诊断学实验报告.docx
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诊断学实验报告
实验诊断学实验报告
红细胞计数试验
实验目的：
通过红细胞计数实验
1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。
2、掌握血细胞计数板的结构
试验器材：
血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、生理盐水
实验原理：
一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下
计数一定容积内的细胞，再换算成每升标本的细胞数报告。
操作步骤：
1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。
2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。
6、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域：
中心大方格中的5个中方格（正中一个和四角各一个）。
计数原则：
数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线（双线）上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算：
红细胞数/l=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106
或
红细胞数/l=5个中方格内红细胞数÷100×1012
式中×55个中方格换算成1个大方格
×101个大方格容积为0.1ul，换算成1.0ul。
×201血液的稀释倍数
×106由u1换算成l
数据处理：
rbc:
×l0/l
12参考值男:
（4～5.5）×10/l
12女：
（3.5～5）×10/l
12新生儿：
（6～7）×10/l12答案不唯一，言之有理即可
注意事项：
1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血
凝块应重新采血。
2充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。
3、中方格内红细胞分布应均匀，健康成人每中方格红细胞数约为80—100个，各中方格内之红细胞相近，如悬殊过大（超过10个细胞以上的）应重混匀再充填。
实验诊断学实验报告
血红蛋白测定
实验目的：
通过血红蛋白测定
1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。
2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。
试验仪器：
试管、微量吸管、分光光度计
实验原理：
血红蛋白中的亚铁离子（fe2+）被高铁氰化钾氧化成高离子（fe3+），血红蛋
白转化成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白与氰离子（cn-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白。
用光电比色计在540nm波长比色。
从hicn参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。
操作步骤：
1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟
2、用721光电比色仪，540nm波长，试剂为空白调0点比色，读取光密度，查标准曲线得结果。
计算：
血红蛋白（g/l）=测定管吸光度×367.7
数据处理：
答案不唯一，言之有理即可hb：
g／l
参考值男0.40～0.54l/l
女:
0.37～0.48l/l
儿童：
0.35～0.49l/l
新生儿：
0.50～0.60l/l
注意事项：
1、做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。
篇二：
实验诊断学实验报告（牡丹江医学院）
实验诊断学试验操作报告
目录
一、红细胞计数试验
二、血红蛋白测定
三、白细胞计数
四、白细胞分类计数
五、尿比重
六、尿沉渣定性检查
七、尿蛋白检查磺基水杨酸法
八、尿干化学分析
九、尿葡萄糖定性检查（班氏法）
十、abo血型测定
红细胞计数试验
实验目的：
通过红细胞计数实验
1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。
2、掌握血细胞计数板的结构
试验器材：
血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、
生理盐水
实验原理：
一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下
计数一定容积内的细胞，再换算成每升标本的细胞数报告。
操作步骤：
1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。
2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。
6、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域：
中心大方格中的5个中方格（正中一个和四角各一个）。
计数原则：
数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线（双线）上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算：
红细胞数/l=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106
或
红细胞数/l=5个中方格内红细胞数÷100×1012
式中×55个中方格换算成1个大方格
×101个大方格容积为0.1ul，换算成1.0ul。
×201血液的稀释倍数
×106由u1换算成l
数据处理：
rbc:
×l0/l
12参考值男:
（4～5.5）×10/l
12女：
（3.5～5）×10/l
12新生儿：
（6～7）×10/l12答案不唯一，言之有理即可
注意事项：
1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血
凝块应重新采血。
2充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，
不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。
3、中方格内红细胞分布应均匀，健康成人每中方格红细胞数约为80—100个，
各中方格内之红细胞相近，如悬殊过大（超过10个细胞以上的）应重混匀再充填。
血红蛋白测定
实验目的：
通过血红蛋白测定
1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。
2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。
试验仪器：
试管、微量吸管、分光光度计
实验原理：
血红蛋白中的亚铁离子（fe2+）被高铁氰化钾氧化成高离子（fe3+），血红蛋
白转化成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白与氰离子（cn-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白。
用光电比色计在540nm波长比色。
从hicn参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。
操作步骤：
1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟
2、用721光电比色仪，540nm波长，试剂为空白调0点比色，读取
光密度，查标准曲线得结果。
计算：
血红蛋白（g/l）=测定管吸光度×367.7
数据处理：
答案不唯一，言之有理即可hb：
g／l
参考值男0.40～0.54l/l
女:
0.37～0.48l/l
儿童：
0.35～0.49l/l
新生儿：
0.50～0.60l/l
注意事项：
1、做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。
白细胞计数
实验目的：
掌握白细胞计数显微镜计数法原理及技术。
实验器材：
显微镜、微量吸管、计数板、盖玻片、白细胞稀释液。
实验原理：
用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞，混匀后充入计数池中，于显微镜下计
数一定体积内的白细胞数，经过换算求得每升血液内的白细胞数。
操作步骤：
1、取试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。
2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血20微升或抗凝血20微升。
3、擦去管尖外部余血、轻轻注入稀释液底部，再吸取上清液清洗3次，摇匀。
4、将计数板与盖玻片用软布擦净，将盖玻片覆盖于计数池上，再
用微量吸管吸取悬液，充入计数池与盖玻片间的细缝隙中，静止2-3分钟，待白细胞下沉。
5、用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数。
计算：
（四个大方格内wbc数/4）×10×20×106=wbc数/20×109/升
数据处理：
答案不唯一，言之有理即可
正常参考值：
成人：
（4-10）×109/升
新生儿：
（15-20）×109/升
6月-2岁：
（11-12）×109/升
白细胞分类计数
实验目的：
掌握白细胞分类计数、原理及技术。
实验器材：
显微镜、染色缸和架，载玻片、瑞氏染液、香柏油、二甲苯。
实验原理：
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，经wright染色后，显微镜下观察，根
据白细胞形态特点逐个分类计数。
得出各种白细胞的相对比值，并注意观察其形态和质量的变化。
操作步骤：
1、取末梢血1滴。
置于载玻片的一端，以边缘平滑的推片制成血涂片，空
气干燥。
2、用蜡笔在血膜两端划线，以防染液溢出，然后将血片放于染色架上。
3、先加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定染色细胞0.5-1分钟。
4、按1：
1或1：
2加缓冲液与染料混匀，染色10分钟左右。
5、在血膜染10分钟后，用缓冲液或接近中性的水冲去洗液，待自然
干燥或滤纸吸干后，用镜油观察。
计算：
1、先用低倍镜观察血片染色情况，白细胞多少和细胞分布情况。
2、选择血涂片的体尾交界处，染色良好的区域，在油镜下计数
100-200个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各自白细胞所占数值（百分率）。
3、白细胞分类计数方法很多，常用的有，完全记录法、半记录法、
分类计数器计数法。
4、每个病人应分类白细胞数，视白细胞总数多少而定。
5、各类细胞所占的百分率乘以白细胞总数/升，既得每升血液中各类白细胞的度。
数据处理：
答案不唯一，言之有理即可篇三：
诊断学实验总结（官方版）
实验诊断学总结
第一章总论
概念
[1]临床检验：
以离体的血液、体液、排泄物等为标本，通过试剂、仪器等进行检测，并对检测的过
程进行全面的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据。
[2]实验诊断：
通过临床检验得到的信息为预防、诊断、治疗和预后评价所作的临床医学活动。
[3]床边检验：
在病人医疗现场进行的临床检验。
[4]参考值或参考范围：
参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值；参考范围是指所有抽样
组测得值的平均值加减其标准差。
[5]质量控制：
为保证临床检验结果质量（满足医生/客户要求）而采取的一系列检查、控制手段
第二章血液检查examinationofblood
一、血液：
不断地流动于人体的循环系统中，直接或间接参与全身各个组织器官的新陈代谢、功能调节及维持人体内、外环境间的平衡，完成各项生理功能活动。
二、1.血液有形成分的组成
血细胞占全血40～50%，称之有形成分
1.白细胞中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞
2.红细胞（主要成分是血红蛋白）
3.血小板
三．血液一般检查generalexaminationofblood（血常规）
1、一些缩写
erythrocytecount（rbc）红细胞计数
hemoglobindetermination（hb）血红蛋白测定
leukocytecount（wbc）白细胞计数
differentialleukocytecount白细胞分类
plateletcount（plt）血小板计数
新生儿特点:
红、白细胞都比成人高，红细胞呈―生理性巨幼红细胞贫血‖的表现，白细胞呈感染的表现（粒细胞增高并左移）
2、红细胞计数erythrocytecount
方法:
显微镜计数法；全自动血细胞分析仪计数法
操作:
用等渗稀释液将血液作200倍稀释，滴入血细胞计数板中静止1-2min，于高倍镜下计数5个中方格红细胞总数，经换算即得每升血液中血红细胞数。
公式:
rbc/l=5个中方格总数×5×10′200×106
报告格式:
δ.δδ×1012/l3.81×1012/l
参考值
（男）4.0～5.5×1012/l
（女）3.5～5.0×1012/l
（新生儿）6.0～7.0×1012/l
各种红细胞的形态
3．相关检测
[1]．平均红细胞容积（mcv）:
mcv=红细胞比容/红细胞数
红细胞数参考值:
80-94fl
[2]．红细胞比容测定（hct）:
抗凝全血经离心沉淀后，测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值。
参考值男性42-49%女性37-48%
[3]．平均红细胞血红蛋白量（mch）：
指平均每个红细胞内所含血红蛋白的量。
[4]．平均红细胞血红蛋白浓度（mchc）：
指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度
参考值:
310-350g/lmchc=血红蛋白（g/l）/红细胞比容（%）×100g/l
[5]．红细胞容积分布宽度（rdw）:
rdw=s.d./平均红细胞体积
平均红细胞体积参考值:
11.5-14.5%
rdw的统计学实质是红细胞大小的变异系数cvrdw<14%
类型mcvmchmchc临床类型
大细胞贫血>100>32310-350巨幼细胞贫血
正常细胞贫血80-9426-32310-350aa急性失血性贫血，溶血性贫血，骨髓病性贫血单纯小细胞贫血<80<26310-350慢性炎症性贫血肾性贫血
小细胞低色素贫血<80<26<300缺铁性贫血，铁粒幼细胞性贫血，珠蛋白生成障碍性
贫血，慢性失血性贫血
4．临床意义：
（红细胞增加）
相对性增高：
各种原因导致的血浆容量减少，使红细胞相对增多。
剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。
绝对性增高：
由于缺氧而致红细胞代偿性增多，红细胞增多的程度与缺氧程度成正比
生理性：
胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时，红细胞可一过性增多
病理性：
严重慢性心、肺疾患，如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病，真性红细胞增多症
（红细胞减少）
生理性：
妊娠中、后期，血容量增加约25%，引起血液稀释；6个月～2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足；老年人造血功能明显减低致红细胞减少；月经期暂时引起下降。
病理性：
各种类型贫血：
如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。
5．网织红细胞计数及正常参考值：
[1]网织红细胞是晚幼红细胞脱核后，在完全成熟之前的过渡型红细胞。
由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质，用煌焦油兰等染料进行活体染色后，胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构，故名网织红细胞。
成人：
0.5%-1.5%新生儿（<3月）：
2%-6%
[2]网织红细胞计数的意义
增多：
骨髓增生旺盛。
常见于溶血性贫血，尤其是急性溶血性贫血（可达20%以上）、急性大失血。
贫血治疗有效。
如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血，经相应治疗后1-2日即开始，1周左右达最高峰
减少：
骨髓增生低下，如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时
6．白细胞测定mch=血红蛋白（g/l）/红细胞百万数/μl参考值:
26-32pg
[1]白细胞计数leukocytecount
方法：
显微镜计数法、全自动血细胞分析仪法
计数法:
以2%冰醋酸对血液作定量稀释，同时破坏红细胞。
然后将悬液充入细胞计数池内，低倍镜计数4个大方格内白细胞总数。
计算原则同红细胞。
原理（显微镜计数原理）：
用2%乙酸对血液作定量稀释，同时破坏红细胞。
混匀并滴入计数室中，低倍显微镜下计数4大方格内的白细胞数，经换算得每升血液中白细胞总数。
公式：
wbc/l=4格白细胞总数?
4×10×20×106
报告格式:
δ.δδ×109/l
参考值:
成人4.0～10.0×109/l;新生儿15.0～20.0×109/l
临床意义
（白细胞增高）
生理性增高:
见于妊娠期、分娩时、新生儿;剧烈运动、淋浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等;病理性增高:
急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎。
严重组织损伤、大量细胞破坏。
如术后12～76h，wbc常>10.0×109/l；急性心肌梗死后1～2d，常见wbc明显增高；急性溶血亦见wbc增多，增多成分以中性分叶核粒细胞为主。
急性大出血:
如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后，wbc迅速增多常达20.0×109/l。
这可能是应激状态、或内出血一过性缺氧。
急性中毒:
如安眠药、滴滴畏中毒，wbc可高达20×109/l以上，代谢性酸中毒。
如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见wbc增多，均以中性粒细胞为主。
白血病及恶性肿瘤:
急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素，并能吸引骨髓储备池wbc释放。
（白细胞减少）
某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时，白细胞总数可低至2.0×109/l；病毒感染。
某些血液病如再生障碍性贫血；巨幼红细胞性贫血；恶性网状细胞病（恶组）；急性非白血性白血病。
脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化损伤;电离辐射，如x线、放射性核素等；服氯霉素。
自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。
[2]白细胞分类计数与临床意义
中性粒细胞（neutrophil）：
游走、吞噬50～70%
嗜酸性粒细胞（eosinophil）：
致敏反应0.5～5%
嗜碱性粒细胞（basophil）：
释放组织胺、肝素0～1%单核细胞（monocyte）：
吞噬、清除死亡细胞及异物3～8%
淋巴细胞（lymphocyte）：
参与体液、细胞免疫20～40%
中性粒细胞neutrophil
生理特性：
渗出性、变形性、趋化性、吞噬性
骨髓血液
分裂池成熟池储备池边缘池循环池
4-5d1-3d2-3d
核左移：
原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移：
周围血中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移
杆状核粒细胞增多：
6%：
轻度左移；10%：
中度左移；25%：
重度左移或称为类白血病反应
类白血病反应：
患儿男，2.5岁，日本籍，于10天前因受冷而发热，自测体温38℃（腋下），无畏寒、头痛、呕吐、腹泻，就诊于当地医院，血常规wbc28.9×109/l，阿莫西林0.125g3/日治疗，无明显好转，4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹，停药否无区别。
1999年7月5日急诊住我院。
实验室检查，血象：
hb110g/l,wbc23×109/l,血小板121×109/l，幼稚型异常淋巴56%，成熟淋巴21%，嗜酸性粒细胞2%，中性粒细胞21%，骨髓穿刺二次，骨髓细胞分类象同血涂片象。
细胞核右移：
正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶者超过5%时为核右移，此时常伴有白细胞总数减少。
一过性地出现核右移是正常现象。
如在疾病进行期突然出现核右移的变化，则表示预后不良中性粒细胞临床意义
生理性增高:
见于妊娠期、分娩时、新生儿期;剧烈运动、热水浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等
病理性增高:
急性感染;严重组织损伤;急性大出血;急性中毒;白血病及恶性肿瘤
病例：
患者朱全妹，女性，47岁，因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于2001—12—04由急诊收治入院。
1．创伤性失血性休克2．腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血3．骨盆严重骨折4．会阴部、肛门严重挫裂伤
血常规检查结果：
hb：
92g/lrbc：
3.0×1012/lplt：
271×109/l
wbc：
32.7×109/l：
中幼粒细胞：
2%;晚幼粒细胞：
5%
杆状核粒细胞：
35%;多核粒细胞：
45%;淋巴细胞：
9%单核细胞：
4%
中性粒细胞减少:
某些革兰氏阴性杆菌感染;某些血液病;脾功能亢进;慢性理化损伤;自身免疫性疾病
淋巴细胞lymphocyte
病理性增多见于：
病毒性感染;某些慢性感染;各类淋巴细胞性白血病
淋巴细胞减少见于:
接触放射线;应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、aids
单核细胞monocyte
单核细胞病理性增多见于：
心内膜炎、疟疾、黑热病;急性感染的恢复期;活动性肺结核及粟粒性结核;慢性单核细胞白血病
嗜酸性粒细胞eosinophil
增高见于：
过敏性疾病;寄生虫病;皮肤病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤
7．血小板计数platelet
是由骨髓中成熟巨核细胞生成;在止血过程中起着重要的作用
计数方法:
显微镜计数法;全自动血细胞分析仪法
参考值100～300×109/l
临床意义
血小板增多>400×109/l;见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。
血小板减少<100×109/l;见于血小板减少紫癜（itp）、再生障碍性贫血、急性白血病、x射线照射。
病例患者：
女32岁已婚，有一8岁女儿，无业
主述：
经常头痛、疲乏、失眠。
右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。
患者长期服用减肥药，无间断
血液检验结果：
?
wbc：
15.4×109/lrbc：
5.53×1012/l
?
nc:
85.2%hb:
150g/l
?
lc:
11.6%plt：
1321×109/l
?
mo:
1.8%rdw:
17.8%
?
eos:
0.9%bas:
0.5%
8．血红蛋白测定
方法：
氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪
原理：
除hbs外，多种血红蛋白（hb）均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白（hi），再与cn-结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白（hicn），在540nm处有一吸收峰
9、全自动血细胞分析仪
多项参数测定
仪器组成:
1.主机2终端机3打印机
阅读报告:
1.18、23项参数中英文报告2.图解3.警告标志4.含义报告
库尔特原理：
孔径阻抗细胞计数原理
白细胞自动化分类
二项式分类粒细胞和非粒细胞
三项式分类淋巴、中性粒细胞和中间细胞
五项式分类嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞
第三章贫血
一、贫血总论
1．贫血a
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