高三生物实验一轮复习讲义Word文件下载.docx
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（3）在盖玻片一侧滴一滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸，重复几次，让洋葱表皮浸润在蔗糖溶液中。
（4）低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化（变小），观察细胞是否发生质壁分离。
（5）在盖玻片一侧滴一滴清水，另一侧用吸水纸吸，重复几次，让洋葱表皮浸润在清水中。
（6）低倍镜下观察原生质层位置、细胞大小变化（变大），观察是否质壁分离复原。
4、实验结果：
细胞液浓度＜外界溶液浓度细胞失水（质壁分离）
细胞液浓度＞外界溶液浓度细胞吸水（质壁分离复原）。
渗透作用发生的条件：
半透膜、膜两侧的浓度差。
（书P60图）
实验注意事项：
1、为什么选用洋葱鳞片叶外表皮细胞作为实验材料？
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞具有成熟的紫色大液泡，实验现象明显且易于观察
2、用根尖分生区细胞可以做质壁分离及其复原实验吗？
为什么？
不能，因为根尖分生区细胞没有成熟的大液泡，没有明显的质壁分离现象。
3、哪些细胞适合做质壁分离及其复原实验？
成熟的、活的植物细胞具有大液泡，液泡中有色素，便于观察。
4、若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么？
细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长）
质壁分离实验的拓展应用：
1、判断细胞的死活：
将待测细胞置于蔗糖溶液中进行镜检，如果发生质壁分离和复原，则是活细胞；
如果不发生质壁分离，则是死细胞。
2、测定细胞液浓度的范围：
将待测细胞置于一系列浓度梯度的蔗糖溶液中并分别进行镜检，则细胞浓度介于未发生质壁分离和刚刚发生质壁分离的蔗糖溶液的浓度之间。
3、比较不同植物细胞的细胞液浓度：
将不同植物置于同一浓度的蔗糖溶液中进行镜检，根据对刚刚发生质壁分离所需的时间的比较，判断细胞液浓度（即时间越短，细胞液浓度越小）
4、比较一系列溶液的浓度的大小：
将同一植物的相同成熟植物置于未知浓度的溶液中进行镜检，记录刚刚发生质壁分离所需时间并比较所用时间的长短，判断溶液浓度的大小（时间越短，未知溶液的浓度越大）
5、鉴别不同浓度的溶液（如KNO3和蔗糖溶液）：
将成熟相同植物细胞置于不同种类溶液进行镜检，如果只发生质壁分离，说明是溶质不能通过半透膜的溶液（如蔗糖）；
如果发生质壁分离后又自动复原，则说明是溶质能通过半透膜的溶液（KNO3）。
观察细胞的有丝分裂
1、实验原理
（1）高等植物体内，有丝分裂常见根尖、茎尖等分生区细胞。
各个细胞的分裂是独立的。
通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体（染色质）的存在状态，判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期（间期、前期、中期、后期和末期）。
（2）碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能将染色体（或染色质）染成深色。
2、材料用具
（1）洋葱（或大蒜）根尖
（2）显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、剪刀、镊子、滴管等
（3）解离液：
质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液（1:
1）
（4）质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）
3、实验过程
（1）洋葱根尖的培养：
实验前3-4天培养洋葱，待根长到5cm
（2）装片制作
制作流程：
解离——漂洗——染色——制片
过程
方法
时间
目的
解离
上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2-3mm,，立即放入盛有盐酸和酒精的混合液（1:
1）的玻璃皿中，在室温下解离
3——5分钟
用药液使组织中的细胞相互分离开来
漂洗
待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗
约10分钟
洗去解离液，便于染色
染色
把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml获0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）中的玻璃皿中染色
龙胆紫溶液或醋酸洋红液能使染色体着色
制片
用镊子将这段根尖取出来，放在载坡片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。
然后，用拇指轻轻按压载玻片。
使细胞分散开来，有利于观察
4、观察
（1）先在低倍镜下观察，找到分生区细胞：
细胞呈正方形，排列紧密。
（2）再换成高倍镜仔细观察。
先找到中期细胞，然后找出分裂中期、前期、后期、末期、间期的细胞，观察各时期内染色体形态和分布的特点。
（3）填写记录表。
细胞周期
样本1
样本2
总数
每一时期的细胞数/计数细胞的总数
间期
分
裂
期
前期
中期
后期
末期
计数细胞的总数
*考点提示：
（1）培养根尖时，为何要经常换水？
增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。
（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？
应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。
（3）为何每条根只能用根尖？
取根尖的最佳时间是何时？
为何？
因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；
上午10时到下午2时；
因为此时细胞分裂活跃。
（4）压片时为何要再加一块载玻片？
再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。
（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？
压片时用力过大。
（6）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？
染液浓度过大或染色时间过长。
（7）为何要找分生区？
分生区的特点是什么？
用高倍物镜找分生区吗？
因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；
分生区的特点是：
细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；
不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。
（8）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？
间期；
因为在细胞周期中，间期时间最长。
（9）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？
不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。
（10）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？
不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
（11）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？
没有找到分生区细胞；
没有找到处于分裂期的细胞；
染液过稀；
染色时间过短。
观察细胞的减数分裂
一、实验目的
通过显微镜观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目，比较蝗虫精母细胞减数分裂各个时期的染色体行为。
二、实验材料
蝗虫的精巢。
二、物质分离鉴定类实验：
（1）检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质b
（2）叶绿体色素的提取和分离b
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理
某些化学试剂能使生物组织中的有机物产生特定的颜色反应
鉴定成分
还原糖
脂肪
蛋白质
实验材料
苹果、梨
花生种子
豆浆或蛋清
实验药品
斐林试剂
苏丹Ⅲ染液
双缩脲试剂
0.1g/mLNaOH,
0.05g/mLCuSO4
苏丹Ⅳ染液
0.01g/mLCuSO4
实验现象
砖红色（Cu2O）
橘黄色
紫色
实验步骤
制备样液→斐林试剂
→水浴加热→观察
徒手切片→苏丹Ⅲ染色
→50%酒精去浮色→制作装片→显微镜观察
制备样液→双缩脲A试剂→双缩脲B试剂→振荡→观察
1、还原性糖（葡萄糖、麦芽糖和果糖）与斐林试剂在水浴加热条件下，能够生成砖红色沉淀。
选材：
含还原糖高，白色或近于白色的植物组织。
如：
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果颜色的变化。
斐林试剂：
配制：
0.1g/mL的NaOH溶液+0.05g/mLCuSO4溶液等量混合均匀
使用：
混合后使用，且现配现用，50-60℃水浴加热
2、蛋白质的鉴定：
蛋白质分子中含有很多肽键，在NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。
（1）A液和B液也要分开配制，储存。
鉴定时先加A液后加B液；
（2）CuSO4溶液不能多加；
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
（3）蛋清要先稀释；
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。
3、斐林试剂与双缩脲试剂的区别：
试剂的成分
0.1g/mLNaOH溶液
0.1g/mLNaOH溶液（双缩脲试剂A）
0.05g/mLCuSO4溶液
0.01g/mLCuSO4溶液（双缩脲试剂B）
是否混合
等量混合后再滴加
先加双缩脲试剂A液1mL后加双缩脲试剂B液4滴
是否加热
水浴加热
不加热
4、脂肪的鉴定：
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）染成橘黄色（或红色）。
（在实验中用50%酒精洗去浮色→显微镜观察→橘黄色（或红色）脂肪颗粒）
叶绿体色素的提取和分离
1、原理：
叶绿体中的色素能溶解于有机溶剂（如丙酮、无水乙醇等）。
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；
反之则慢。
2、过程：
（剪碎绿叶→研磨→过滤→画滤液细线→纸层析）
3、结果：
色素在滤纸条上的分布自上而下：
胡萝卜素（橙黄色）最快（溶解度最大）
叶黄素（黄色）
叶绿素a（蓝绿色）最宽（最多）
叶绿素b（黄绿色）最慢（溶解度最小）
胡萝卜素与叶黄素之间距离最大，叶绿素a与叶绿素b之间距离最小。
4、注意：
●无水乙醇的用途是提取（溶解）叶绿体中的色素，
●层析液的的用途是分离叶绿体中的色素；
●石英砂（或二氧化硅）的作用是为了研磨充分，
●碳酸钙的作用是防止研磨时叶绿体中的色素受到破坏；
●选材：
应选取鲜嫩、颜色鲜绿的叶片，以保证含有较多的色素；
●制备滤纸条：
剪去两角，以保证色素在滤纸条上扩散均匀、整齐，便于观察实验结果，否则，会形成弧形色素带；
●画滤液细线：
用力要均匀，快慢要适中。
滤液细线要细、直，且干燥后重复画一两次，使滤液细线既有较多的色素，又使各扩散的起点相同；
●分离色素时，层析液不能没及滤液细线的原因是滤液细线上的色素会溶解到层析液中滤纸条上得不到色素带；
5、色素的位置和功能
叶绿体中的色素存在于叶绿体类囊体薄膜上。
叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光；
胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光的作用。
Mg是构成叶绿素分子必需的元素。
6、色素带颜色较浅的原因可能有哪些？
缺少下面两条色素带的原因？
三、探究类实验：
（1）探究影响酶活性的因素c
（2）探究酵母菌的呼吸方式c
（3）探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用c
（4）探究培养液中酵母菌数量的动态变化c
探究影响酶活性的因素
（一）酶的催化作用和高效性的验证实验分析
（1）2H2O2→2H2O+O2↑
（2）H2O2在常温、高温、过氧化氢酶、Fe3+等不同条件下气泡产生多少或卫生香燃烧剧烈程度不同,了解过氧化氢酶的作用和意义
2、实验设计及现象分析
操作顺序
项目
试管编号
变量
1
2
3
4
一
H2O2溶液
剂量
2ml
无关变量
浓度
3%
二
反应条件
常温
90℃
FeCl3溶液
肝脏研磨液
自变量
2滴
实验结果
气泡多少
不明显
明显
很多
因变量
火焰是否明亮
明亮
复燃
结论
H2O2在四种条件下分解速率不同，在酶的条件下分解最快
说明
对照实验
对照组
实验组
1、肝脏如果不新鲜，效果不好，因为过氧化氢酶是蛋白质，如果取材过早，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶的数量减少且活性降低，导致3好和4号试管现象相反。
2、实验使用肝脏研磨液，可以加大肝细胞内过氧化氢酶与试管中过氧化氢的接触面积，从而加速过氧化氢的分解。
3、滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。
原因是酶的催化具有高效性，少量酶带入氯化铁溶液中也会影响实验结果的准确性，导致得出错误的结论。
4、由于反应速率快，实验时要特别注意观察比较产生气泡的多少，冒气泡时间的长短，卫生香的燃烧情况。
（二）酶的专一性的验证实验分析
（1）淀粉经酶水解成麦芽糖，蔗糖经酶水解成葡萄糖和果糖，遇斐林试剂生成砖红色沉淀。
（2）用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖后，再用斐林试剂鉴定，根据是否有砖红色沉淀来判断淀粉酶是否对两者都有催化作用，从而探索酶的专一性。
2、实验程序：
序号
试管
注入可溶性淀粉
/
注入蔗糖溶液
注入新鲜淀粉酶溶液
2ml振荡
50℃温水保温
5min
5
加斐试林试剂
1ml振荡
1ml振荡
6
将试管下部放入60℃热水中
2min
7
观察实验结果
淀粉酶只能催化淀粉水解，不能催化蔗糖水解
1、实验前必须检查蔗糖溶液中有无还原性糖。
如果其中混入还原性糖或放置久了被其中的微生物分解也可能产生还原性糖，从而干扰实验结果。
2、制备的可溶性淀粉必须完全冷却后使用，温度过高会降低酶的活性。
（三）温度对酶活性的影响
（1）淀粉经淀粉酶分解为麦芽糖遇碘液无蓝色出现，而淀粉遇碘液出现蓝色
（2）温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。
（如用唾液淀粉酶，适宜温度是37℃）
2、实验程序
第一组试管
第二组试管
第三组试管
1’
2’
3’
注入唾液淀粉酶溶液
1ml
水浴保温5min
0℃
37℃
100℃
将每组淀粉酶溶液注入到对应温度淀粉溶液
水浴温度5min
加碘液
现象
8
酶的催化温度需要适宜的温度，高温、低温都会降低酶的活性
1、本实验不适宜选用斐林试剂，因为斐林试剂与还原性糖只有在水浴加热条件下才有砖红色沉淀生成，而该实验需严格控制不同的温度。
2、本实验不宜选用过氧化氢酶催化H2O2分解，因为过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解也会加快。
（四）PH对酶活性的影响
（2）PH可影响酶的活性，从而影响O2的产生量，据O2产生量的多少可判断PH对酶活性的影响
实验操作
试管1
试管2
试管3
注入等量的过氧化氢酶溶液
注入不同PH的溶液
1ml蒸馏水
1ml盐酸
1mlNaOH
注入等量的H2O2溶液
观察现象
1、本实验也可以将过氧化氢酶和H2O2分别调至同一PH，再混合，以保证反应一开始便达到预设PH。
2、本实验不宜选用淀粉酶催化淀粉水解，因为淀粉酶催化的底物淀粉在酸性条件下也会发生水解反应。
探究酵母菌的呼吸方式
1、过程（见书p69）
（1）配制酵母菌培养液：
20克新鲜食用酵母菌+240ml质量分数为5%的葡萄糖溶液
（2）检测CO2的产生，装置如图所示：
NaOH溶液的作用：
澄清石灰水的作用：
B瓶应封口放置一段时间后，待酵母菌将B瓶中的氧气消耗完，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶，确保是无氧呼吸产生的CO2通入澄清石灰水。
产物的鉴定：
A酒精的鉴定：
色的重铬酸钾溶液遇酒精变成色；
应用：
BCO2的鉴定：
使变浑浊，浑浊程度越大，CO2越；
使溴麝香草酚兰水溶液由变再变。
变色越快，CO2越。
2、结论：
酵母能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸。
四、模拟调查类：
（1）通过模拟实验探究膜的透性b
（2）模拟尿糖的检测a
（3）调查常见的人类遗传病b
（4）调查当地生态环境中的需要问题，提出保护建议或行动计划b（略）
通过模拟实验探究膜的透性（必修一P60）b
在一个长颈漏斗的漏斗口外密封上一层玻璃纸，往漏斗内注入蔗糖溶液，然后将漏斗浸入盛有清水的烧杯中，使漏斗管内外的液面高度相等。
过一段时间后，漏斗内液面上升。
玻璃纸（又叫赛璐玢）是一种半透膜，水分子可以透过它，而蔗糖分子则不能。
讨论：
1、漏斗管内的液面为什么会升高？
由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量，使得管内液面升高。
2、如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升高吗？
用纱布代替玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不会升高。
3、如果烧杯中不是清水，而是同样浓度的蔗糖溶液，结果会怎样？
半透膜两侧溶液浓度相等时，单位时间内透过半透膜进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出水分子数量，液面不会升高。
模拟尿糖的检测a
1、取样：
正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法：
斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸
（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析：
因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。
调查常见的人类遗传病
一、实验原理
遗传病一般可以分为三大类：
单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病。
二、方法和步骤
步骤
原理
确定
课题
确定一个具体的调查课题
最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病
设计
根据调查课题确定合适的调查方法。
如红绿色盲可进行逐个检查；
较严重遗传病可采取询问或调查等
保证获得的资料准确
实地调查
用适当的方法进行调查，做好记录
记录要准确、全面
整理
资料
对原始资料归类整理
按是否患病、性别、亲缘关系等分类整理
分析
利用所学的知识，科学推理，分析遗传病的发病率、遗传方式
遗传方式靠推理
遗传病的发病率=某种遗传病的患病人数/某种遗传病的被调查人数*100%
第二部分：
实验方法与操作
一、实验复习关注的重点
1、渗透作用相关实验
2、光合作用的发现和机理研究系列实验
3、DNA是遗传物质的发现系列实验
4、探究DNA的复制方式实验
5、孟德尔遗传定律的发现、摩尔根伴性遗传的发现
6、生长素的发现系列实验
7、神经调节和激素调节系列实验
8、种群增长方式的探究
9、同位素示踪方法的应用
⑴探究光合作用中氧气中氧的来源；
⑵探究暗反应中C的转移途径、CO2固定的第一个产物；
⑶探究分泌蛋白的合成和分泌途径；
⑷探究DNA的复制方式；
⑸噬菌体侵染大肠杆菌实验；
⑹探究细胞周期；
⑺探究甲状腺激素的负反馈调节。
二、中学生物实验涉及的基本技术归纳
1．光学显微镜的使用
（1）使用低倍镜应注意正确对光和调焦（粗、细准焦螺旋的调节）
（2）高倍镜的使用方法包括：
①低倍镜下找到清晰物像并移至视野中央。
②转动转换器，使高倍物镜正对通光孔。
③调节细准焦螺旋至物像清晰。
2．玻片标本的制作
适用于显微观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成玻片标本。
包括：
（1）压片法（如洋葱根尖细胞的有丝分裂）。
压片的一般过程是：
取材→固定→解离（对不易分散的材料用盐酸处理）→漂洗→染色→压片→观察。
（2）装片法（如高倍镜下观察叶绿体和细胞质的流动）。
其过程是将材料在载玻片水滴中展平→放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生→对材料染色或改变溶液浓度→观察。
3．研磨、过滤
适用于从生物组织中提取物质，如酶、色素等。
4．纸层析技术
适用于溶液中物质的分离，如绿叶中色素的分离。
主要步骤包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离。
5．恒温技术
适用于酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱。
6．解离技术
用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片，如观察有丝分裂时制片的解离过程。
7．比色法：
适用于还原糖、脂肪和蛋白质的检测等
三、教材经典实验分析，方法技能
1．细胞内物质或结构的检测方法
（1）淀粉：
碘液；
（2）还原糖：
斐林试剂；
（3）CO2：
Ca（OH）2溶液或溴麝香草酚蓝水溶液
（4）乳酸：
pH试纸；
（5）O2：
余烬木条复燃；
无O2：
火焰熄灭；
（6）脂肪：
苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液；
（7）蛋白质：
双缩脲试剂；
（8）染色体：
龙胆紫、醋酸洋红溶液；
（9）DNA：
甲基绿；
RNA：
吡罗红；
（10）线粒体：
健那绿；
（11
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