常用溶液的配制方法.docx
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常用溶液的配制方法
常用溶剂的配制方法
1.磷酸缓冲液：
0.15M，pH=7.4磷酸缓冲液：
KH2PO4：
2.041g+100ml水K2HPO4·3H2O：
10.3g+300mL水
两液混合即成400mL，0.15M，pH=7.4的磷酸缓冲液
0.2mol/L不同pH的磷酸缓冲液：
先配制0.2mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：
pH
KH2PO4（mL）
K2HPO4·3H2O（mL）
pH
KH2PO4（mL）
K2HPO4·3H2O（mL）
5.7
93.5
6.5
6.9
45.0
55.0
5.8
92.5
8.0
7.0
39.0
61.0
5.9
90.0
10.0
7.1
33.0
67.0
6.0
87.7
12.3
7.2
28.0
72.0
6.1
85.0
15.0
7.3
23.0
77.0
6.2
81.0
18.5
7.4
19.0
81.0
6.3
77.5
22.5
7.5
16.0
84.0
6.4
73.5
26.5
7.6
13.0
87.0
6.5
68.5
31.5
7.7
10.5
90.0
6.6
62.5
37.5
7.8
8.5
91.5
6.7
56.5
43.5
7.9
7.0
93.0
6.8
51.0
49.0
8.0
5.3
94.7
2.硼酸缓冲液
0.15M，pH=8.2硼酸缓冲液：
四硼酸钠溶液：
2g+35mL水硼酸溶液：
3.246g硼酸+350mL水
两液混合即成700mL，0.15M，pH=8.2的硼酸缓冲液
0.2mol/L（硼酸根），不同pH的硼酸缓冲液：
先配制0.2mol/L的硼酸溶液和0.05mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制：
pH
四硼酸钠mL
硼酸mL
pH
四硼酸钠mL
硼酸mL
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
8.5
8.4
4.5
5.5
7.8
2.0
8.0
8.7
6.0
4.0
8.0
3.0
7.0
9.0
8.0
2.0
3.甘氨酸-盐酸缓冲液：
0.2mol/L
0.2mol/L甘氨酸溶液（15.01g/L）
pH
0.2mol/L
甘氨酸mL
0.2mol/L
盐酸mL
pH
0.2mol/L
甘氨酸mL
0.2mol/L
盐酸mL
2.0
50
44.4
3.0
50
11.4
2.4
50
32.4
3.2
50
8.2
2.6
50
24.2
3.4
50
6.4
2.8
50
16.8
3.6
50
5.0
4.柠檬酸缓冲液：
0.1mol/L
C6H8O7·H2O:
0.1mol/L溶液为21.01g/L
Na3C6H5O7·2H2O：
0.1mol/L溶液为29.41g/L
pH
0.1mol/L柠檬酸mL
0.1mol/L柠檬酸钠mL
pH
0.1mol/L柠檬酸mL
0.1mol/L柠檬酸钠mL
3.0
18.6
1.4
5.0
8.2
11.8
3.2
17.2
2.8
5.2
7.3
12.7
3.4
16.0
4.0
5.4
6.4
13.6
3.6
14.9
5.1
5.6
5.5
14.5
3.8
14.0
6.0
5.8
4.7
15.3
4.0
13.1
6.9
6.0
3.8
16.2
4.2
12.3
7.7
6.2
2.8
17.2
4.4
11.4
8.6
6.4
2.0
18.0
4.6
10.3
9.7
6.6
1.4
18.4
4.8
9.2
10.8
0.1MpH=4柠檬酸缓冲液222mL
V1：
柠檬酸
V2：
柠檬酸钠
V1=131mL
0.1*0.131*210.14=2.75g
V2=91mL
0.1*0.091*294.10=2.68g
0.1MpH=2.3柠檬酸缓冲液412mL
V1：
柠檬酸
V2：
柠檬酸钠
V1=400mL
0.1*0.4*210.14=8.40g
V2=12mL
0.1*0.012*294.10=0.353g
1MpH=10碳酸缓冲液211mL
V1：
碳酸钠
V2：
碳酸氢钠
V1=150mL
1*0.15*106=15.9g
V2=61mL
1*0.061*84=5.12g
原来1MpH=7.4磷酸缓冲液203mL
V1：
K2HPO4·3H2OV2：
KH2PO4
V1=150mL
0.15*1*228.22=34.23g
V2=53mL
0.053*1*136.08=7.21g
现在1MpH=7.4磷酸缓冲液134mL
V1：
K2HPO4·3H2OV2：
KH2PO4
V1=100mL
0.1*1*228.22=22.82g
V2=34mL
0.034*1*136.09=4.3g
0.1MpH=8磷酸缓冲液20.15mL
V1：
K2HPO4·3H2OV2：
KH2PO4
V1=20mL
0.1*0.02*228.22=0.46g
V2=0.15mL
0.1*0.15*10-3*136.08=0.002g
0.5MpH=8Tris-HCl缓冲液165mL
V1：
Tris
V2：
HCl
V1=105mL0.5*0.105*12.1.=6.36g
V2=60mL（0.5MHCl）
0.2MpH=4.3柠檬酸缓冲液372mL
V1：
柠檬酸
V2：
柠檬酸钠
V1=300mL
0.3*0.2*210.14=12.61g
V2=72mL
0.2*0.072*294.10=4.24g
0.2MpH=4柠檬酸缓冲液340mL
V1：
柠檬酸
V2：
柠檬酸钠
V1=200mL
0.1*0.2*210.14=8.41g
V2=140mL
0.2*0.14*294.10=8.23g
5.Tris-HCl缓冲液：
0.1mol/L
100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀，可得0.1mol/L，不同pH的缓冲液。
pH
0.1mol/L
盐酸（mL）
pH
0.1mol/L
盐酸（mL）
pH
0.1mol/L
盐酸（mL）
7.2
89.4
7.8
69.0
8.4
34.4
7.3
86.8
7.9
64.0
8.5
29.4
7.4
84.0
8.0
58.4
8.6
24.8
7.5
80.6
8.1
52.4
8.7
20.6
7.6
77.0
8.2
45.8
8.8
17.0
7.7
73.2
8.3
39.8
8.9
14.0
200mL0.1MTris（2.42g）加入0.1MHCl24mL→pH=9，0.1MTris-HClbuffer
6.醋酸缓冲液：
0.2mol/L
0.2mol/L醋酸钠：
27.22g三水醋酸钠（无水的为16.4g）+1L水
0.2mol/L醋酸：
11.55mL冰醋酸+1L水
pH
醋酸钠mL
醋酸mL
pH
醋酸钠mL
醋酸mL
3.6
0.75
9.25
4.8
5.90
4.10
3.8
1.20
8.80
5.0
7.00
3.00
4.0
1.80
8.20
5.2
7.90
2.10
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
7.碳酸缓冲液：
0.1mol/L（Ca2+、Mg2+存在时不得使用）
pH
0.1mol/L碳酸钠（mL）
0.1mol/L碳酸氢钾（mL）
20℃
37℃
9.16
8.77
1
9
9.40
9.12
2
8
9.51
9.40
3
7
9.78
9.50
4
6
9.90
9.72
5
5
10.14
9.90
6
4
10.28
10.08
7
3
10.53
10.28
8
2
10.83
10.57
9
1
0.1mol/LMES缓冲液：
1.921gMES+100mL水，pH=4.09
8.电泳溶液：
电泳缓冲液：
3gTris碱、14.4g甘氨酸和1gSDS溶于水中，调pH至8.3左右，加水定容至1L。
丙烯酰胺溶液（49.5%T，3%C）：
48g丙烯酰胺和1.5gbis溶于100mL重蒸水中。
分离胶缓冲液（4×）：
75ml2mol/LTris-HCl缓冲液（pH=8.8）+4ml0.1mol/LSDS+46mL重蒸水。
浓缩胶缓冲液（4×）：
50ml2mol/LTris-HCl缓冲液（pH6.8）+4ml0.1mol/LSDS+46mL重蒸水
2%茚三酮溶液：
50mL95%乙醇+1g茚三酮（避光，4℃保存）
2%乙醇胺溶液：
2mL乙醇胺+98mL硼酸缓冲液（0.15M，pH=8.2），调pH=8.2
2M醋酸溶液：
114.4mL冰醋酸+去离子水定容至1L
0.5mol/LEDTA：
配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L
考马斯亮蓝溶液：
考马斯亮蓝G-250100mg溶于50ml95%乙醇中，充分搅拌溶解，加入100mL85%磷酸，用蒸馏水1000mL容量瓶定容，真空抽滤。
最终试剂中含有0.01%（w/v）考马斯亮蓝G-250，4.7%（w/v）乙醇，8.5%（w/v）磷酸。
10%SDS（十二烷基硫酸钠）：
称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。
用水定容至1L。
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