微生物实验培养基配方.docx
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微生物实验培养基配方
微生物学实验常用培养基的配制
1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）
牛肉膏
3g
蛋白胨
5g
氯化钠
10g
琼脂
15~20g
pH
7.0~7.2
水
1000mL
121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）
可溶性淀粉
20g
硝酸钾
1g
氯化钠
0.5g
磷酸氢二钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
琼
脂
20g
水
1000mL
pH
7.2～7.4
在火上加热，边
配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，
搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）
硝酸钠
2g
磷酸氢二钾
1g
氯化钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
蔗糖
30g
琼脂
15~20g
水
1000mL
pH
自然
121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）
葡萄糖
10g
蛋白胨
5g
磷酸二氢钾
1g
七水合硫酸镁
0.5g
1/3000孟加拉红
（rosebengal，玫瑰红水溶液）
100mL
琼脂
15—20g
pH
自然
蒸馏水
800mL
112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）
马铃薯
200g
蔗糖（或葡萄糖）
20g
琼脂
15—20g
pH
自然
培养基的配制：
马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼
脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基
培养基的配制：
（1）、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上
面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
（2）、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程
度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
（3）、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
（4）、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）
甘露醇（或葡萄糖）
10g
磷酸二氢钾
0.2g
七水合硫酸镁
0.2g
氯化钠
0.2g
二水合硫酸钙
0.2g
碳酸钙
5g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0—7.2
113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基
肉膏蛋白胨液体培养基
100mL
琼脂
0.35—0.4g
pH
7.6
121℃灭菌20min。
9、合成培养基
偏磷酸铵
1g
氯化钾
0.2g
七水合硫酸镁
0.2g
豆芽汁
10mL
琼脂
20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0
121℃
加12mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基
黄豆芽
100g
蔗糖（或葡萄糖）
50g
水
1000mL
pH
自然
培养基的配制：
称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
121℃灭菌20min。
11、油脂培养基
蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
氯化钠
5g
香油或花生油
10g
1.6%中性红水溶液
1mL
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.2
121℃灭菌20min注：
（1）、不能使用变质油。
（2）、油和琼脂及水先加热。
（3）、调好pH值后，再加入中性红。
（4）、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。
12、淀粉培养基
蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
氯化钠
5g
可溶性淀粉
2g
蒸馏水
1000mL
琼脂
15—20g
121℃灭菌20min
13、明胶培养基
牛肉膏蛋白胨液
100mL
明胶
12—18g
pH
7.6
在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。
溶化后调pH7.2—7.4。
121℃灭菌30min。
14、蛋白胨水培养基
蛋白胨
10g
氯化钠
5g
蒸馏水
1000mL
pH
7.6
121℃灭菌20min。
15、糖发酵培养基
蛋白胨水培养基
1000mL
1.6%溴钾酚紫乙醇溶液
1—2mL
pH
7.6
另配制20%糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10mL。
培养基的配制：
（1）、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH7.6）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（Durhamtube），使之充满培养液。
（2）、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121℃灭
菌20min；糖溶液112℃灭菌30min。
（3）、灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL（按每10mL培
养基中加入20%的糖液0.5mL，则成1%的浓度）。
配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。
16、葡萄糖蛋白胨水培养基
蛋白胨
5g
葡糖糖
5g
磷酸氢二钾
2g
蒸馏水
1000mL
17、麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌）
葡萄糖
1g
氯化钾
1.8g
酵母浸膏
2.5g
醋酸钠
8.2g
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
113℃灭菌20min。
18、柠檬酸盐培养基
磷酸二氢铵
1g
磷酸氢二钾
1g
氯化钠
5g
硫酸镁
0.2g
柠檬酸钠
2g
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
1%溴麝香草酚蓝乙醇液
10mL
培养基的配制：
将上述各成分加热溶解后，调pH6.8，然后加入指示剂，摇匀，
用脱脂棉过滤。
制成后为黄绿色，分装试管，121℃灭菌20min后制成斜面，注意配制时控制好pH，不要过碱，以黄绿色为准。
19、醋酸铅培养基
pH7.4的牛肉膏蛋白
胨琼脂
100mL
硫代硫酸钠
0.25g
10%醋酸铅水溶液
1mL
培养基的配制：
将牛肉膏蛋白胨琼脂100mL加热溶解，待冷却至60℃时加入硫
代硫酸钠0.25g，调至pH7.2，分装于三角瓶中，115℃灭菌15min。
取出后待冷却至55—60℃，加入10%醋酸铅水溶液（无菌的）1mL，混匀后倒入灭菌试管或平板中。
20、血琼脂培养基
pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂
100mL
脱纤维羊血（或兔血）
10mL
培养基的配制：
将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至50℃时，加入无菌脱
纤维羊血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。
37℃过夜检查无菌生长即可使用。
21、玉米粉蔗糖培养基
60g
玉米粉
磷酸二氢钾
3g
维生素B1
100mg
蔗糖
10g
七水合硫酸镁
1.5g
水
1000mL
121℃灭菌30min，维生素B1单独灭菌15min后另加。
22、酵母膏麦芽汁琼脂
麦芽粉
3g
酵母浸膏
0.1g
水
1000mL
121℃灭菌30min。
24、棉籽壳培养基
培养基的配制：
棉籽壳50%，石灰粉1%，过磷酸钙1%，水65%—70%，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。
25、复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）
蛋白胨
10g
乳糖
10g
磷酸氢二钾
3.5g
琼脂
20—30g
蒸馏水
1000mL
5%碱性复红乙醇溶液
20mL
培养基的配制：
先将琼脂加入900mL蒸馏水中，加热溶解，再加入磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000mL，调pH至7.2—7.4。
加入乳糖，混匀溶解后，115℃灭菌20min。
称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min后。
立刻滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。
将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中，充分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过2周。
26、伊红美蓝培养基（EMB培养基）
蛋白胨水培养基
100mL
20%乳糖溶液
2mL
2%伊红水溶液
2mL
0.5%美蓝水溶液
1mL
培养基的配制：
将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。
摇匀后，立即倒平板。
乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。
27、乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查”用）
蛋白胨
10g
牛肉膏
3g
乳糖
5g
氯化钠
5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液
1mL
蒸馏水
1000mL
培养基的配制：
将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调pH至7.2—7.4。
加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。
115℃灭菌20min。
28、石蕊牛奶培养基
牛奶粉
100g
石蕊
0.075g
水
1000mL
pH
6.8
121℃灭菌
15min。
29、LB（Luria-Bertani
）培养基
蛋白胨
10g
酵母膏
5g
氯化钠
10g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0
121℃灭菌20min。
磷酸氢二钾
10.5g
磷酸二氢钾
4.5
硫酸铵
1g
二水合柠檬酸钠
0.5g
蒸馏水
1000mL
121℃灭菌20min。
需要时灭菌后加入：
糖（20%）
10mL
维生素B1（硫胺素）（1%）
0.5mL
七水合硫酸镁（20%）
1mL
链霉素（50mg/mL）4mL，终浓度200μg/mL
氨基酸（10mg/mL）4mL，终浓度40μg/mL
pH自然（—7.0）
31、庖肉培养基
培养基的配制：
（1）、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方块，置1000mL蒸馏水中，以弱火煮1小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保留备用。
将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。
（2）、将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000mL，加入蛋白胨20g，葡萄糖
2g，氯化钠5g，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。
（3）、取上层溶液测量pH，并调整其达到8.0，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度，121℃灭菌15min后补足蒸发的水分，重新调整pH值8.0，再煮沸10—20min，补足水量后调整pH7.4。
（4）、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的1/4左右。
经121℃灭菌15min后备用，如当日不用，应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林，以隔绝氧气。
32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基
乳糖
5g
牛肉膏
5g
酵母膏
5g
蛋白胨
10g
葡萄糖
10g
氯化钠
5g
琼脂粉
15g
pH
6.8
水
1000mL
33、马铃薯牛乳培养基
培养基的配制：
200g马铃薯（去皮）煮出汁，脱脂鲜乳100mL，酵母膏5g，琼
脂粉15g，加水1000mLpH7.0。
制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混合。
34、尿素琼脂培养基
尿素
20g
琼脂
15g
氯化钠
5g
磷酸二氢钾
2g
蛋白胨
1g
酚红
0.012g
蒸馏水
1000mL
pH
6.8±0.2
培养基的配制：
在蒸馏水或去离子水100mL中，加入上述所有成分（除琼脂外）。
混合均匀。
过滤灭菌。
将琼脂加入900mL蒸馏水或去离子水中，加热煮沸腾。
在15磅121℃灭菌
15min。
冷却至50℃，加入灭菌好的基本培养基，混匀后，分装于灭菌的试管中，放在倾斜位置上使其凝固。
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