第一章蛋白质习题.docx
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第一章蛋白质习题
蛋白质习题
一、就是非题
1.所有蛋白质分子中N元素得含量都就是16％。
2.蛋白质就是由20种L-型氨基酸组成,因此所有蛋白质得分子量都一样。
3.蛋白质构象得改变就是由于分子内共价键得断裂所致。
4.氨基酸就是生物体内唯一含有氮元素得物质。
5.组成蛋白质得20种氨基酸分子中都含有不对称得α-碳原子。
6.酸与酶水解蛋白质得到得氨基酸不产生消旋作用。
7.用层析技术分离氨基酸就是根据各种氨基酸得极性不同。
8.用凝胶电泳技术分离蛋白质就是根据各种蛋白质得分子大小与电荷不同。
9.从细胞内提取出某种物质,凡就是用羧肽酶A水解不产生游离氨基酸得,可肯定地判断它就是非肽物质。
10.蛋白质构象得变化伴随自由能得变化,最稳定得构象自由能最低。
11.刚性平面结构得肽单位就是蛋白质主链骨架得重复单位。
12.蛋白质分子得亚基就就是蛋白质得结构域。
13.同一种氨基酸得对映体旋光度相等但方向相反。
14.烷基化与烃基化都就是与氨基酸得氨基发生得反应。
15.在酸性条件下茚三酮与20种氨基酸部能生成紫色物质。
16.蛋白质变性就是其构象发生变化得结果。
17.脯氨酸不能维持α-螺旋,凡有脯氨酸得部位肽链都发生弯转。
18.从原子组成上可以把肽键瞧作就是一种酰胺键.但两者并不完全相同。
肽键得实际结构就是一个共振杂化体,6个原子位于同一个面上。
19.甘氨酸与D-甘油醛得构型相同。
20.氨基酸自动分析仪可以鉴定除色氨酸以外得所有氨基酸。
2I.蛋日质得空间结构在很大程度上就是由该蛋白质得一级结构决定得。
22.胶原蛋白在水中煮沸转变为明胶,就是各种氨基酸得水溶液。
23.蛋白质与酶原得激活过程说明蛋白顺得一级结构变化与蛋白质得功能无关。
24.肌红蛋白与血红蛋白得α与β链有共同得三级结构。
25.利用盐浓度得不同可以提高或降低蛋白质得溶解度。
26.有机溶剂引起蛋白质变性得主要原因之一就是降低介质得介电常数。
27.免疫球蛋白就是一类血浆糖蛋白。
28.蛋白质得磷酸化与去磷酸化作用就是由同一种酶催化得可逆反应。
29.血红蛋白比肌红蛋白携氧能力高.这就是因为它有多个亚基。
30.跨膜蛋白在膜脂区得肽段常形成α-螺旋。
二、填空题
1.20种氨基酸中就是亚氨基酸.它可改变α-螺旋方向。
2.20种氨基酸中除外都有旋光性。
3.20种氨基酸中与分子量比较小而且不含硫,在折叠得多肽链中能形成氢键。
4.20种氨基酸中具有非极性侧链且就是生成酪氨酸得前体。
5.20种氨基酸中得一个环氮上得孤对电子,像甲硫氨酸一样,使之在血红蛋白分子中与铁离子结合成为配位体。
6.20种氨基酸中、与在稳定许多蛋白质结构中起重要作用,因为它可参与形成链内与链间得共价键。
7.20种氨基酸中、与得β-碳原子与两个以上得某团相连,它们可使α-螺旋得结构变得不稳定。
8.在正常生理条件下（pH=7）,蛋白质分子中与得侧链完全带正电荷,得侧链部分带正电荷。
9.一氨基一波基氨基酸得等电点pI=。
10.2,4-二硝基氟苯（DNFB或FDNB）与氨基酸作用可生成黄色得,简称。
11.用对多肽进行链内断裂比用、与得到得肽片段少。
12.球蛋白分子外部主要就是基团.分子内部主要就是基团。
13.溴化氰（BrCN）能使Gly-Arg-Met-Ala-Pro裂解为与两个肽段。
14.在糖蛋白分子中.糖基或寡糖基可与蛋白质得与残基侧链以O一型糖苷键相连,或与残基侧链以N一型糖苷键相连。
15.1953年英国科学家等人首次完成牛胰岛素得测定,证明牛胰岛素由条肽链共个氨基酸组成。
16.生活在西藏高原得人血液中,2,3一二磷酸甘油酸得浓度比一般人。
17.测定蛋白质浓度得方法有、、与,其中不需要标准样品。
18.氨基酸混合物纸层析图谱最常用得显色方法有与两种。
其中最灵敏,可显出不同得颜色。
19.用紫外光吸收法测定蛋白质含量得依据就是所有得蛋白质分子中都含有、、与三种氨基酸。
20.测定肽段常用得方法就是Edman化学降解法。
Edman试剂就是。
21.多肽人工合成有相与相两种方法。
从原理上讲多肽合成大体可分为
（1）,
（2）,（3）三个步骤。
22.1965年中国科学家完成了由53个氨基酸残基组成得得人工合成。
23.研究蛋白质构象得方法很多,但主要就是应用。
24.目前已知得超二级结构有、与三种基本形式。
25.胶原蛋白得基本组成单位就是由组成得原胶原蛋白,再经多次聚合形成。
26.维持蛋白质三级结构得作用力就是,,与盐键。
27.变性剂尿素与胍可以破坏蛋白质得二级结构,它们能与多肽主链,增加在水中得溶解度。
28.去污剂如十二烷基磺酸钠（SDS）使蛋白质变性就是由于SDS能破坏使疏水基团暴露到介质中。
29.在pH6、0时将Gly,Ala,Glu,Lys,Arg与Ser得混合物进行纸电泳向阳极移动最快得就是;向阴极移动最快得就是与;移动很慢接近原点得就是。
30.在含有正丁醇、水与乙酸得溶剂系统中,利用纸层析技术分离迁移率从高到低得顺
序应该就是。
三、选择题
1.在pH6～7之间质子化程度改变最大得氨基酸就是:
A、甘氨酸B、谷氨酸C、组氨酸D、苯丙氨酸
2.下列哪种氨基酸可与坂口（Sakaguchi）试剂发生反应。
A、赖氨酸B、精氨酸C、亮氨酸D、异亮氨酸
3.下列哪种氨基酸可与米伦（Millon试剂）发生反应:
A、胱氨酸B、天冬氨酸C、酪氨酸D、丙氨酸
4.下列哪种氨基酸可发生乙醛酸反应?
A、色氨酸B、缬氨酸C、苏氨酸D、丝氨酸
5.含78个氨基酸残基形成得α-螺旋长度应为:
A、3、6nmB、5、4nmC、11、7nmD、78nm
6.α-螺旋表示得通式就是:
A、3、010B、3、613C、2、27D、4、616
7.弹性蛋白分子中发现两个重复序列,它们就是:
A、Lys－Ala－Ala－Lys与Lys－Ala－Ala
B、Glu－Asp－Asp－Glu与Asp－Glu－Glu
C、Cys－Met－Met－Cys与Met－Cys－Cys
D、Thr－Ser－Ser－Thr与Ser－Thr－Thr
8.下列哪种物质装成得柱就是阳离于交换柱。
A、DEAE-cellulose（二乙基胺乙基一纤维素）
B、QAE-sephadex（季胺乙基一葡聚糖）
C、CM-cellulose（羧甲基一纤维素）
D、PAB-cellulose（对氨基苯甲基一纤维素）
9.血液凝固得过程就是凝血酶原与血纤维素原
A、变性得过程B、激活得过程C、变构得过程D、重新组合得过程
10.在效应物作用下,蛋白质产生得变构（或别构）效应就是由于蛋白质得
A、一级结构发生变化
B、构型发生变化
C、构象发生变化
D、氨基酸序列发生变化
11.下列具有协同应得蛋白质就是:
A、肌红蛋白B、血红蛋白C、丝心蛋白D、弹性蛋白
12.同源蛋白就是指:
A、来源相同得各种蛋白质
B、来源不同得同一种蛋白质
C、来源w同得同一种蛋白质
D、来源不同得各种蛋白质
13.下列得蛋白质分于量测定方法中,对蛋白质纯度要求较高得方法就是:
A、根据化学组成测定最低分子量
B、利用渗透压测定计算分子量
C、沉降平衡法
D、SDS聚丙烯酸胺凝胶电泳法
11.胶原蛋白中含量最多得氨基酸就是;
A、甘氨酸与丙氨酸
B、脯氨酸与羟脯氨酸
C、谷氨酸与天冬氨酸
D、精氨酸与赖氨酸
12.蛋白质空间结构稳定机制中,包括下列哪种氨基酸与赖氨酸残基得相互作用？
A、GluB、ArgC、HisD、Asp
四、问答与计算
1．组成蛋白质得20种氨基酸中,哪些就是极性得7哪些就是非极性得？
哪一种不能参与形成真正得肽键？
为什么？
2．什么就是蛋白质得等电点（pl）？
为什么说在等电点时蛋白质得溶解度最低？
3．蛋白质分子中哪些氨基酸可以与金属紧密地结合？
请举例说明。
4．将固体氨基酸溶解于pH7得水中所得得氨基酸溶液.内得pH大于7,有得小于7,这种现象说明什么;
5．什么就是肽单位.它向哪些基本特征？
6．写出用胰蛋白酶处理下列各肽段得到得水解产物。
用2,4-二硝基氟苯与胰蛋白酶水解物作用.可产生哪些DNP氨基酸？
（1）Lys－Asp－Gly一Ala－Ala－Glu－Gly
（2）Ala－Ala－His一Arg－Glu－Lys－Phe－Ile
（3）Tyr－Cys－Lys－Ala－Arg－GIy
（4）Phe－Ala－Glu－Ser－Ala－Gly
7．某肽经酸水解得到5种氨基酸,该肽得N一末端容易环化;溴化氰作用后得到一游离碱性氨基酸,Pauly反应呈阳性:
用胰蛋白酶处理得到两个肽段.其一与坂口试剂呈阳性反应,另一个在280nm有光吸收峰,呈Millon阳性反应.求此肽得氨基酸排列顺序,并推断它得等电点大于、等于还就是小于7。
8．根据下信息推断含等量Met,Phe,Asp,Ser,Thr得五肽序列:
（1）用BrCN处理五肽,释放出肽段与一个游离得高丝氨酸;
（2）用胶凝乳蛋白酶处理五肽得到两个碎片,酸性较强得碎片含甲硫氨酸;
（3）用羧肽酶A处理五肽,迅速放出Ser。
随后放出Thr。
9．用画图法比较肌红蛋白与血红蛋白氧合曲线得差异,并说明为什么？
10．酸水解1毫摩尔某五肽,得到2毫摩尔Gin,1毫摩尔Lys;用胰蛋白酶处理得到两个肽段.电泳时一个向阳极移动,另一个向阴极移动.两者之一用DNFB（2,4－二硝基氟苯）处理后.再用酸水解产生D？
VP－（｝1。
用腹凝乳蛋白酶水解五肽产生两个二肽与游离GIU,写出五肽得氨基酸排列顺序。
11．2、3一二磷酸甘油酸（DPG）与血红蛋白对氧得亲与力有什么影响？
12．假如某种蛋白质分子中含有10个羧基,平均pKa’值为3、5;2个咪唑基,平均pKa’值为6、0;14个氨基,平均pKa’值为10、0。
从pH1开始用NaOH滴定,请问当达到等电点时,有多少H+被滴定？
画出滴定曲线并标出等电点得位置。
13．指出用电泳技术分离下列物质,pH就是多少时最合适,
（1）血清清蛋白（pI=4、9）与血红蛋白（pI=6、8）;
（2）肌红蛋白（PI=7、0）与胰凝乳蛋白梅（pI=9、5）;
（3）卵清蛋白（PI=4、6）、血清清蛋白与脲酶（pI=5、0）。
14．在分离范围为5000～400000得凝胶过滤柱上分离蛋白质,指出肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素C、胰凝乳蛋白酶与血清蛋白被洗脱下来得先后顺序。
15．有一个蛋白分子在pH7得水溶液中可以折叠成球状,通常就是带极性侧链得氨基酸位于分于内部,带非极性侧链得氨基酸位于分子外部。
请回答:
（1）在Va1,Pro,Phe,Asp,Lys,Ile与His中,哪些位于分子内部哪些位于分子外部;
（2）为什么在球蛋白内部与外部都能发现Gly与Ala？
（3）Ser,Thr,Asn与Gln都就是极性氨基酸,为什么会在分子内部发现？
（4）在球蛋白得分子内部与外部都能找到Cys,为什么？
16．蛋白质得分离纯化技术中凝胶过滤与超过滤中无共同之处？
它们各自根据什么原理？
17．举例井简要说明亲与层析分离、纯化蛋白质得原理与主要步骤。
18．举例说明利用盐祈法分离蛋白质得原理与方法。
19．由122个氨基酸组成得多肽链形成α-螺旋后得长度就是多少？
分子量又就是多少？
20．解释下列名词:
（1）构型与构象;
（2）活性肽;（3）ψ角与φ角;（4）超二级结构;（5）蛋白质变性与复性;（6）抗原与抗体;（7）透析与超滤;（8）盐溶与盐析。
答案
一、就是非题
1对。
2错。
3错。
4错。
5错。
6对。
7对。
8对。
9错。
10对。
11对。
12错。
13对。
14对。
15错。
16对。
17对。
18对。
19错。
20错、21对。
22错。
23错。
24对。
25对。
26对。
27对。
28错。
29对。
30对。
二、填空题
1、Pro;2、Gly;3.Thr,Ser;4、Phe;5、His;6、Cys
7.Val,Ile,Thr;8、Arg,Lys;9、1/2（pK1′+pK2′）
10.二硝基苯基氨基酸DNP
11.CNBr（溴化氰）胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶胃蛋白酶
12.亲水疏水13.Gly－Arg－MetAla－Pro;14.ThrSerLys
15.Sanger一级结构两5116.高
17.凯氏微量定氮法紫外吸收法福林（Folin）-酚法双缩脲法凯氏微量定道法
18.茚三酮吲哚醌茚三酮吲哚醌19.PheTyrTrp。
20.苯异氰酸酯。
21.液固保护氨基或竣基缩合反应去保护剂。
22.牛胰岛素。
23.X一射线衍射法
24.（αα）（βββ）（βαβ）25.原胶原蛋白分子胶原纤维26.氢键疏水作用范德华力
27.竞争氢键非极性侧链
28.蛋白质分子内在疏水作用力
29.GluLysArgGlyAlaSer
30.Ile→Ala→Ser→Giu
三、选择题
题号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
答案
C
B
C
A
C
B
A
C
B
C
B
B
C
B
D
四、问答与计算
1.在组成蛋白质得20种氨基酸中,根据氨基酸侧链基团得极性可分为三种:
（1）带有非极性侧链基团得氨基酸:
Ala,Val,Leu,11。
Th。
trp.Met与Pro。
（2）带有极性但不解离侧链基团得氨基酸:
Thr,Ser,Tyr,Asn,Gln,Cys与Gly。
这些氨基酸得OH、CO一NH2与一SH,在pH7得生理条件下不能解离但显示极性。
Gly得H+因受α一碳原子得影响,显示极弱得极性。
（3）带有解离侧链基团得氨基酸:
在pH7得生理条件下解离,带正电荷得有Arg,Lys与HiS;带负电荷得有:
Asp与Glu。
在组成蛋白质得20种氨基酸中,Pro不能参与形成真正得肽键,因为Pro就是亚氨基酸,没有游离得氨基。
2.蛋白质分子所带净电荷为零时,溶液得pH值为该蛋白质得等电点。
处于等电点状态得蛋白质分子外层得水化层被破坏,分子之间相互聚集形成较大得颗粒而沉淀下来。
3.在蛋白质分子中带电荷得氨基酸侧链部可以与金属离子以离子键得方式结合。
例如血红蛋白分子中血红素带有得铁离子,凌肽酶A分子中得锌离子以及其它蛋白质分子中得铜、镁离子。
体内常见得与金属离子结合得氨基酸His、Glu与Cys等。
4.氨基酸溶于纯水中溶液得pH大于或小于7,这正好说明了氨基酸具有兼性离子得性质。
氨基酸得共同特点就是既带有氨基也有羧基。
还带出可解离与不可解离得侧链基团,当固体得氨基酸溶于纯水中时,pK值小于7得基团解离释放出质子使溶液变为酸性,pK′值大于7得基团接受质子使溶液变为碱性.在组成蛋白质得20种氨基酸中.一氨基一羧基得氨基酸溶于水后溶液基本为中性,一氨基二羧基得氨基酸溶于水后溶液pH小于7为酸性,二氨基一羧基得氨基酸,如Lsy。
或带有胍基得精氨酸,带有咪唑基得组氨酸溶于水后溶液pH大于7为碱性。
5.蛋白质分子中主链骨架得重复单位称为肽单位,组成肽单位得6个原子,一（Cn一
CO—NH—Cn+1一）位于一个平面上所以也称其为肽平面。
如下所示。
C1α一CO—NH——C2α一
肽单位得基本结构就是固定得,并且有以下特征:
（1）肽键中得C一N键（键长0、1325nm）;比正常得C一N单键（键长0、147nm）短,比C=N键（键长0、127nm）长.因此具有部分双键得性质不能自由旋转。
（2）肽单位就是一个刚性平面结构,所以也可以说多肽链就是由许多刚性平面连接起来得,
平面之间就是α一碳原子、由ψ角与φ角决定了得构象不能轻易改变。
（3）在肽平面上C=O与N一N,或者C1α－C与N一C2α可以就是顺式也可以就是反式,在多肽链中得肽单位通常就是反式。
（4）除Pro外都就是反式,反式构型比顺式构型能量低因此比较稳定。
Pro不含游离得氨
基,不能形成真正得肽鲢,由Pro参与形成得肽键可以就是顺式也可以就是反式。
6.（l）Lys,Asp－Gly－Ala－Ala－Glu－Ser－Gly。
DNP－Lys与DNP－Asp。
（2）Ala－Ala－His－Arg,Glu－Lys,Phe－Ile。
DNP－Ala,DNP－Glu与DNP－Phe。
（3）Tyr－Cys－Lys,Ala－Arg,Gly。
DNP－Tyr,DNP－Ala与DNP－Gly。
（4）该肽中不含Arg与Lys。
所以不能被胰蛋白酶水解。
7.该肽得氨基酸顺序就是:
Gln－Arg－Tyr－Met－His。
N一末端容易环化说明N一末端为Gln。
胰蛋白酶水解得到两个片段,一个为坂口试剂阳性,说明含有Arg,一个有强烈地紫外吸收,且呈Millon阳性,说明含有Tyr,两个肽段之间由一Arg－Tyr一相连。
溴化氰处理后得到一游离碱性氨基酸,Panly阳性,可确定为His。
顺序为Met－His。
所以该肽得氨基酸顺序就是:
Gln－Arg－Tyr－Met－His。
在PH—7时,Gln－Arg－Tyr－Met－His中:
Gln得NH3+、Arg得胍基+,His得咪唑基不带电荷、COO-净电荷为正.所以该肽得等电点应大于7。
8.Met－Asp－Phe－Thr－Ser。
用BrCN处理得到一个游离得高丝氨酸说明N一末端就是Met。
胰凝乳蛋白酶水解得到两个片段,酸性强得含有甲硫氨酸表明:
Met－Asp－Phe;羧肽酶A作用结果说明C端就是一Thr－Ser。
所以该五肽得顺序就是:
Met－AsP－Phe－Thr－Ser。
9.血红蛋白就是一种寡聚蛋白由四个（ααββ）亚基组成,肌红蛋白只由一条多肽链组成;血红蛋白得α与β链与肌红蛋白具有相同得三级结构,在与氧得结合过程中肌红蛋白呈饱与曲线,但就是由于血红蛋白具有协同效应,所以呈S型曲线。
10.五肽得氨基酸顺序就是:
Gln－Trp－Lys－Trp－Glu酸水解五肽只得到三种氨基酸,说明两种氨基酸被酸解破坏,可能就是Gln与Trp。
胰蛋白酶水解后得到得两个片段,说明Lys不就是末端氨基酸。
一个肽段带正电荷,与DNFB作用再用酸水解生成DNP-Glu,说明N-末端就是Gln,且含有Arg;一个带负电荷可能含有Glu与中性氨基酸Trp,胰凝乳蛋白酶水解产生游离得Glu,表明C-末端就是Glu并且就是Trp-Glu,因此判断五肽得氨基酸顺序就是Gln-Trp-Lys-Trp-Glu。
11.血红蛋白就是一种寡聚蛋白,由四个（ααββ）亚基组成,在两个亚基之间夹着一个带
有三个负电荷基团得DPG（2,3一二磷酸甘油酸）分子,与每个β亚基得三个正电荷基团（1位Val得α一氨基,82位Lys得ε一氨基,43位His得咪唑基）互相吸引形成六个盐桥,这些盐桥在很大程度上束缚了血红蛋白得构象,导致它对氧得亲与力下降,远远低于无DPG存在时血红蛋白与氧得结合能力。
换句话说,DPG使脱氧血红蛋白分子得四级结构进一步稳定,对氧得亲与力降低。
在氧丰富得肺脏DPG浓度低,血红蛋白对氧得亲与力高,能最大限度地与氧结合,到了肌肉、脑及其它组织糖代谢旺盛,DPG丰富,插人到血红蛋白得分子中,导致血红蛋白与氧得亲与力降低,释放出氧。
长期生活在高山缺氧地区得人群,血液中DPG得含量明显高于在平原与沿海地区生活得人群。
12.该蛋白质分子中总共可解离出（10＋2＋14）=26个质子（H+）,当溶液得pH值达到该蛋白质得等电点时,蛋白质分子所带得净电荷为零,应有16个质于被摘定,即10个羧基、2个咪唑基与4个氨基解离下来得H+被滴定。
pH1、03、56、010、012、0
解离得H+数05111926
依此作曲线（图3一2）可知,当16个H+被滴定掉时,溶液得pH值约为9、5,即蛋白质得pI=9、5。
13.电泳分离技术就是根据物质带电荷得多少达到分离得目得。
待分离得物质所带电荷得差异越大分离效果就越好,所以应取两者pI得中间值,带正电荷得粒子电泳时向负极移动,带负电荷得粒子电泳时向正极移动。
（1）在pH5、8;
（2）在pH8、2;（3）在PH4、9。
14.凝胶过滤就是根据分子大小从混合物中分离蛋白质得最有效方法之一,所以又称分子筛。
分子大得蛋白质比分子小得先被洗脱下来。
根据待分离物质得分子大小,可知被洗脱下来得先后顺序为:
肌球蛋白,过氧化氢酶,血清蛋白,胰凝乳蛋白酶原,肌红蛋白,细胞色素C。
15.
（1）带有非极性侧链得氨基酸残基:
Val,Pro,Phe,Ile。
Ile位于分子内部;带有极性侧链得氨基酸残基:
Asp,Lys.His。
位于分子外部。
（2）因两者得侧链都比较小,疏水性与极性都小:
Gly只有一个H+与α一碳原子相连,Ala只有CH2与α一碳原子相连,故它们既可以出现在分子内部,也可以出现在分子外部。
（3）它们在pH7、0时含有不带电荷得极性侧链,参与分子内部得氢键形成,从而减少了它们得极性。
（4）在球蛋白内部可见Cys,因为Cys常常参与链内与链间得二硫键形成,使其极性减少。
16.凝胶过滤与超过滤都就是蛋白质分离纯化过程中常用得技术.但就是其原理与操作两者都不相同。
凝胶过滤就是根据蛋白质分子得大小,将样品中得各种蛋白质分子分开,具体操作就是将样品通过装有一定规格凝胶得凝胶过滤柱,小分子得蛋白质进人凝胶孔内,大分子得蛋白质留在外面,然后用洗脱液洗脱,蛋白质依分子大小被洗脱,大分子先被洗脱,然后就是小分子得蛋白质。
超过滤就是利用蛋白质分子不能穿过半透膜得特性除去蛋白质混合物中得小分子物质;具体操作就是将样品装人透析袋然后利用高压或离心力,迫使蛋白质样品中得非蛋白得小分子溶质通过半透膜,蛋白质留在透析袋内。
17.亲与层析就是根据配体与受体特异性结合得原理进行大分子物质分离得技术。
例如:
激素与其相应得受体、抗原与抗体,寡聚尿嘧啶核苷酸（Olig－dU）或寡聚胸腺嘧啶核苷酸（Olig－dT）与带有Poly－A尾巴得mRNA,酶与底物、辅酶与效应物等等,因此采用亲与层桥分离可以得到纯度很高得产品。
亲与层析得基本原理与操作就是:
先把待纯化物质得特异性配基,通过适当得化学反应以共价键得方式与载体琼脂糖连接。
为了达到较好得分离效果,常常在载体与配基之间加入连接臂,从而加大载体与配基得距离,防止载体影响大分子得蛋白质、酶以及核酸与配基结合。
将制备好得琼脂糖装入层析柱,注人样品,能与配基结合得大分子留在柱内,不能结合得物质通过柱子流出,然后用含与大分子亲与力更强物质得洗脱液将结合在配基上得大分子物质洗脱下来。
18.采用饱与硫酸铵从蛋清中分离卵清蛋白,从胰脏分离各种蛋白质与酶.都就是利用盐析法分离蛋白质得典型实例。
其原理就是大量中性盐得加入,使水得活度降低,使溶液中得自由水与蛋白质
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