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细胞工程

细胞工程复习题

一、名词解释

1.细胞工程：

以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。

2.外植体：

指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料

3.植物组织培养：

将植物的器官、组织或细胞，在无菌条件下接种于人工配置的培养基上，使其细胞分裂、增值、分化、发育，甚至形成完整植株的方法。

4.愈伤组织：

在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。

5．离体无性繁殖:

简称离体繁殖，是指利用组织培养方法进行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。

6．继代培养：

更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。

7.体细胞杂交：

（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。

8细胞分化：

即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变，或发育方式改变的过程。

9细胞脱分化：

培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。

10细胞再分化：

即脱分化后的分生细胞在特定的条件下，重新恢复细胞分化能力，并经历器官发生形成单极性的芽或根，或经历胚胎发生形成双极性的胚状体，进一步发育成完整植物体，这一过程成为细胞再分化。

11人工种子：

指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。

12植物细胞全能性：

指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育完整植株的潜在能力。

13胚状体：

在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。

14单倍体植物：

单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体（植物个体）。

具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养，使其单性发育成植物体。

这种具有单套染色体的植物称为单倍体植物。

15离体受精：

（离体授粉）在无菌条件下培养未受精脂肪或胚珠和花粉，使花粉萌发进入胚珠，完成受精作用。

16悬浮培养：

是将植物游离细胞或细小的细胞团，在液体培养基中进行培养的方法。

17看护培养：

是用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂和增值的方法。

18突变体筛选：

19原生质体：

指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。

20传代：

将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养

21细胞分裂指数

22克隆化：

一个克隆的细胞群体是从一个单一母细胞繁殖而来。

分离单一细胞并使其繁殖为一细胞群体的方法

23原代培养：

也称初代培养期。

从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，一般持续1-4周。

24有限细胞系：

经继代培养后细胞系即使培养条件均能满足细胞繁殖生长，它们也只能在有限的时间内生存，经过运动世代后细胞将逐渐死亡。

25永久细胞系:

大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖，当超过有限世代后，在体外永久存活下来发育成永久细胞系或称连续细胞系

26细胞系：

经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞

27细胞株：

将所得到的纯净细胞群，以一定的密度接种在lmm厚的薄层固体培养基上，进行平板培养，使之形成细胞团，尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞，这种细胞团称为“细胞株”。

29克隆：

指通过无性繁殖的手段，从一个动物细胞获得遗传背景相同的细胞群或个体群的过程。

获得的细胞叫克隆细胞，个体群称为克隆动物。

30胞质体：

是除去细胞核后由膜包裹的无核细胞。

植物去核原生质体又称微质体或亚原生质体。

31细胞重组又叫细胞拆合是指从活细胞中分离出细胞器及其组分，后在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。

32接触抑制：

当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞就停止增殖，即细胞密度不再增加

33胚胎工程：

在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上，通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程，又称发育工程。

34干细胞：

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，它可以化成多种功能细胞

35核质体：

核质体（nuclearbody或nuclearmaterial）核质体是原核生物所特有的无核膜结构的原始细胞核，又称核区、拟核或核基因组等

36胚胎干细胞：

胚胎干细胞是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离出来的多潜能细胞。

二、问答题

1、 植物细胞工程实验室的组成和基本要求有哪些？

基本操作室（洗涤区、灭菌区、贮藏区、培养基配制区）、无菌操作室（缓冲准备室、接种室）、培养室、鉴定分析室、温室

便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察

2、 植物组培中有哪些灭菌方法，其适用范围如何？

干热灭菌法：

各种玻璃器皿和器械

湿热灭菌法：

培养基、蒸馏水、各种器械、棉塞

熏蒸灭菌：

接种室和培养室

过滤灭菌：

液体培养基

药剂灭菌：

培养材料

烧灼灭菌：

接种器械、瓶口、棉塞

射线灭菌：

接种室空气和台面、花粉灭菌

抗生素抑菌

3、 植物细胞和组织培养方法有哪几种？

固体培养、液体培养【摇瓶悬浮培养（小规模）、成批培养、半连续培养（大规模反应器）、连续培养】

4、 单细胞培养包括哪几种培养方法？

a.液体浅层培养b.微室培养c.平板培养d.看护培养

5、 在离体培养中，胚状体发生有哪几种方式？

1、体细胞胚从外植体上直接发生

2、经过愈伤组织的体细胞胚发生

3、细胞悬浮培养的体细胞胚胎发生

6、 影响植物细胞脱分化和再分化的因子有哪些？

（1）培养基组成对植物细胞脱分化和再分化的影响

1）培养基的营养组成2）培养基的渗透压3）培养基的酸碱度4）激素在细胞分化中的调控作用

（2）环境条件与植物细胞的脱分化和再分化：

湿度条件、温度条件、光照条件

（3）光周期对植物细胞脱分化和再分化的效应

光周期的需要与否，应根据植物种类、培养目的来决定。

7、 离体无性繁殖中有哪几种器官发生方式？

1、不定芽型，2、器官型，3、器官发生型，4、类胚体发生型，5、原球茎型

8、 简述离体无性繁殖步骤。

1、无菌母株制备（制备方法：

田间取材（嫩枝）----自来水冲洗-----消毒剂表面灭菌---无菌条件下切割成带1-2个芽的茎段--接种------诱导不定芽----产生丛芽。

）

2、不定芽增殖（无菌母株——无菌条件——再次切割——继代培养——繁殖，使之在每个芽眼处形成丛芽——反复多次切割培养获得大量不定芽）

3、不定根的诱导，完整植株的形成（将继代增殖的幼嫩小植株——转移至生根培养基中诱导根的分化和根系的形成——完整小植株）

4、再生植株的锻炼和移栽（出管前一周打开瓶——洗净培养基——移栽——大田移栽。

）

5、再生植株的鉴定（细胞学鉴定：

形态鉴定）

9、 简述药用植物组织培养常见问题和对策。

1、污染及控制

（1）材料带菌与控制控制方法：

彻底灭菌

（2）接种污染与控制。

（3）培养过程感染与控制：

对培养空间定期进行消毒处理，及时清除污染材料，转移继代材料。

（4）培养基的污染与控制：

在培养基中加入抑菌剂

2、外植体褐化与控制

1）、与植物的种类与品种有关

控制的措施有：

（1）在外植体消毒灭菌前用流水冲洗一段时间，以清洗部分酚类化合物和底物；

（2）接种后在短时间内（1周内）多次转接到新鲜培养基上，直至褐化现象基本消失；

（3）先短期用液体培养基进行震荡培养，待褐化现象减轻后再转入固体培养基进行培养。

2）、与外植体的年龄有关

措施：

切取幼龄的茎尖、顶芽分生组织、带芽茎段等做外植体接种较

3）、与外植体的取样时间有关

在春季切取的生长旺盛部位的外植体褐化较轻，

4）、与培养基有关：

控制的措施：

利用吸附剂减低或清除酚类产物，改变氧化—还原势。

常用的还原剂有维生素c

5）、与培养方式有关

（1）调节外植体在培养基中的放置方式

（2）改变培养方法。

（3）缩短转瓶周期。

（4）调节光照。

3、试管苗的玻璃化与控制

常用的措施有：

（1）选择合适的外植体。

（2）琼脂的调节。

（3）碳源的调节。

（4）激素调节。

（5）湿度调节。

采（6）温度调节。

（7）光照调节.（8）改变供氮形式。

9）氯离子调节。

（10）尽量减少创伤乙烯产生。

（11）在培养基中可附加聚乙烯醇（PVA）、活性炭等，降低玻璃苗的产生。

4、变异：

（1）选择适宜的再生途径

（2）植物生长物质选择（3）离体培养和继代时间的调节

5、材料死亡6、黄化7、增殖率过低或过高8、组培苗瘦弱或徒长

10、植物组织培养所需培养基包括哪些成分？

植物组织培养培养基有哪些种类？

（一）无机营养成分大量元素微量元素

（二）有机营养成分1）糖类2）维生素3）氨基酸类和酰胺类

（三）生长调节物质

（四）附加成分

1、高无机盐含量的培养基2、较高硝酸钾含量培养基3、中等无机盐含量的培养基

4、低无机盐含量的培养基

11、简述植物激素的应用规律。

①先生长素处理，后细胞分裂素处理，有利于细胞分裂，但细胞不分化。

②先细胞分裂素处理，后生长素处理、细胞分裂也分化（可能是内源生长素起了作用）。

③生长素和细胞分裂素同时处理，分化频率提高。

两者同时存在的用量比值可以改变形态建成的方向。

生长素／细胞分裂素：

比值高：

有利根分化，抑制芽形成；比值低：

有利芽分化，抑制根形成；比值适中：

促进愈伤组织生长。

12、哪些因素会影响培养物的遗传变异？

培养基和培养方式继代培养的次数

13、体细胞无性系变异的诱导和选择方法。

1.自发突变2.诱变：

物理诱变、化学诱变、转座子插入诱变、复合因子诱变

直接选择法（正、负选择法）、间接选政法、绿岛法

14、试述离体无性繁殖的程序。

1、无菌母株制备2、不定芽增殖3、完整植株的形成4、再生植株的锻炼和移栽

5、再生植株的鉴定

15、离体无性繁殖中，小植株的驯化要掌握什么样的原则？

驯化中要掌握逐步过渡的原则，才能收到良好的效果。

移栽前首先要进行日光锻炼，通过“晒苗”措施恢复叶绿体光合作用功能。

使小苗由异养逐步过渡到自养。

第二步进行湿度锻炼，使小苗逐步适应周围环境的湿度。

16、当前脱除植物病毒的方法有哪些？

物理方法：

高温处理、低温处理

化学方法：

利用化学药品处理

生物方法：

茎尖培养脱毒法；微体嫁接离体培养脱毒法；珠心组织脱毒法；愈伤组织脱毒法。

17、如何检测再生植株的脱毒效果？

（l）直接测定法

（2）指示植物法（生物鉴定法、敏感植物鉴定法）（3）抗血清鉴定法（4）电子显微镜鉴定法（5）分子检测法

18、花粉孢子体的发育途径有哪几种？

A途径（营养细胞发育途径）：

花粉孢子体第一次有丝分裂，起源于花粉的营养细胞（营养核），营养细胞继续分裂形成胚状体或愈伤组织。

B途径（生殖细胞发育途径）：

生殖细胞持续分裂形成胚状体，而营养细胞可能不分裂或只分裂数次形成一个胚柄状的结构附着在由生殖细胞起源的胚的胚根一端。

C途径（营养细胞和生殖细胞共同发育途径）：

营养核和生殖核先发生核融合，然后再进行花粉孢子体的第一次有丝分裂，发育成花粉植株。

C途径的特点是生殖核和营养核共同参与花粉孢子体的形成，生殖核是有功能的。

19、花粉植株的形态发生方式有哪几种类型？

1）来自花粉诱导形成的胚状体；2）来自花粉的愈伤组织。

20、试述花粉单倍体植物的培养程序。

1）材料准备；2）诱导花粉脱分化形成愈伤组织或胚状体；3）愈伤组织的植株分化或胚状体的正常生长；4）完整植物体的形成；5）再生植株的驯化和移植。

21、花药培养中花药为什么要经过低温处理？

可以激发花粉母细胞产生两个相等核，而不是一个营养核一个生殖核；

保持高比例的强生活力花粉，同时延缓体细胞组织的衰老；

激发花粉产生原胚；促使细胞同步分裂。

22、花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度的激素？

高糖预处理效应：

接种前采用高糖预处理花药，一定时间后，再转移至适宜的糖浓度下培养，对诱导小孢子脱分化、再分化起促进作用，可大幅度地提高愈伤组织和胚状体的诱导率。

23、人工诱发单倍体发生方式有哪些？

①孤雄生殖②孤雌生殖

人工诱发单倍体以孤雄生殖为主，目前在育种中应用最广泛的也是这种类型的单倍体。

24、植物胚胎培养包含哪些内容？

1、胚培养（l）成熟胚培养

（2）幼胚培养

2、胚珠培养——指未受精或受精后的胚珠离体培养。

3、子房培养——指授粉和未授粉的子房培养

4、胚乳培养——指处于细胞期胚乳的离体培养

5、试管受精——指培养未受精的胚珠并在试管内撒播花粉，使其受精形成具有生活力的种子。

25、胚龄与胚性发育有着怎样的关系？

不同发育时期的幼胚，离体培养成功率差异很大。

一般胚龄越大成功率越高，相反胚龄越小成功率越低。

处于原胚期的幼胚即使采用胚珠预培养的方法，也仅有少数植物种能够成功，如烟草。

矮牵牛、朱顶红、棉花。

离体培养中幼胚培养的成功率主要取决于培养基的组成。

26、幼胚培养的关键技术是什么？

剥离技术

27、胚乳培养选择的最佳时期是何时？

细胞期

28、一个好的悬浮细胞系有哪些特征？

用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？

（l）能大量提供均匀的植物细胞，也就是同步分裂的细胞。

（2）细胞增殖速度快，适应于大规模工业化生产。

（3）需要特殊的设备，如大型摇床、转床、连续培养装置、倒置式显微镜等，成本较高。

1）疏松易碎的愈伤组织以幼胚为最佳

2）悬浮细胞培养基组成一般同愈伤组织培养基相似

29、影响单细胞培养的因素有哪些？

1、细胞的起始密度2、培养周期（在一个培养周期中，细胞数目、总重量（鲜重、干重）和DNA含量的变化，呈一个“S”型曲线）3、培养基（

（1）条件培养基

（2）生长调节剂（3）酸碱度）

30、悬浮培养比固体培养有哪些优点，影响悬浮细胞生长的因素有哪些？

一、增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应；二、在振荡条件下可避免细胞代谢产生的有害物质在局部积累而对细胞自身产生毒害；三、振荡培养可以适当改善气体的交换。

起始愈伤组织的质量；接种细胞密度；培养条件：

方式、温度；继代周期

31、简述植物细胞培养生产次级代谢产物的工艺过程。

愈伤组织

外植体

植物细胞细胞悬浮培养

原生质体培养

细胞扩大培养分离纯化产物

32、简述药用植物细胞大量培养步骤。

1）愈伤组织的诱导和悬浮细胞系的建立

2）筛选高产细胞系

3）在生物反应器中大量培养细胞或细胞团

33、简述悬浮培养细胞的同步化方法。

（1）分选法

（2）饥饿法（3）抑制剂法（4）低温处理

34、、建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？

？

？

35、、目前用做原生质体分离的材料有哪些？

幼嫩叶或无菌试管苗叶片、下胚轴和子叶、培养细胞（愈伤组织、细胞悬浮培养物）、花粉细胞。

一般认为由叶肉组织分离的原生质体，遗传性较为一致

36、原生质体的分离方法有哪些？

（l）机械分离法（缺点：

获得完整的原生质体的数量比较少，能够用此法产生原生质体的植物种类受到限制。

优点：

该方法可避免酶制剂对原生质体的破坏作用。

）

（2）酶解分离法（优点：

酶解法可以获得大量的原生质体，而且几乎所有植物或它们的器官、组织或细胞均可用酶解法获得原生质体。

缺点：

这些酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。

用酶法降解细胞壁，会影响所获原生质体的活力。

）

37、、原生质体纯化有哪些方法？

沉降法、漂浮法、不连续梯度法

38、原生质体的培养方法有哪些，各有何优缺点？

（1）固体培养法（平板培养法）（优点有利于对单个原生质体的胞壁再生和对细胞团形成的全过程进行定点观察。

）

（2）浅层液体培养法

（3）双层培养法（优点：

使培养基保持很好的湿度，不易干涸。

同时还可以定期注入新鲜培养基。

原生质体长壁速度和分裂速度很快。

）

39、影响原生质体培养的因素有哪些？

简述原生质体培养的程序。

（1）原生质体的活力

（2）原生质体起始密度（3）细胞壁再生速度（4）培养基营养（5）培养条件（6）供试材料的基因型和生理状态

原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。

40、试述植物细胞融合的程序。

1、植物原生质体分离（l）双亲原生质体制备

（2）采用酶法分离原生质体（3）影响原生质体活力的各种因素

2、原生质体纯化

（1）筛网过滤

（2）采用不连续梯度法纯化原生质体（3）质膜稳定剂和渗透压稳定剂

3、原生质体融合（l）盐融合法

（2）高钙和高pH值法（3）聚乙二醇法（4）聚乙二醇和高钙、高pH值结合法（5）电融合法

4、细胞杂种的选择

（1）互补选择法：

白化互补、遗传互补、营养互补

（2）可见标志选择法：

凹穴培养皿法、微吸管法

5、愈伤组织形成器官分化植株再生

（1）基本培养基筛选

（2）激素种类和浓度调节（3）渗透压调节

6、杂种植物鉴定

（1）与亲代形态特征比较

（2）杂种植物核型分析（3）同工酶谱分析

41、植物细胞杂种选择的方法有哪几种？

（l）互补选择法①白化互补选择法②遗传互补选择法③营养代谢互补选择法

（2）机械选择法（可见标记法）A．凹穴培养皿分离法B．微吸管分离法

42、细胞大规模培养有哪些培养系统？

成批培养、半连续培养、连续培养

43、悬浮细胞系在继代培养中其群体生长规律。

45、用于制备人工种子的繁殖体主要有哪些？

46、控制胚性细胞同步分裂的方法有哪些？

（l）抑制剂法——用DNA抑制剂处理细胞培养物

（2）低温法——低温处理调控胚状体的同步生长（3）渗透压法——利用渗透压调控胚状体的同步生长不同发育阶段的胚，具有不同的渗透压要求。

（4）分离过筛法（5）通气法——利用气体调控胚状体的同步发生

47、人工种子的应用前景如何？

需要解决那些问题?

随着研究的深入，限制其在商业应用中的问题将逐步得到解决，实现其诱人的应用前景，必将对作物遗传育种、良种繁育和栽培等起到巨大的推进作用。

1、贮藏问题人工种子含水量大，常温下易萌发，也易失水干燥。

2、体细胞无性系变异，

3、成本问题目前限制人工种子的商业利用的最大问题是成本，

4、繁殖体生产技术和人工种皮材料的研制

48、人工种子利用有何优点？

离体繁殖所具备的优势，可贮藏、因而可周年生产；可直接播种，减少了试管苗移栽在操作和管理上的困难，可机械化操作和常规的田间管理；可长距离运输，因此可建立相对集中的大型生产企业，实现资源和技术优化。

49、什么是动物细胞、组织培养技术？

50、动物细胞工程技术有哪些？

那种技术是动物细胞工程的基础？

51、动物细胞培养基成分有哪些？

（1）氨基酸类

（2）维生素类

（3）大量元素----是调节培养液渗透压的主要成分。

（4）微量元素-----由血清提供的，在低血清或无血清培养液中，则需添加铁、铜、锌、硒等微量元素。

（5）葡萄糖----能量来源之一，也是某些氨基酸合成的原料。

（6）有机类（7）激素类----血清中含有许多激素。

（8）生长因子类

52、动物细胞培养基有哪几种？

无血清培养基成分有哪些？

平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液（由基础培养液和附加成分组成。

取代血清的补充物：

1）激素和生长因子；2）结合蛋白类；3）低分子量营养因子；4）贴壁和铺展因子等。

）

53、动物细胞冻存和复苏的原则是什么？

慢冻快融

54、动物细胞体外培养的形态特征是怎样的？

55、动物细胞、组织培养的方法主要有哪些？

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。

组织块培养法：

1）将上述剪好的小块放入15ml离心管中用10ml的Hanks洗液强有力的反复吹打，1000转离心1分钟，弃去上清，重复一次。

2）用习惯将组织块放入25cm2培养瓶中，竖起培养瓶，加入1-2ml培养液，培养箱中将培养瓶底朝上，放置2-4小时，小心将培养瓶方正，继续培养。

3）培养3-4小时后缓慢取出培养瓶，加5ml培养液，继续培养。

4）三天后小心取出观察，搜集漂浮组织块，置入离心管中，400转离心3分钟，弃去三分之二上清，补加5ml培养液，移入25cm2培养瓶中继续培养。

消化培养法：

1）将上述剪好的小块放入15ml离心管中，加入5-10ml的IV胶原酶消化液，放入37℃水浴中不断震荡，联系观察一小时，直至组织块弥散开为止，每隔30分钟收集消化液。

2）400转离心4分钟，收集细胞沉淀，用Hanks洗液冲洗，并重复一次。

3）将收集的细胞沉淀，用培养液重悬，置于4°冰箱，直至消化全部结束。

4）将细胞悬液通过250目不锈钢钢筛，将滤液置于25cm2培养瓶中，放入培养箱培养

植物组织培养一般分为以下几种：

1、胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。

2、器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。

3、组织培养指以分离出植物各部位的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。

这是狭义的植物组织培养。

4、细胞培养指以单个游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞）为接种体的离体无菌培养。

5、原生质体培养。

指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养

56、简述动物原代和传代培养方法

传代：

细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。

1.悬浮生长细胞传代

v离心法传代：

离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

v直接传代法：

悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/2一2/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

2半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）

v此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。

3贴壁生长细胞传代

v采用酶消化法传代。

常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

原代培养取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。

原代培养 

从动物机体取出的进行培养的细胞群。

生长缓慢，繁殖一定的代数后（一般10代以内）停止生长。

57、对体外培养细胞进行常规检查主要有那几方面内容？

细胞健康状况、培养液pH、微生物污染、细胞交叉污染、化学物质污染

58、动物细胞大规模培养的方法主要有哪些？

1．悬浮培养2．微载体培养3．包埋和微囊培养4、中空纤维法

59、怎样利用原生质体融合与培养技术制造新物种？

60、动物细胞培养过程中细胞生长要经过哪几个阶段？

原代培养期、传代期、衰退期

61、动物细胞培养过程中细胞一代生长要经过哪几个阶段？

潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期

62、任选一培养技术叙述从外植体到再生植株的完整实验过程。

63、根据其发育阶段，干细胞可以分为哪几种类型，根据其分化潜能的大小，又可分为哪几种类型？

胚胎干细胞、成体干细胞①全能干细胞②多能干细胞③定向干细胞

64、人工诱发动物细胞融合方法有哪些？

动物杂交细胞的分离方法有哪些？

1、生物诱导细胞融合2、化学方法诱导细胞融合3、物理方法诱导细胞融合4、激光诱导