三、名词解释
1.糖酵解2.三羧酸循环3.糖异生
生化测试六：
脂代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢
一、填空题
1.脂肪酸合成过程中，乙酰COA主要来源于，NADPH主要来源于途径。
2.脂肪酸合成中酰基化合物的主要载体是，脂肪酸分解中酰基化合物的主要载体是。
3.脂肪的β-氧化包括，，，四个步骤。
4.乙酰COA和CO2反应生成，需要消耗高能磷酸键，并需要辅酶参加。
5.脂肪酸的合成部位是，分解部位是。
6.在脂肪酸的合成中，乙酰COA通过转运体系从（部位）进入（部位）。
7.人体内转运氨的形式有和。
8.联合脱氨基作用包括和两种方式。
9.嘧啶核苷酸的嘧啶环是由和合成的
二、选择题
1.线粒体外脂肪酸合成的限速酶是（）
A.酰基转移酶B.乙酰COA羧化酶C.肉毒碱脂酰COA转移酶Ⅰ
D.肉毒碱脂酰COA转移酶Ⅱ
2.奇数碳原子脂肪酰COA经β-氧化后除生成乙酰COA外还有（）
A.丙二酰COAB.丙酰COAC.乙酰COAD.乙酰乙酰COA
3.不饱和脂肪酸的氧化比饱和脂肪酸的氧化多了一种酶，是（）
A.硫解酶B.脂酰COA脱氢酶C.烯酰COA水合酶D.烯酰COA异构酶
4.下列哪一种物质的生物合成不需要PRPP（）
A.嘧啶核苷酸B.嘌呤核苷酸C.HisD.NAD（P）E.FAD
5.转氨酶的辅酶为（）
A．NAD+B.NADP+C.FADD.FMNE.磷酸吡哆醛
6.骨骼肌主要以嘌呤核苷酸循环脱氨基的原因是骨骼肌内（）
A．细胞没有线粒体B.L-谷氨酸脱氢酶活性低C.谷丙转氨酶活性低
D.氨基酸脱羧酶活性低E.氨基甲酰磷酸合成酶活性低
7.下列哪种氨基酸是尿素合成过程的中间产物（）
A.甘氨酸B.色氨酸C.赖氨酸D.瓜氨酸E.缬氨酸
8.下列哪一种氨基酸与尿素循环无关（）
A.赖氨酸B.精氨酸C.天冬氨酸D.鸟氨酸E.瓜氨酸
9.肝细胞内合成尿素部位是（）
A.胞浆B.线粒体C.内质网D.胞浆和线粒体
10.下列既参与嘌呤核苷酸合成又参与嘧啶核苷酸合成的物质是（）
A.谷氨酰胺B.谷氨酸C.甘氨酸D.丙氨酸E.天冬酰胺
11.脱氧核糖核苷酸生成的方式是（）
A.在一磷酸核苷水平上还原B.在二磷酸核苷水平上还原
C.在三磷酸核苷水平上还原D.在核苷水平上还原E.直接由核糖还原
12.dTMP合成的直接前体是：
（）
A.dUMPB.TMPC.TDPD.dUDP
13.生成甘油的前体是（）
A.丙酮酸B.乙醛C.磷酸二羟丙酮D.乙酰CoA
三、名词解释
1.限制性内切酶2.核苷酸的从头合成和补救途径3.联合脱氨基作用4.β－氧化
四、是非题
1.参与尿素循环的酶都位于线粒体内。
（）
2.氨基酸经脱氨基作用后留下的碳骨架进行氧化分解需要先能够进入TCA循环
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