5．紫外－可见分光光度计从光路分类有哪几类？
各有何特点？
（1）单光束分光光度计：
结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。
（2）双光束分光光度计：
能自动记录吸收光谱曲线，自动消除光源强度变化所引起的误差。
（3）双波长分光光度计：
能提高方法的灵敏度和选择性，能获得导数光谱。
可用于多组分混
合物、混浊试样分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下的分析。
（4）二极管阵列分光光度计：
可全部波长同时检测，可获得时间、光强度和波长三维谱
6．简述紫外－可见分光光度计的主要部件、类型及基本性能。
紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成：
即光源、单色器、吸收池、检测器
和信号指示系统。
1．光源：
常用的光源有热辐射光源和气体放电光源两类。
热辐射光源用于可见光区，如钨丝
灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。
2．单色器：
单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹面反射镜使入射光成平行光）、色散
元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分组成。
其核心部分是色散元件，起分光的作用，主要有
棱镜和光栅。
3．吸收池：
一般有石英和玻璃材料两种。
石英池适用于可见光区及紫外光区，玻璃吸收池只
能用于可见光区。
4．检测器：
常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。
5．信号指示系统：
常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自
动记录装置等。
7．简述用紫外分光光度法定性鉴定未知物方法。
紫外分光光度法定性鉴定未知物的光谱依据是：
吸收光谱的形状、吸收峰的数目和位置
及相应的摩尔吸光系数，而最大吸收波长及相应的是定性分析的最主要参数。
用紫外分光光度法定性鉴定未知物方法有：
对比吸收光谱的一致性；
对比吸收光谱特征数据；
对比吸光度（或吸光系数）的比值。
8．举例说明紫外分光光度法如何检查物质纯度。
（1）如果一个化合物在紫外区没有吸收峰，而其中的杂质有较强的吸收，就可方便的检该化
合物中是否含有微量的杂质。
主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量
（2）如果一个化合物在紫外可见区有较强的吸收带，有时可用摩尔吸收系数来检查其纯度。
主成分强吸收，杂质无吸收/弱吸收→与纯品比E↓
杂质强吸收>>主成分吸收→与纯品比E↑，光谱变形
9．为什么最好在max处测定化合物的含量？
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根据Beer定律，物质在一定波长处的吸光度与浓度之间有线性关系。
因此，只要选择一
定的波长测定溶液的吸光度，即可求出浓度。
选被测物质吸收光谱中的吸收峰处，特别是在
max处，可以提高测定灵敏度并减少测定误差。
被测物如有几个吸收峰，可选不易有其它物质
干扰的，较高的吸收峰。
10．说明双波长消去法的原理和优点。
怎样选择1和2？
原理：
a与b两种物质的吸收光谱完全重叠，欲消除b组分的干扰直接测定a组分。
首先要
选择采用两个测定波长λ1和λ2，测出在两波长处的吸光度，依据吸光度的加和性列式，
然后计算混合物在两个波长λ1和λ2处的总吸光度的差值△A来求算出待测组分a的含量。
优点：
该方法测混合物时，可不经分离直接测定待测组分。
选择两个测定波长的原则
1）使干扰组分（待消除组分）在这两个波长具有相同的吸光度A1b、A2b；
2）使待测组分a这两个波长ΔAa足够大。
11．说明导数光谱的特点。
（1）导数光谱的零阶光谱极小和极大交替出现，有助于对吸收曲线峰值的精确测定。
（2）零阶光谱上的拐点，在奇数阶导数中产生极值，在偶数阶导数中通过零。
这对肩峰的
鉴别和分离很有帮助。
（3）随着导数阶数增加，极值数目增加（极值＝导数阶数十1），谱带宽度变小，分辨能力
增高，可分离和检测两个或者以上重叠的谱带。
（4）分子光谱中。
往往由于相邻吸收带的重叠．使吸收曲线产生峰位移动，峰形不对称。
出现肩峰等现象、可因相邻吸收带的强弱差别不同，相隔距离远近以及相重叠的部分多少而
变化，这冲变化，有时在吸收光谱曲线上的表现可以是很微弱而不易辨别的。
而在导数图上
则有明显的表现。
12．以有机化合物的官能团说明各种类型的吸收带，并指出各吸收带在紫外－可见吸收光谱
中的大概位置和各吸收带的特征。
（1）R带：
由含杂原子的不饱和基团的n→π*跃迁产生，如C＝O；C＝N；—N＝N—，其
λ200~400nm，强度较弱ε<100。
（2）K带：
由共轭双键的π→π*跃迁产生，如（—CH＝CH—）n，—CH＝C—CO—，其λ>200nm，
ε>10
4。
（3）B带：
苯环本身振动及闭合环状共轭双键π-π*跃迁而产生的吸收带，是芳香族化合物
的主要特征吸收带，其λ256nm，宽带，具有精细结构；ε~200。
（4）E带：
由苯环环形共轭系统的π→π*跃迁产生，也是芳香族化合物的特征吸收带其中
E1带180nm，εmax>102带200nm，εmax=7000。
4（常观察不到），E
（5）电荷转移吸收带：
有电子给予体和电子接受体的有机或无机化合物电荷转移跃迁。
其
4
λ范围宽，＞10
。
（6）配位体场吸收带：
配合物中心离子d-d或f-f跃迁产生。
可延伸至可见光区，＜10
2。
13．卡巴克洛的摩尔质量为236，将其配成每100ml含0.4962mg的溶液，盛于1cm吸收池中，
在max为355nm处测得A值为0.557，试求其
E及值。
（
1%
1cm
4）
E1%=1123，=2.6510
1cm
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A
1%
ECl
1cm
1%
E
1cm
A
Cl
1.557
0.496210
3
1
1123
M
10
1%
E
1cm
236
10
11232.6510
4
14．称取维生素C0.05g溶于100ml的0.005mol/L硫酸溶液中，再准确量取此溶液2.00ml
稀释至100ml，取此溶液于1cm吸收池中，在max245nm处测得A值为0.551，求试样中维生
素C的百分含量。
（E1%245nm=560）（98.39%）
1cm
C
x
0.500
100
2.10.00100（g/100ml）
A
s
1%
ECl
1cms
s
5600.0010010.560
样
C
x
C
s
100%
A
x
A
s
100%
0.557
0.560
100
15．某试液用2.0cm的吸收池测量时T=60%，若用1.0cm、3.0cm和4.0cm吸收池测定时，透光率各是多少？
（T2=77.46%，T3=46.48%，T
4=36.00%）
由公式AlgTECl
l2.0cm,EC
lg
l
T
lg0.60
2.0
0.1109
l1.0cm,lg
T0.11091
1
0.1109
T
1
77.5%
l3.0cm,
lgT0.11093
3
0.3327
T
1
46.5%
l4.0cm,lg
T0.11094
1
0.4436
T
4
36.0%
3+
16．有一标准Fe溶液，浓度为6g/ml，其吸光度为0.304，而试样溶液在同一条件下测得
3+的含量（mg/L）。
（10.07g/ml）
吸光度为0.510，求试样溶液中Fe
A
样
1%
ECl
1cm
样
C
样
A
标
1%
ECl
1cm
标
C
标
C
样
AC
样标
A
标
1.510
6.1
0.304
10.1g/ml10.1（mg/L）
17．将2.481mg的某碱（BOH）的苦味酸（HA）盐溶于100ml乙醇中，在1cm的吸收池中测得其
380nm处吸光度为0.598，已知苦味酸的摩尔质量为229，求该碱的摩尔质量。
（已知其摩尔
吸光系数为210
4）（M=619）
BOHHABAH
O
2
1%
E
1cm
M
10
2.00
4
10
1.598
2.48110
3
1
229
1
10
B
B602
MBOH60217619
18．有一化合物在醇溶液中的max为240nm，其为1.710
4，摩尔质量为314.47。
试问配制
什么样浓度（g/100ml）测定含量最为合适。
（3.7010
41.48103，最佳8.03104）
吸光度在0.2~0.7之间时为分光光度法的最适宜范围。
设l=1cm
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1%
E
1cm
10
M
2.
4
10
10
0.4963
541
A
1%
ECl
1cm
C
A
1%
E
1cm
l
下限C
1
0.501
541
1
4
2.210（g/100ml）
上限C
2
0.558
541
1
4
0.56110（g/100ml）
44
故最适宜浓度范围为:
3.710~1.310g/100ml
+与配合剂X形成配合物MX，其它种类配合物的形成可以忽略，在350nm处
19．金属离子M
+和0.200mol/LMX有强烈吸收，溶液中其它物质的吸收可以忽略不计。
包含0.000500mol/LM
+
X的溶液，在350nm和1cm比色皿中，测得吸光度为0.800；另一溶液由0.000500mol/LM
+均转化和0.0250mol/LX组成，在同样条件下测得吸光度为0.640。
设前一种溶液中所有M
为配合物，而在第二种溶液种并不如此，试计算MX的稳定常数。
（K稳=163）
ACl
A
1
C
1
l
0.1110
0.1110
1
1600
C
2
A
2
l
77.6640
16001
0.3328
K
稳
[
MX]
][X
[M
]（0.000500
0.4437
2.）（0.0250
6.2）
0.305
20．K2CrO4的碱性溶液在372nm有最大吸收。
已知浓度为3.0010
5mol/L的K2CrO4碱性溶液，
2CrO4碱性溶液，
于1cm吸收池中，在372nm处测得T=71.6%。
求（a）该溶液吸光度；（b）K2CrO4溶液的max；
（c）当吸收池为3cm时该溶液的T%。
（A=0.145，max=4833，T=36.73%）
AlgTlg0.7160.145
max
A
Cl
0.145
3.0010
5
1
4833
5
Cl48333.00103
T101036.7%
21．精密称取VB12对照品20mg，加水准确稀释至1000ml，将此溶液置厚度为1cm的吸收池中，
在＝361nm处测得其吸收值为0.414，另有两个试样，一为VB12的原料药，精密称取20mg，加水准确稀释至1000ml，同样在l=1cm，＝361nm处测得其吸光度为0.400。
一为VB
12注射
液，精密吸取1.00ml，稀释至10.00ml，同样测得其吸光度为0.518。
试分别计算VB12原料
药及注射液的含量。
（原料药=96.62%，注射液含量＝0.250mg/ml）
1%
E
1cm
A
对
Cl
0.414
3
10
11.
1000
1001
207
原料药
A
1%
El
1cm
3.0
1000
100
3
10
100%
2.400
10
2071
3
3.10
100%
96.6%
标示量
注射液
A
1%
El
1cm
3
10
1
10
1.518
2071
3
10
0.10.250mg/ml
22．有一A和B两化合物混合溶液，已知A在波长282nm和238nm处的吸光系数1%
E值分别
1cm
为720和270；而B在上述两波长处吸光度相等。
现把A和B混合液盛于1.0cm吸收池中，
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测得max282nm处的吸光度为0.442；在max238nm处的吸光度为0.278，求A化合物的浓度
（mg/100ml）。
（0.364mg/100ml）
ab
A
282nm
a
A
282nm
b
A
282nm
3.
ab
A
238nm
a
A
238nm
b
A
238nm
0.4964278
两式相减
ab
A
282nm
ab
A
238nm
a
A
282nm
a
A
238
nm
（
a
E
282
nm
a
E
238nm
）Cl
a
0.5020.278（720
270）C
a
C
a
2.3g/100ml0.364mg/100ml
23．配制某弱酸的HCl0.5mol/L、NaOH0.5mol/L和邻苯二甲酸氢钾缓冲液（pH=4.00）的三种溶液，其浓度均为含该弱酸0.001g/100ml。
在max=590nm处分别测出其吸光度如表。
求
该弱酸pKa。
（pKa=4.14）
pHA（max590nm）主要存在形式
40.430[HIn]与[In]
碱1.024[In]
酸0.002[HIn]
HInHIn
K
a
[H
[
][
In
]
HIn
]
pK
a
pH
lg
[HIn
[In
]
]
在pH4的缓冲溶液中[HIn]和[In]共存，则该弱酸在各溶液中的CC,
分析浓度为，
Hin
In
即0.001g/100ml
缓冲液中
：
A
混
0.559ECE
HInHIn
In
C
In
碱性溶液中
：
A1.024
In
E（CC
HIn
In
In
）
酸性溶液中
：
A0.002
HIn
E（CC
HInHIn
In
）
后两式代入第一式
0.562
（C
0.1111
HIn
C
In
）
C
HIn
0.4965024
（C
HIn
C
In
）
C
In
C
HIn
C
In
0.1111pKpHlg
a
[
[
HIn
]
In]
4
lg1.3879
77.714
24．有一浓度为2.0010
-3mol/L的有色溶液，在一定波长处，于0.5cm的吸收池中测得其吸
收度为0.300，如果在同一吸收波长处，于同样的吸收池中测得该物质的另一溶液的百分透
光率为20%，则此溶液的浓度为多少？
（4.6610
3mol/L）
AlgTECl
A
1
C
1
lg
T
2
C
2
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