浙江农林大学微生物学真题Word文档格式.docx

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4．肽聚糖物质存在于___________中。

A．真核生物的核糖体B．细菌的细胞壁C．真核生物的染色体D．细菌的细胞膜

5．以下没有细胞壁的微生物是___________

A．放线菌B．酵母菌C．支原体D．衣原体

6．以铵盐作营养，合成氨基酸、蛋白质和核酸等有机含氮物的作用，称为___________

A．铵盐同化作用B．硝化作用C．氨化作用D．反硝化作用

7．以下微生物中，不属于原核微生物的是___________

A．真细菌B．蓝细菌C．衣原体D．显微藻类

8．有丝分裂过程发生___________

A．只在细菌中B．在病毒和细菌中C．在真核生物中

9．微生物的稳定生长期，___________

A．细胞分裂速率增加B．群体处于最旺盛时期C．菌体产量达最高点D．细胞分裂速率最大

10．原核生物细胞DNA发现于___________

A．细胞膜和高尔基体B．染色体和质粒C．鞭毛和菌毛D．细胞壁和细胞膜

11．青霉素族抗生素主要用于抗___________

A．病毒B．真菌C．革兰氏阴性菌D．革兰氏阳性菌

12．所有下列特征皆适合酵母菌细胞，除了___________

A．它们不形成菌丝B．它们是典型的卵圆形细胞

C．它们只能用显微镜才能看见D．它们是多细胞的真菌

13．发生在土壤中的氨化过程的主要产物是___________

A．尿素B．氨基酸C．蛋白质D．氨

14．BOD是用来表示___________。

A．废水的污染程度B．土壤的过滤能力

C．100mL水样中的细菌数D．生态系统中的生物群类型

15．病毒的基因组可以由___________

A．DNA但无RNAB．RNA但无DNA

C．同一个病毒中既有DNA又有RNAD．DNA或RNA

16．一种微生物致病力程度的强弱以它的___________来表示。

A．毒血症B．中毒C．特有的潜力D．毒力

三、填空题（每空格1．5分，共24分）

1．影响微生物生长的环境因素主要是温度、pH值和⑴。

2．微生物学发展史可分为5个时期，分别为史前期、初创期、⑵、发展期和⑶。

3．根据生长因子的不同，可以把微生物分为⑷和⑸两种营养类型。

4．微生物的营养要素有6类，分别是碳源、氮源、⑹、⑺、生长因子和水。

5．只在低浓度（1-15mgC/L）的有机质的培养基上就可正常生长的细菌称为⑻细菌。

6．沼气发酵可以分成⑼、产酸阶段与⑽三个阶段。

7．原核生物与真核生物的细胞膜含有两层平行排列的⑾。

8．分类地位属于真核生物的有⑿、藻类和⒀。

9．煮沸法是一种抑制微生物的方法，但细菌的⒁能在煮沸的水中存活2小时以上。

10．细菌的芽孢用于抵御外界不良环境，而真菌的孢子则用于⒂。

11．真菌中形成繁殖结构的那些菌丝叫作⒃。

四、问答题（共62分）

1．酵母菌的生活史可以分为哪3类，各自的代表微生物是什么？

（6分）

2．什么叫延滞期，出现的原因有哪些？

（7分）

3．微生物产生抗药性的原因有哪些？

（5分）

4．试述革兰氏染色的操作过程，并解释其结果。

（15分）

5．什么叫水体富营养化，它是如何产生的，有什么危害？

（12分）

6．什么是鉴别培养基，试以EMB培养基为例，分析其作用原理。

（8分）

7．试述现代微生物学的特点及其发展趋势。

（9分）

参考答案

1．主动运送：

指一类需提供能量并通过细胞膜上特异性载体蛋白构象的变化，而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种营养物质进入细胞的运送方式。

2．朊病毒：

又叫蛋白侵染子，是一类不含核酸的传染性蛋白质分子，因能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构相变化，从而可使宿主致病。

3．“拴菌”试验：

设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应的抗体牢固地“拴”在载玻片上，然后在光镜下观察该细菌，结果发现，该菌只能在载玻片上不断打转而未作伸缩“挥动”，因而肯定了旋转论的正确性。

4．发酵：

指在无氧等外源氢受体的条件下，底物脱氢后所产生的还原力未经呼吸链传递而直接交某一内源性中间代谢物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。

5．氧化磷酸化：

又称电子传递链磷酸化，是指呼吸链的递氢（或电子）和受氢过程与磷酸化反应相“偶联”并产生ATP的作用。

6．抗抗体：

抗抗体既具有抗体功能也可作抗原去刺激异种生物产生相应的抗体。

7．操纵基因：

是位于启动基因和结构基因之间的一段核苷酸序列，它与结构基因紧密连锁在一起，能通过与阻遏物的结合与否，控制结构基因是否转录。

8．自然免疫：

凡在生物长期进化过程中形成，属于先天即有、相对稳定、无特殊针对性的对付病原体的天然抵抗能力，称为自然免疫，也叫非特异性免疫或先天免疫。

9．羧酶体：

又称羧化体，是存在于一些自养细菌细胞内的多角形或六角形内含物，大小与噬菌体相仿，内含1，5二磷酸核酮糖羧化酶，在自养细菌的CO2固定中起重要作用。

10．微生态制剂：

是根据微生态学理论而制成的含有有益菌的活菌制剂，其功能在于维持宿主的微生态平衡、调整宿主的微生态失调并兼有其他保健功能。

二、选择题（以下各题均只有一个正确答案，请将其选出填入括号内，每小题1．5分，共24分）

1．B；

2．C；

3．B；

4．B；

5．C；

6．A；

7．D；

8．C；

9．

C；

10．B；

11．D；

12．D；

13．D；

14．A；

15．D；

16．D

1．氧气

2．奠基期成熟期

3．原养型（或野生型）营养缺陷型

4．能源无机盐

5．贫营养

6．水解阶段产气阶段

7．磷脂

8．真菌原生动物。

9．芽孢

10．繁殖

11．气生菌丝

答：

（1）营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在，酿酒酵母是这类生活史的代表。

（2）营养体只能以单倍体形式存在，代表微生物是八孢裂殖酵母。

（3）营养体只能以二倍体形式存在，这一类型生活史的代表微生物是路德类酵母。

（每个类型与代表微生物均为1分）

延滞期：

又叫停滞期、调整期或适应期，指少量单细胞微生物接种到新鲜培养液中后，

在开始培养的一段时间内，因代谢系统适应新环境的需要，细胞数目没有增加的一段时期。

（4分）

出现延滞期的原因，是由于接种到新鲜培养液的种子细胞中，一时还缺乏分解或催化有关底物的酶或辅酶，或是缺乏充足的中间代谢物。

为产生诱导酶或合成有关的中间代谢物，就需要有一段用于适应的时期，这就是延滞期。

（3分）

（1）产生一种能使药物失去活性的酶。

（2）把药物作用的靶位加以修饰和改变。

（3）形成“救护”途径，即通过被药物阻断的代谢途径发生变异，而变为仍能合成原来产物的新途径。

（4）使药物不能透过细胞膜，包括通过酶的作用把药物改变成易外渗的衍生物，把药物变成不能进入细胞的衍生物，或改变细胞膜的透性以阻止药物透入等。

（5）通过主动外排系统把进入细胞内的药物泵出细胞外。

（每点1分）

革兰氏染色的操作过程为:

（1）涂片

取洁净的载玻片一张，将其在火焰上微微加热，除去上面的油脂，冷却，在中央部位滴加一小滴无菌水，用接种环在火焰旁从斜面上挑取少量需要染色的菌与水混合。

烧去环上多余的菌体后，再用接种环将菌体涂成直径约1cm的均匀薄层。

（2）干燥

涂布后，待其自然干燥。

（3）固定

将已干燥的涂片标本向上，在微火上通过3~4次进行固定。

（4）染色

在涂片处滴加草酸铵结晶紫溶液1~2滴，使其布满涂菌部分，保持1min。

（5）冲洗

斜置斜面，倾去染液。

用水轻轻冲去染液至流水变清。

注意水流不得直接冲在涂菌处，以免将菌体冲掉。

（6）媒染

滴加碘液冲去残水，并用碘液覆盖涂菌处1min，用水冲洗。

（7）乙醇脱色

斜置载玻片于一烧杯上，滴加95%乙醇，并轻轻摇动载玻片，至乙醇液不呈现紫色时停止，立即用水冲净乙醇并滤纸轻轻吸干。

（8）复染

用番红染液复染1min，水洗。

（9）吸干

用滤纸轻轻吸去载玻片上的水分。

（10）镜检

将经染色的标本，先用低倍镜找到目的物，再用油镜进行观察。

结果G+细菌被染成紫色而G—细菌呈现红色。

这是因为G+细菌细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故用脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，所以用乙醇处理时不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在细胞壁内，使其保持紫色。

反之，G—细菌因其细胞壁较薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞褪成无色，这时，再经过沙黄等红色染料的复染，就使G—细菌呈现红色。

水体富营养化是指水体中因氮、磷等元素含量过高而引起水体表层的蓝细菌和藻类过度生长繁殖的现象。

这时，下层水体不但因缺光而少氧，而且大量死藻因细菌的水解而进一步造成了厌氧和有毒的环境。

在施用过量磷肥的土壤中，会因雨水的冲刷而使磷元素随水流至江、河、湖、海中，在城镇居民中，大量使用含磷洗涤剂也会使周边地区水体磷元素超标。

当水体中的可溶性磷酸盐的浓度过高时，会造成水体富营养化。

这时如氮素营养适宜，就促使蓝细菌、绿藻和原生动物等大量繁殖，并由此引起湖水中的“水华”或海水中的“赤潮”大面积的环境污染事故。

“水华”指发生在淡水水体中的水体富营养化现象，其特点是，在温暖的季节，当水体中的氮磷比例达15-20比1时，水中的蓝细菌与浮游藻类突然快速繁殖，从而使水面形成了一层蓝绿色的藻类与泡沫，其中许多种类均产毒素。

而“赤潮”指发生在河口、港湾或浅水等咸水区水体的富营养化现象。

近年来，我国沿海赤潮十分频繁，赤潮生物多达260余种，包括蓝细菌、藻类和原生动物，已知其中70余种产毒，因此对渔业、养殖业危害极大，并对海狮等海洋哺乳动物的生存构成了严重的威胁。

水华和赤潮等大面积水体污染一旦发生，就很难治理，只能设法通过严格制定和执行环保法规和强化一系列有关预防措施才能根本消除。

6、什么是鉴别培养基，试以EMB培养基为例，分析其作用原理。

鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。

EMB培养基即伊红美兰乳糖培养基，用于饮用水、牛奶等食品中大肠菌群的检测。

其作用原理是培养基中的伊红和美兰两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和有些难培养的革兰氏阴性细菌。

在低酸度下，这两种染料会结合并形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。

因此，试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基平板上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落。

尤其是大肠杆菌，因其能强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体表面带有H+，故可染上染料，使菌落呈现深紫色，且从菌落表面的反射光中还可以看到绿色金属光泽。

而肠杆菌属、克雷伯氏属等肠道菌的菌落则因产酸力较弱而呈现棕色。

变形杆菌属、沙门氏菌属和志贺氏菌等致病菌因为不发酵乳糖、不产酸，菌体不易与染料结合，所以菌落呈现无色透明。

（1）研究方向向着纵深方向和分子水平发展。

20世纪后期，由于分子生物学的飞速发展，使整个生命科学都推进到分子水平上来。

自从1990年代以来，由于人类基因组计划的巨大推动力，更促进了微生物基因组学、微生物分子进化学、微生物蛋白质组学等的形成与发展。

（2）基础研究不断深入，一批新学科、潜学科正在形成。

包括厌氧菌生物学、嗜极菌生物学、古生菌学和固氮遗传学等。

（3）学科间的渗透、交叉和融合，形成了新的边缘学科。

在学科的发展中，各学科的相互渗透、交叉和融合，往往起着生长点的作用，这种学科间的互补、杂交或加成作用，不但产生了一系列的新概念、新理论和新技术，而且还会形成一系列具有旺盛生命力的新的边缘学科或交叉学科。

在微生物学领域中，应有意识地发展“Microbio-X”学科（X泛指数学、物理学、化学、工程数学和信息科学等学科）。

（4）新技术、新方法在微生物学发展中的广泛应用

现代科学技术的发展，为微生物学的研究提供了无比优越的客观条件，例如：

现代电子显微技术、电泳技术、PCR技术、微生物的快速鉴定技术等，已把微生物学的研究从原来的以静态、描述、定性为主的研究，逐步提高到以动态、定量、定序、定位和定立体构相等全新的研究水平上。

（5）向着复合生态系统和宏观范围拓宽

微生物学除了向纵深方向研究微生物生命活动规律外，还有向宏观的、各种复合生态系统发展的趋向，例如，资源微生物学、热带真菌学、人体微生态学等。

（6）一大批应用性高技术微生物学分科正在孕育和形成

微生物学是一门高度扎根于生产实践的学科。

当代应用微生物学所包括的分支学科越来越多，它们具有三大特点，①交叉性强：

例如微生物进化工程学、细菌冶金学、生物工业等。

②自觉度高：

当前，在分子生物学理论和实践的带动下，很多应用性生物学科都在朝着目的性强、自觉度高、可控性强和功效高的方向发展，一批标以“工程”名称的学科正在茁壮成长，例如微生物的基因工程、代谢途径工程和抗体工程等。

③覆盖面广：

从大的方向来看，微生物学的应用领域包括工业、农业、医药、环保和国防等领域，同时也有许多相应的应用性分支学科，例如微生物生物防治学、动物微生态学、药用真菌学和人畜共患病原微生物学等。

（每点1．5分）