届高考生物二轮复习专题24微生物的利用习题.docx
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届高考生物二轮复习专题24微生物的利用习题
2019届高考生物二轮复习专题24微生物的利用习题
破考点
考点一 微生物的实验室培养
【考点集训】
考向 培养基与微生物的纯化
1.（2019届吉林实验中学第三次月考,41,15分）下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方,据此回答下列问题:
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
尿素
葡萄糖
琼脂
14g
2.1g
0.2g
10g
10.0g
15.0g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL。
（1）从作用上看,该培养基属于 培养基,提供氮源的物质是 ,细菌能利用该氮源是由于体内能合成 酶。
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入 指示剂,若指示剂变 ,说明有目的菌株存在。
（3）为了测定微生物的数量,接种时应采用 法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每升原土壤样液中上述微生物的数量为 个,测定的活菌数比实际活菌数 （填“低”“高”或“基本一致”）。
答案
（1）选择（1分） 尿素 脲
（2）酚红 红 （3）稀释涂布平板 1.6×1012 低
2.（2019届宁夏育才中学第二次月考,37,15分）为了调查银川市自来水水源地的水质情况,某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定,请回答下列问题:
（1）该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌,划线时在培养基上共画了4个区域,则需要 次灼烧接种环。
在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是 。
（2）在纯化菌种时,所用的培养基都需要在接种前用 法进行灭菌。
将1mL水样稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液,经适宜条件下培养后,3个平板上的菌落数分别为51、50和49。
据此可得出每升水样中的活菌数为 。
要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。
（3）菌种需临时保藏时,要先将菌种接种到试管的 培养基上,在合适的温度下培养。
当菌落长成后,将试管放入 冰箱中保藏。
但此方法存在的缺点是 。
（4）在培养时,需将培养皿倒置并放在 中。
实验结束时,使用过的培养基应该进行 处理后才能丢弃。
答案
（1）5（1分） 将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌种的表面
（2）高压蒸汽灭菌 5.0×108 等量的无菌水 （3）固体斜面（1分） 4℃（1分） 保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异 （4）恒温培养箱（1分） 灭菌（1分）
考点二 微生物的分离与计数
【考点集训】
考向 微生物的分离与计数
1.（2019届湖北华中师大附中高三上学期期中,37,15分）为更好地解决冬季污水处理厂氨氮去除率低的问题,某研究小组尝试从海水中筛选在低温下能高效去除氨氮的硝化细菌。
将采集到的海水样本加入液体培养基A（其氮源为氨态氮）,放在24℃的培养箱中培养5天,然后取少量培养液在固体培养基上涂布,得到三种形态、颜色均不相同的单菌落。
回答下列问题:
（1）液体培养基A应选用的灭菌方法是 （填“高压蒸汽灭菌法”或“干热灭菌法”）,不选另外一种的原因是 。
（2）在配制培养基A时,对碳源的要求是 （填“提供有机碳源”或“不提供碳源”）,理由是 。
（3）最后分离得到的单菌落有三种,其形态、颜色各不相同,表明硝化细菌 。
（4）该研究小组在上述实验的基础上,已经获得了高效去除氨氮的硝化细胞,则需要经过 处理,才能筛选出符合要求的能高效去除氨氮的硝化细菌。
答案
（1）高压蒸汽灭菌法（2分） 干热灭菌法针对耐高温需要保持干燥的物品,若选干热灭菌法会使培养基中的水分蒸发（3分）
（2）不提供碳源（2分） 硝化细菌能进行化能合成作用,为自养生物（3分） （3）存在不同的种类（3分） （4）低温（2分）
2.（2019届四川南充一诊,37,15分）有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命。
某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。
请回答下列问题:
（1）为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及
等的选择培养基上添加适量的 进行选择培养。
（2）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是 。
若培养基需要调节pH,则应在灭菌之 （填“前”或“后”）调节。
（3）该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是
。
（4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用 直接计数,也可选用
法统计活菌数目。
（5）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜）,观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时,则应选择微生物 （填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养,理由是 。
答案
（1）水和无机盐 有机磷农药
（2）琼脂 前 （3）检测培养基平板灭菌是否合格 （4）血细胞计数板 稀释涂布平板 （5）丙 微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强
过专题
【五年高考】
A组 统一命题·课标卷题组
1.（2018课标全国Ⅰ,37,15分）将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。
回答下列问题:
（1）M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制 的生长,加入了链霉素的培养基属于
培养基。
（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有 （答出两点即可）。
氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有 （答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。
加入的显色剂是 ,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是
。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:
甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;
乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是 。
答案
（1）细菌 选择
（2）碳源、无机盐 蛋白质、核酸
（3）碘液 淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈 （4）乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差
2.（2018课标全国Ⅱ,37,15分）在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题:
（1）在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 （填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能 。
在照射前,适量喷洒 ,可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过 （填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。
答案
（1）可以
（2）在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 （3）破坏DNA结构 消毒液 （4）氯气 （5）未将锅内冷空气排尽
3.（2018课标全国Ⅲ,37,15分）回答下列与酵母菌有关的问题:
（1）分离培养酵母菌通常使用 （填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基,该培养基应采用 灭菌法灭菌。
若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是 。
（2）酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进 （填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”）;若进行厌氧培养,可促进 （填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是 。
答案
（1）麦芽汁琼脂 高压蒸汽 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
（2）菌体快速增殖 乙醇产生 （3）酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软
4.（2017课标全国Ⅰ,37,15分）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。
回答下列问题:
（1）有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 。
但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 （答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 （填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源,不选择其他两组的原因是
。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有
（答出两点即可）。
答案
（1）脲酶 分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物 为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料
（2）尿素 其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用
（3）为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
5.（2016课标全国Ⅲ,39,15分,0.24）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。
分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。
回答下列问题:
（1）分离纯化乳酸菌时,首先需要用 对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是
。
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有 和 。
分离纯化时应挑选出 的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的 （填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
答案
（1）无菌水（2分） 泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落（3分）
（2）鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸（或酸）（每空3分,共6分） 具有透明圈（2分）
（3）甘油（2分）
6.（2015课标全国Ⅰ,39,15分,0.6127）已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。
脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。
回答有关问题:
（1）显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用 染色。
微生物A产生的油脂不易挥发,可选用
（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用 直接计数;若要测定其活菌数量,可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中, ℃条件下该酶活力最小。
为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕 ℃设计后续实验。
答案
（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法（每空2分,共4分）
（2）油脂（3分）
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板（每空2分,共4分）
（4）45 40（每空2分,共4分）
7.（2014课标全国Ⅰ,39,15分,0.5106）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。
回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将
分解成 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时,CR可与纤维素形成 色复合物。
用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）:
酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR溶液
水
培养基甲
+
+
+
+
-
+
+
培养基乙
+
+
+
-
+
+
+
注:
“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。
答案
（1）纤维二糖 葡萄糖
（2）红 透明圈 （3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素,不会形成CR—纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
8.（2014课标全国Ⅱ,39,15分,0.5527）为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。
回答下列问题:
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。
在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;
然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。
据此可得出每升水样中的活菌数为 。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。
操作时,接种环通过 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。
这样做的目的是 。
（3）示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。
结果发现:
振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
分析其原因是:
振荡培养能提高培养液中 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率。
答案 （15分）
（1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107（每空2分,共4分）
（2）灼烧（2分） 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（3分）
（3）B（2分）
（4）溶解氧 营养物质（每空2分,共4分）
教师用书专用（9—11）
9.（2013课标全国Ⅱ,39,15分,0.5633）临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。
实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
（1）为了从样本中获取致病菌单菌落,可用 法或 法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释,用 法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A ;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B ;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明 ;
含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的 。
（4）根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素 。
答案 （15分）
（1）划线 稀释涂布（或涂布）（每空2分,共4分）
（2）涂布（1分）
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐药菌（每空2分,共8分）
（4）A（2分）
10.（2011课标,39,15分）有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。
某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。
回答问题:
（1）在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上。
从功能上讲,该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。
无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
答案
（1）原油 选择
（2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
11.（2009全国Ⅱ,33,10分）利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。
但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。
（1）实验步骤:
①配制 （固体、半固体、液体）培养基,该培养基的碳源应为 。
②将 接入已灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外照射,其目的是 。
④菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小,周围出现 现象的菌落即为初选菌落。
经分离、纯化后即可达到实验目的。
（2）若已得到二株变异菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉转化率较高。
经测定菌株Ⅰ淀粉酶的催化活性高,菌株Ⅱ的淀粉酶蛋白含量高。
经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株Ⅰ的突变发生在 区,菌株Ⅱ的突变发生在 区。
答案
（1）①固体 玉米淀粉 ②野生菌株 ③对野生菌株进行诱变 ④浅色范围大
（2）编码 非编码
B组 自主命题·省（区、市）卷题组
1.（2018江苏单科,31,8分）酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。
有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。
研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。
下图所示为操作流程,请回答下列问题:
（1）配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的 ,及时对培养基进行分装,并进行 灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约 （在25℃、50℃或80℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。
（3）挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。
下列叙述合理的有 。
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和 供应。
为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上 色细胞的个数应不少于 ,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。
答案 （8分）
（1）pH 高压蒸汽（湿热）
（2）50℃ （3）a、b、d
（4）氧气 无 30
2.（2017江苏单科,31,7分）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。
小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。
请回答下列问题:
（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有 。
（2）将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ,以达到富集酚降解菌的目的。
若如图平板中菌落过于密集,应进一步 ,以便于菌落计数与分离。
制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 。
（3）如图为连续划线法示意图,在图中 （填图中序号）区域更易获得单菌落。
（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。
先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为 。
管号
1
2
3
4
5
6
苯酚浓度（mg/L）
1
如果废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释 （填序号:
①5 ②10 ③20）倍后,再进行比色。
答案 （7分）
（1）蛋白胨、苯酚
（2）增加 稀释涂布 凝固剂 （3）③ （4）0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③
【三年模拟】
非选择题（共90分）
1.（2019届湖南长郡中学第二次月考,35）日前微博传言手机细菌比马桶多。
如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。
回答下列相关问题。
（15分）
（1）该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、氮源、 ,培养基一般放入 中进行灭菌。
（2）据图,两电视台均采用 法接种,该方法需要 。
（多选）
A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E.无菌水
（3）通过观察菌落的 ,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是 。
（4）按图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10mL菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为 个/平方厘米。
该实验对照组该如何设置?
。
答案
（1）无机盐（1分,“琼脂”不
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