羊的人工授精技术及操作要点.docx

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羊的人工授精技术及操作要点

羊的人工授精技术及操作要点

   羊人工授精是人为的利用器械采取公羊的精液，经过品质检查和一系列处理，再通过器械将精液输入发情母羊生殖道内，达到母羊受胎的配种方式。

人工授精可以提高种公羊的利用率，既加速了羊群的改良进程，防止疾病的传播，又节约饲养大量种公羊的费用。

   人工授精技术包括器械的消毒、采精、精液品质检查、精液的稀释、保存和运输、母羊发情鉴定和输精等主要技术环节。

   一、消毒技术

   1.器械的消毒

   采精、输精及与精液接触的所有器械都要消毒，并保持清洁、干燥，存放在清洁的柜内或烘干箱中备用。

假阴道要用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，然后用75%的酒精消毒，使用前用生理盐水冲洗。

集精瓶、输精器、玻璃棒和存放稀释液及生理盐水的玻璃器皿洗净后要经过30分钟的蒸气消毒，使用前用生理盐水冲洗数次。

金属制品如开膣器、镊子、盘子等，用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，擦干后用75%的酒精或进行酒精灯火焰消毒。

   2.场地的消毒

   准备一间向阳、干净的配种无菌室，要求地面平整，光线充足，面积为10～12平方米，室温为18℃～25℃。

也可选择宽敞、平坦、清洁、安静的室外场所。

日常消毒用1%新洁尔灭或1%高锰酸钾溶液进行喷洒消毒，每日于采精前和采精后各进行1次。

每星期对采精室进行1次熏蒸消毒，所用药品是40%的甲醛溶液500毫升，高锰酸钾250克。

   3.羊体的消毒

   公羊实施配种前和情期母羊实施配种前，用1%新洁尔灭溶液对羊体进行反复消毒。

   4.消毒应注意的问题

   严格遵守消毒时间和消毒药品的配量要求;熏蒸消毒时，应关闭门窗，第2天应提前1小时到岗，敞开门窗;注意安全，防止物品损坏，每次消毒完毕，应及时关掉电源。

   二、采精技术

   1.采精前的准备

（1）器械的准备：

所有的器械都要提前清洗、干燥、消毒，存放于消毒柜内备用。

（2）公羊的准备：

种公羊第一次采精时的年龄应在1.5岁左右，不宜过肥，也不宜过瘦，初次参加采精的公羊，应先进行采精训练，方法是让其“观摩”其他公羊配种;或用发情母羊的尿液或分泌物涂抹在公羊鼻尖上，刺激性欲。

采精调教训练成功后，才能进行正式操作。

   （3）假阴道的安装：

安装假阴道时，先将内胎装入假阴道外壳，再装上集精瓶，注意内胎平整，不要出现皱褶。

为保证假阴道有一定的润滑度，用清洁玻璃棒蘸少许灭菌凡士林，均匀涂抹在假阴道内胎和前三分之一处。

为使假阴道温度接近母羊温度，从假阴道注水孔注入少量温水，使水约占内外胎空间的70%，假阴道温度在采精时应保持在40℃～42℃。

注水后，再通过气体活塞吹入气体，使假阴道保持一定弹性，吹入气体的量一般以内胎表面呈三角形合拢而不向外鼓出为适宜。

   2.采精

   采精前用温水洗种公羊阴茎的包皮，并擦干净。

将台羊保定后，引公羊到台羊处，采精时采精员站立在公羊的右侧，当种公羊爬跨时，迅速上前，右手持假阴道靠在母羊臀部，其角度与母羊的阴道的位置相一致（与地面成35～45度角），用左手轻托阴茎包皮，迅速将阴茎导入假阴道中。

羊的射精速度很快，当发现公羊有向前冲的动作时即已射精，要迅速把装有集精瓶的一端向下倾斜，并竖起集精瓶，送精液到处理室，放气后取下集精瓶，盖好盖，并记录公羊号，放于操作台上进行精液品质检查。

   3.采精频率

   成年种公羊每日采精1～2次，连采3天休息1次，初采羊可酌减。

   4.采精注意事项

   严格遵守消毒技术要求，所有采精物品未经消毒不得应用。

采精训练是一项细致的工作，必须由采精熟练人员负责进行。

所用采精器的环境条件必须严格把握，温度要控制在40℃～42℃。

   三、精液品质检查

   精液品质检查的目的是为了评定精液品质的优劣，以便决定它能不能用于输精配种，同时，也为确定精液的稀释倍数提供科学依据。

   1.外观检查

（1）颜色：

正常的精液为浓厚的乳白色，肉眼可看到乳白色云雾状。

（2）气味：

正常精液无味或略带腥味。

   （3）精液量：

公羊一次采精的精液量一般为0.5～2.0毫升，山羊平均为0.8～1.0毫升，绵羊平均为1.0～1.2毫升。

   经外观检查，凡带有腐败臭味，出现红色、褐色、绿色的精液判为劣质精液，应弃掉不用，一般情况下不再做显微镜检查。

   2.显微镜检查

（1）精子活率：

精子的活率是指在38℃的室温下直线前进的精子占总精子数的百分率。

检查时以灭菌玻璃棒蘸取1滴精液，放在载玻片上加盖玻片，在400～600倍显微镜下观察。

全部精子都做直线运动评为1级，90%的精子做直线前进运动为0.9级，以下以此类推。

（2）精子的密度：

是指每毫升精液中所含的精子数。

取1滴新鲜精液在显微镜下观察，根据视野内精子多少分为密、中、稀三级。

"密"是指在视野中精子的数量多，精子之间的距离小于1个精子的长度;"中"是指精子之间的距离大约等于1个精子的长度;"稀"为精子之间的距离大于1个精子的长度。

为了精确计算精子的密度，可用血球计数器在显微镜下进行测定和计算，每毫升精液中含精子25亿以上者为密，20亿～25亿个为中，20亿以下为稀。

   （3）精子质量的评定标准：

精液为乳白色，无味或略带腥味，精子活力在0.6以上，密度在中等以上（每毫升精液的精子数在20亿以上），畸性精子率不超过20%，该羊精液判为优质精液。

以上几项质量标准任何一项达不到要求，均被定为劣质精液。

   4.精液检查时应注意的问题

   做显微镜检查时，温检箱内温度控制在38℃左右。

精液品质检查要求迅速准确，室内要清洁，室温保持在18℃～25℃。

精子的形态检查，一般1周内对同1头公羊精液做1次染色检查，其他时间可根据经验做直观估测。

   四、精液的稀释、分装、运输和保存

   1.精液的稀释

   精液稀释的目的是扩大精液量，增加每次采精的可配母羊数，提高种公羊的利用率，还可供给精子营养，增强精子活力，有利于精液的保存、运输和输精。

（1）稀释液的配制：

稀释液的配方选择易于抑制精子活动，减少能量消耗，延长精子寿命的弱酸性稀释液。

   配方一：

生理盐水稀释液：

是用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作稀释液。

此种稀释液简单易行，稀释后的精液应在短时间内使用，是目前生产实践中最为常用的稀释液。

但用这种稀释液稀释时，稀释的倍数不宜太高，一般以2倍以下为宜。

   配方二：

奶汁稀释液：

奶汁先用7层纱布过滤后，再煮沸消毒10～15分钟，降至室温，去掉表面脂肪即可。

这种稀释液稀释效果好，但稀释倍数不能太高，以3倍以下为宜。

   配方三：

葡萄糖卵黄稀释液：

在100毫升蒸馏水中加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克，溶解后过滤3～4次，蒸煮30分钟后灭菌，降至室温，再加新鲜卵黄（不要混入蛋白）20毫升，再加青霉素10万单位振荡溶解。

这种稀释液有增加营养的作用，可作7倍以下的稀释。

（2）精液的稀释倍数：

要根据精子密度、活力而定稀释比例，稀释后的精液，每毫升有效精子数不少于7亿个。

   （3）精液稀释的操作步骤：

根据镜检得出精子密度确定稀释倍数，根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量，用量杯量取应加的稀释液量。

稀释前将两种液体置于同一温水中，然后将稀释液沿着精液瓶缓缓倒入，为使混合均匀可稍加摇动或反复倒动1～2次，稀释完毕后，立即进行活力镜检，并将镜检结果填人采精登记表。

   （4）精液稀释应注意的事项：

稀释液温度与精液温度保持一致，在20℃～25℃室温和无菌条件下操作，精液稀释的倍数应根据精子密度而定，一般为1～3倍，稀释后的每毫升有效精子数不能低于7亿个。

   2.精液的分装

   将稀释好的精液根据各输精点的需要量分别装于2～5毫升小试管中，精液面距试管口不少于0.5～1.0毫升，然后用玻璃纸和胶圈将试管口扎好，在室温下自然降温。

分装后贴上标签，标签上注明精液采出的日期、时间、活力、密度、公羊的品种。

   3.精液的运输

   在近距离运送精液时，不必进行降温，将装有精液的集精瓶或小试管口封严，用棉花包好放入保温瓶中即可。

远距离运输时，可用直接降温法降温。

运输精液时要防止剧烈震动，降温或升温都要缓慢进行，每次输送的精液都要注明公羊号、采精时间、精液量和精液品质。

   4.精液的保存

（1）常温保存：

精液稀释后，保存在20℃以下的室温环境中。

在这种条件下，精子运动明显减弱，可在一定限度内延长精子存活时间。

常温保存只能保存1天。

（2）低温保存：

在常温保存的基础上，温度进一步缓慢降至0℃～5℃之间。

可用直接降温法，将精液装入小试管内，外面包以棉花，再装入塑料袋内，直接放入装有冰块的广口保温瓶或保温箱中，使温度逐渐降至2℃～4℃。

低温下保存的有效时间为2～3天。

   （3）冷冻保存：

精液的冷冻保存要求的技术、环境和设备条件较严格，操作过程也比较复杂，这里不加详述。

   五、发情鉴定

   适时配种是提高羊人工授精受胎率的关键措施之一，母羊发情的主要表现：

食欲减退、兴奋不安、嘶鸣、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而静立不动;阴门红肿，频频排尿而流出透明的黏液;用试情公羊与母羊接触（隔着试情架），母羊表现温驯，并将后躯转向公羊，阴门肿胀;用阴道开膣器插入阴道，使之开张，发情盛期的母羊阴道潮红、润滑，子宫颈口开张，分泌的黏液呈豆花样。

   六、输精

   1.输精前的准备

（1）人员的准备：

输精人员应穿工作服，用肥皂水洗手擦干，用75%酒精消毒后，再用生理盐水冲洗。

（2）输精器械的准备：

把洗涤好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好，一起用高压锅蒸汽消毒。

   （3）母羊的准备：

对发情母羊进行鉴定及健康检查后，才能输精，母羊输精前，应对外阴部进行清洗，以1/3000新洁尔灭溶液或酒精棉球进行擦拭消毒，待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。

   （4）精液的准备：

将精液置于35℃的温水中升温5～10分钟后，轻轻摇匀，做显微镜检查，达不到输精要求的不能用于配种。

   2.输精方法

   将用生理盐水湿润后的开膣器插入阴道深部触及子宫颈后，稍向后拉，以使子宫颈处于正常位置之后轻轻转动开膣器90度，打开开膣器，开张度在不影响观察子宫的情况下开张的愈小愈好（2厘米），否则易引起母羊努责，不仅不易找到子宫颈，而且不利于深部输精。

输精枪应慢慢插入到子宫颈内0.5～1.0厘米处，插入到位后应缩小开膣器开张度，并向外拉出1/3，然后将精液缓缓注入。

输精完毕后，让羊保持原姿势片刻，放开母羊，原地站立5～10分钟，再将羊赶走。

   3.输精次数和输精量

   输精次数：

母羊1个情期应输精2次，发现发情时输精1次，间隔8～10个小时应进行第2次输精。

输精量：

每头份的输精量，原精液为0.05～0.10毫升，稀释后精液应为0.1～0.2毫升。

   4.输精时应注意的问题

   输精人员要严格遵守操作规程，输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻注、稍停。

对个别阴道狭窄的青年母羊，开膣器无法充分打开，很难找到子宫颈口，可采用阴道内输精，但输精量需增加1倍。

输精后立即做好母羊配种记录。

每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用，有条件的建议用一次性器具。