1食品微生物学考试复习题.docx
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1食品微生物学考试复习题
食品微生物学考试复习题
1.微生物学发展中的几个重要人物的贡献。
初创期（1676年——1860）形态学时期代表人物：
列文虎克首次观察并描述微生物的存在。
奠基期（1861——1896）生理学时期代表人物：
巴斯德,建立胚种学说（曲颈瓶试验）；乳酸发酵是微生物推动的；氧气对酒精发酵的影响；用弱化的致病菌防治鸡霍乱。
科赫，建立了科赫法则，证实了病原菌学说，建立微生物学实验方法体系。
发展期（1897－1952）生化、遗传学时期代表人物：
Buchner，开创微生物生化研究；Doudoroff建立普通微生物学。
成熟期（1953－）分子生物学时期（略）
2.什么是微生物？
广义的微生物和主要包括哪几大类？
微生物的定义
微生物是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称
微生物主要包括病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类.
微生物分类
六界（病毒界1977年加上，我国陈世骧）
生物界
原核细菌界：
细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体
真菌界：
酵母菌、霉菌
病毒界：
病毒、类病毒
原生物界：
原生生物、粘菌
植物界
动物界
三元界：
真细菌、古细菌、真核生物
3.微生物具有哪些主要特性？
试简要说明之。
一、体积小，比表面积大，二、吸收多，转化快三、生长旺、繁殖快，四、适应性强，易变异，
五、分布广，种类多
4．细菌有哪几种基本形态？
其大小及繁殖方式如何？
细菌的基本形态分为：
球形或椭圆形、杆状或圆柱状、弧状和螺旋状，分别称为球菌、杆菌、弧菌和螺旋菌。
细菌细胞的大小一般用显微测微尺测量，并以多个菌体的平均值或变化范围来表示。
细菌的繁殖主要是简单的无性的二均裂殖。
5．细菌细胞壁的结构（Gram+、Gram－）与功能？
gram染色的原理和步骤？
知道常规的几种Gram+、Gram—的菌种
结构：
在细菌菌体的最外层，为坚韧、略具弹性的结构。
其基本骨架是肽聚糖层，由氨基糖（包括N-乙酰葡萄糖胺，NAG和N-乙酰胞壁酸，NAM两种）和氨基酸组成。
Gram+的细胞壁具有较厚（30-40nm）而致密的肽聚糖层，多达20层，磷壁酸是革兰氏阳性菌的特有成分，可加强肽聚糖的结构。
Gram－的细胞壁薄（15-20nm）、结构较复杂，分为外膜（基本成分是脂多糖LPS）、肽聚糖层和壁膜间隙。
功能：
（1）保护细胞及维持外形（如果人工去掉细胞壁后，所有菌的原生质均变成圆形）。
（2）具有分子筛作用（屏障作用）：
水及一些简单的化合物可通过，大分子不能通过。
（3）具有膨压作用，膨压本身有一定坚韧和弹性，在低渗环境中不会膨胀破裂，在高渗环境中防止原生质过度收缩。
（4）某些成分可与高等生物发生作用。
革兰氏染色的原理：
革兰氏染色的步骤：
涂片固定——结晶紫初染1min——碘液媒染1min——95%乙醇脱色0.5min——番红复染min
常规的几种Gram+:
李斯特菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌
常规的几种Gram-：
沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌、假单胞杆菌
关键步骤是酒精脱色，如脱色过度会将革兰氏阳性菌染成革兰氏阴性菌，如脱色不够会将革兰氏阴性菌染成革兰氏阳性菌。
6．细菌细胞的特殊结构包括哪些部分？
各有哪些生理功能？
（1）荚膜：
某些细菌细胞壁外的一层较松厚，而且较固定的粘液性物质，是鉴定细菌的依据之一。
生理功能：
a.对细菌有保护作用：
保护细菌免受干燥的影响，保护不受其它细菌吞噬作用；
b.荚膜的黏附作用有助于在特殊环境中定居和生存；
c.增强细菌的致病力：
具荚膜的致病菌毒力强，失去荚膜的致病力下降；
d.提供养料和堆积代谢废物的作用。
（2）鞭毛：
是从细菌细胞质膜和细胞壁伸出细胞外面的蛋白质组成的丝状结构。
生理功能：
鞭毛是细菌的运动器官，有利于细菌趋向性的实现（趋利避害）。
（3）菌毛：
是某些细菌体表生长的短直中空，纤细量多的丝状结构。
生理功能：
吸附附着作用。
（4）性菌毛：
某些细菌细胞外生的丝状结构（数量较少），是不同菌株之间发生接合时DNA传递通道。
是RNA病毒吸附侵染位点。
（5）芽孢：
某些细菌在生长后期在细胞内部，部分原生质失水浓缩形成一个圆形、椭圆形或圆柱形高度折光的内生孢子，称为芽孢。
对不良环境条件具有较强的抵抗力的休眠体。
芽孢对不良环境有很强的抗性：
抗干燥（在干燥下可存活几年、几十年），抗紫外线，抗有毒化学物、对化学药品抵抗力强，能耐高温，能使细菌渡过不良环境。
7．芽孢的耐热机制？
某些细菌在其生长的一定时期，在其细胞内形成的一个厚壁的、抗逆性很强的内生孢子，这个内生的孢子就称为芽孢。
耐热机制：
1.含水量低，蛋白质和核酸不易变性。
2.有厚、致密的壁3、含与抗热性有关的吡啶二羧酸（营养细胞无）4.芽孢内具有抗热性的酶。
有多层厚而致密的壁；含水量低；存在有对热稳定的蛋白；含有特殊的物质如：
2,6-吡啶二羧酸钙。
8．放线菌的形态与结构、繁殖方式？
基质菌丝：
能产生黄、橙、红、紫、蓝、绿、灰、褐、黑等色素或不产生色素。
气生菌丝：
有波曲、螺旋、轮生等各种形态
孢子：
球形、椭圆形或瓜子形等各种形态，孢子表面有不同的纹饰。
呈白、黄、淡绿、粉红、蓝、褐、灰等颜色。
结构：
气生菌丝，孢子丝，基内菌丝（营养菌丝）
繁殖：
可分为二类：
1一般以分生孢子繁殖，如链霉菌等典型的放线菌以此方式增殖。
2以短小分支或菌丝片段繁殖，如分支杆菌科放线菌科等初级放线菌以此方式增殖。
9．霉菌的形态与结构、繁殖方式？
有性孢子和无性孢子？
霉菌是一些丝状真菌的总称。
他们主要由菌丝和菌丝体组成。
其中菌丝的几种特殊形态包括假根，吸器，菌核，子实体。
霉菌的繁殖方式：
无性繁殖（无性孢子）：
节孢子，游动孢子，厚亘孢子，孢囊孢子，分生孢子。
有性繁殖（有性孢子）:
卵孢子，接合孢子，子囊孢子，担孢子，
10．酵母的形态与结构、繁殖方式？
酵母菌是典型的真核微生物，细胞的形态通常有球状.卵圆状.椭圆状.柱状或香肠状等多种，当他们进行一连串的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不立即分离，其间仅以极狭小的面积相链，这种藕节状的细胞串就称为假菌丝。
酵母细胞一般比细菌个体大得多，为（1~5）um×（5~30）um。
酵母菌细胞的典型构造包括
（1）细胞壁
（2）细胞膜（3）细胞核等构造
酵母菌的繁殖方式:
1无性繁殖：
（1）芽殖：
各属酵母均都存在
（2）裂殖：
在裂殖酵母属中存在
（3）产无性孢子：
节孢子，由地霉属产生
郑孢子，由郑孢酵母属产生厚垣孢子，
2有性（产子囊孢子）：
如酵母属，接合酵母属等
11.如何在显微镜下区分上述四大类微生物？
细菌相对较小,细菌特有的荚膜或芽孢（折光的）
放线菌大量分支发达的菌丝,有螺旋状孢子丝
霉菌根霉是有假根,匍匐菌丝,孢子囊或者散开的孢子.青霉明显扫帚状
酵母菌是单细胞真菌有细胞器体积大很低倍的显微镜都能看到
25．列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的细胞形态、结构、繁殖方式的特点。
细胞形态
结构
繁殖方式
基本结构
特殊结构
细菌
球状、杆状、；螺旋状
细胞壁、细胞质膜、细胞质、细胞核
荚膜、鞭毛、芽孢
1.无性的（二均）裂殖为主要繁殖方式2.（芽生细胞）芽殖
放线菌
－
与细菌基本相同
分枝发达的菌丝
1.形成无性孢子2.菌丝片段
酵母菌
球形、卵圆形、圆柱、梨形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等
细胞壁、细胞质膜、细胞核、（成熟细胞）液泡、（有氧）线粒体、基粒、基质
1.无性繁殖①芽殖②裂殖③产无性孢子（节孢子、掷孢子、厚垣孢子）2.有性繁殖（产生子囊孢子）
霉菌
－
菌丝（有/无隔膜）、菌丝体（营养/气生/繁殖）、菌丝特异化（假根、吸器、菌核、子实体）
1.无性繁殖（节孢子、游动孢子、厚垣孢子、孢囊孢子、分生孢子）2.有性繁殖（卵孢子、接合孢子子囊孢子、担孢子）
13．如何从平板上区分上述四大类微生物？
其菌落形态与细胞形态有何联系？
根据菌落大小、表面、边缘、色泽、厚薄、透明度、致密度等特征来区分
真菌可形成哪些有性孢子，在真菌分类上有何作用。
真菌的有性孢子有：
卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子，真菌亚门（或门）的区分
真菌可形成哪些无性孢子，说明它们的主要特征。
真菌的无性孢子有：
孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、厚垣孢子等。
孢囊孢子：
形成在一个囊状的结构中，可以是游动的，称为游动孢子，如不能游动，称为静孢子。
分生孢子：
靠菌丝分割或缢缩形成的无性孢子，形态多样。
芽孢子：
以出芽方式形成的无性孢子。
厚垣孢子：
即厚壁的孢子。
15．病毒感染宿主的过程？
1、特点
1）不具有细胞结构，具有一般化学大分子的特征。
2）一种病毒的毒粒内只含有一种核酸，DNA或者RNA。
3）大部分病毒没有酶或酶系极不完全，不含催化能量代谢的酶，不能进行独立的代谢作用。
4）严格的活细胞内寄生，没有自身的核糖体，没有个体生长，也不进行二均分裂，必须依赖宿主细胞进行自身的核酸复制，形成子代。
5）个体微小，在电子显微镜下才能看见。
6）对大多数抗生素不敏感，对干扰素敏感。
噬菌体复制（繁殖）的三个阶段：
1、吸附期（adsorptionperiod）；
游离的噬菌体吸附到宿主细胞
2、潜伏期（latentperiod）；
从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期
3、裂解期（lysisperiod）；
随着菌体不断破裂，新噬菌体数目增加，直到最高值平稳期（plateauphase）
病毒浸染宿主的过程:
1吸附:
噬菌体与敏感的寄主细胞接触,在寄主细胞的特异性受点上结合.
2侵入:
噬菌体吸附在细菌细胞壁的受点上以后,核酸注入细菌细胞中,蛋白质壳体留在外面.
3:
复制:
噬菌体核酸进入寄主细胞后,操纵寄主细胞的代谢机能,大量复制噬菌体核酸,并合成所需的蛋白质,但不形成带壳的粒子.
4粒子成熟（装配）:
寄主细胞合成噬菌体壳体,并组装成完整的噬菌体粒子
5寄主细胞的裂解（释放）:
粒子成熟,引起寄主细胞的裂解,释放出病毒粒子.
16．烈性噬菌体、溶源性噬菌体？
烈性噬菌体：
侵入细菌细胞后，进行营养繁殖，使寄主细胞裂解的噬菌体。
温和噬菌体：
有些噬菌体侵入寄主细菌后，它们的核酸与宿主细胞同步复制，宿主细胞不裂解，这类噬菌体称为温和噬菌体。
含有温和噬菌体的细胞称为溶源性细胞；在溶源性细胞内的噬菌体核酸称为原噬菌体。
17、说明用光学显微镜观察细菌的步骤，并指出需特别注意的方面。
首先在低倍镜下找到视野，然后转换高倍镜；在玻片上滴加一滴香柏油，将油镜浸入香柏油中，缓慢降低载物台（或提升油镜），找到视野；用细调焦螺旋调节至清晰的视野；观察；观察结束后擦去油镜上的香柏油。
注意事项有：
油镜观察一定要加香柏油；用油镜观察时应特别小心，以免压碎载玻片；观察完毕后一定要擦去油镜上的香柏油。
18．请解释下列名词：
菌落、菌苔，菌落特征
菌落：
微生物细胞个体在固体培养基上不断生长繁殖形成的肉眼可见并具有一定形态特征的细胞群体，是微生物固体培养群体形态。
菌苔（lawn）细菌在斜面培养基接种线上有母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落：
各种细菌在一定培养条件下形成的菌落具一定的特征，包括菌落的大小、形状、光泽、颜色、硬度、透明程度等等。
菌落的特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
19．微生物生长的测定方法？
说明生长曲线对微生物生产有何实践意义？
（一）测定单细胞微生物的数量
1.细胞总数的测定：
显微镜直接计数（总菌数测定），平板菌落计数（活菌数测定），比浊法等；
2.活细菌数量的测定：
稀释平皿测数法、膜过滤培养法；
（二）细胞生物量的测定
1.干重法
2.生理指标法
20．微生物生长曲线并解释之
1延滞期（Lagphase）又称停滞期、调整期和适应期。
指少量单细胞微生物接种到新鲜培养基后，在开始培养的一段时间内细胞数目不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零的一段时期—代谢系统是正在适应新环境。
特点：
细胞重量增加，体积增大，但不分裂繁殖。
时间：
几分钟到几小时，据不同菌种和培养基成分及培养条件而异。
同一种类，接种物所处的生长发育时期不同，滞留适应期的长短也不一样。
2对数生长期（Logarithmicphase）又称指数生长期（Exponentialphase）。
指在生长曲线中，紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期。
耐热机制：
1.含水量低，蛋白质和核酸不易变性。
2.有厚、致密的壁3、含与抗热性有关的吡啶二羧酸（营养细胞无）4.芽孢内具有抗热性的酶。
3稳定期（stationaryphase）
又称恒定期或最高生长期。
其特点是生长速率常数R等于0，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，或正生长与负生长相等的动态平衡之中。
特点：
环境变得不适宜菌体的高速增长，死亡的细胞数量增加，死亡和繁殖细胞的速率达到平衡，细胞总数不再增加。
细胞总数达到最高水平。
开始在细胞内积累贮藏物质和次生代谢产物，芽孢细菌开始形成芽孢。
4衰亡期（declinephase或deathphase）在衰亡期中，个体死亡的速度超过新生的速度，整个群体呈现负生长状态。
特点：
环境条件变得更加不适宜，细胞生活力衰退，死亡率增加，以至于死亡数超过新生细胞数，活细胞总数急剧下降。
细胞常出现多形现象，甚至畸形或产生液泡，许多细菌在后期产生自溶现象，造成在工业生产上后处理（过滤）困难（自溶后粘度增加）。
21．分批培养？
连续培养？
分批培养（密闭培养）:
微生物置于一定容积的培养基中,经培养一段时间后,最后一次性的收获.培养基是一次性加入,不再补充,随着微生物的生长繁殖活动,营养物质逐渐消耗,有害代谢产物不断积累,细菌的对数生长期不可能长时间维持.
连续培养（开放培养）:
是在研究典型生长曲线的基础上,对稳定期到来的原因已较充分地认识后,采取在培养器中不断补充新鲜营养物质,并搅拌均匀;同时,及时不断地以同样速度排出培养物（包括菌体和代谢产物）,使培养物达到动态平衡,其中的微生物可长期保持在对数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上.
连续培养的作用:
随时为生物的研究工作提供一定生理状态的实验材料,提高发酵工业的生产效益和自动化水平.
连续培养的方法:
恒浊法与恒化法
纯培养的概念。
微生物纯种培养的方法？
在微生物学中，把一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代，称纯培养。
微生物纯种培养的方法：
平板分离法（稀释涂布平板法、稀释混合平板法、平板划线法）；单细胞挑取法。
22．培养基应该具备微生物生长所需要的哪些营养要素？
功能？
实验室中常用的药品？
培养基应具备水分，碳源物质，氮源物质，无机元素和生长因子供微生物生长，有些微生物能合成上述部分营养素，故配制培养基应视微生物种类而定。
1水分是微生物的主要组成成分，分为游离水和结合水两种形态存在。
结合水为微生物细胞的组成成分，束于原生质胶体系统中。
游离态水是细胞吸收营养物质和排出代谢产物的溶剂及生化反应的介质；一定量的水分又是维持细胞渗透压的必要条件。
水还能有效调节细胞内温度。
2碳源物质通过细胞内的一系列的化学变化，被微生物用于合成各种代谢产物，有机氮同时还能提供能量。
3氮源物质是微生物细胞蛋白质和核酸的组要成分，微生物利用它在细胞内合成氨基酸和碱基，进而合成蛋白质、核酸等细胞成分以及含氮代谢物。
4无机元素大部分构成微生物酶的活性基团或酶的激活剂，并具有调节细胞渗透压、调节酸碱度和氧化还原电位以及能量转移等作用。
5生长因子是指维生素，氨基酸、嘌呤、嘧啶等特殊有机营养物。
被微生物吸收后一般不分解，直接参与调节或代谢反应。
实验室常用药品：
番红碘液美蓝染液结晶紫染液酒精等。
培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
由于各类微生物对营养的要求不同，也由于科学研究或生产的目不同，对培养基的要求也不同。
为了便于研究，我们可以根据某种标准，将种类繁多的培养基进行简单的划分。
根据培养基的物理状态可将培养基划分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基；
根据培养基的营养物成分是否可知可将培养基划分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基；
根据培养基的用途可将培养基划分为选择培养基、鉴别培养基、加富培养基等
选用和设计培养基的原理和方法？
基本培养基？
完全培养基？
选用培养基的方法：
1.选择适宜的营养物质，目的明确；2.营养物质浓度及配比合适；3.物理化学条件适宜；4.经济节约；5.灭菌处理
基本培养基：
含微生物生长繁殖需要的基本营养物质。
23．控制微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些？
1.低温原理：
细胞体内水分转变成冰晶，引起细胞明显脱水，冰晶对细胞结构尤其是细胞质膜的物理损伤。
常用方法：
低温保藏，液氮保藏微生物。
2.高温原理：
大多数细菌、酵母、病毒和真菌菌丝体的致死温度为55-60℃；细菌芽孢能耐100℃以上的高温。
高于最高温度界限，引起微生物原生质体的变性，蛋白质和酶的损伤、变性、失去生活机能的协调，停止生长或出现异常形态，最终导致死亡。
常用方法：
干热灭菌法（焚烧和烧灼法，干烤法），湿热灭菌法（巴氏消毒法，煮沸法，流通蒸汽灭菌法，间歇灭菌法，高压蒸汽灭菌法，超高温瞬时灭菌（UHTST））。
3.水份：
干燥会造成微生物失水代谢停止以至死亡。
常用方法：
干燥法。
4.渗透压：
高渗环境会使细胞原生质脱水而发生质壁分离，而能抑制大多数微生物的生长。
常用方法：
腌渍法，蜜饯法。
5.pH值大小：
影响细胞质膜电荷的变化从而影响了养料吸收；影响酶的活性；改变环境中养料的溶解度及可给性；抑制杂菌生长；强酸和强碱具有很强的杀菌能力。
常用方法：
酸类防腐剂，强碱消毒法。
6.O2的影响：
氧对不同微生物的有不同影响。
好氧菌以氧气为呼吸链的最终电子受体，缺氧时不能生存；分子氧对厌氧菌有毒害作用。
常用方法;罐头充氮法。
7.紫外线的杀菌作用：
250~280nm的波长杀菌力最强，微生物细胞经紫外线照射后，以O2为底物产生光化学反应生成的H2O2（过氧化氢），发生强烈的氧化作用，杀死细胞。
以及引起DNA变异，突变，死亡。
常用方法：
紫外线照射法。
8.化学药物：
药物能抑制或杀死微生物，但有些药物在高浓度时是杀菌剂，在低浓度时可能被微生物利用作为养料或生长刺激因子。
常用方法：
重金属，强氧化剂，甲醛，乙醇、甲酚和新洁尔灭等，强酸、强碱，染料。
24．下列物品采用什么方法灭菌？
说明理由
培养基玻璃器皿室内空气酶溶液
培养基——高压蒸汽灭菌法（normalautoclaving）:
是在高压蒸汽锅内进行，锅有立式和卧式2种，原理相同。
锅内蒸汽压力升高时，温度升高。
一般采用9.8×Pa的压力，121.1℃处理的方法，也可采用较低温度（115℃）持续处理30min左右的方法。
培养基在灭菌过程中,要求既达到灭菌效果,又能尽量减少营养成份的破坏,故一般采用高温短时间灭菌。
玻璃器皿——高压蒸汽灭菌。
玻璃器皿耐热，热蒸汽的穿透力较热空气强，在同一温度下对芽孢杆菌或无芽孢杆菌的灭菌效果比干热法好。
室内空气——紫外线。
细胞原生质中的核酸及其碱基对紫外线吸收能力强，吸收峰为260nm，而蛋白质的吸收峰为280nm，当这些辐射能作用于核酸时，便能引起核酸的变化，破坏分子结构。
其主要是对DNA起作用，最明显的是形成胸腺嘧啶二聚体，妨碍蛋白质和酶的合成，导致细胞死亡。
而且，紫外线的穿透能力差，不易透过不透明的物质，即使一薄层玻璃也会滤过大部分紫外线。
酶溶液——超高温瞬时灭菌法。
可杀死微生物的营养细胞和耐热性强的芽孢细菌。
25．微生物的营养类型的分类？
根据对碳源的要求是无机碳化合物还是有机碳化合物把微生物分成自养型微生物和异养象微生物两大类.此外,根据微生物生命活动中能量的来源不同,将微生物分为2种能源代谢类型:
一种是利用吸收的营养物质的降解产生的化学能,称为化能型微生物;另一类是收光能来维持其生命活动,称为光能型微生物.将碳源物质的性质和代谢能量的来源结合可以将微生物分为光能自养型、光能异养型、化能自养型、化能异养型.区别见下表:
代谢特点
营养类型
光能自养型
化能自养型
光能异养型
化能异养型
碳源
CO或可溶性碳酸盐
CO或可溶性碳酸盐
小分子有机物
有机物
能源
光能
无机物的氧化
光能
有机物的氧化降解
供氢体
无机物（H2O、H2S等）
无机物（H2S、H2、Fe2+、NH3、NO2—、等）
小分子有机物
有机物
代表种
蓝细菌、绿硫细菌
硝化细菌、硫化菌、氢细菌、铁细菌等）
红螺菌
大多数细菌，全部真菌、放线菌
划分的依据是根据他们的能源的来源，碳源物质的来源和供氢体的不同。
光能自养是利用光能，并以水或还原态无机物为供氢体来同化CO2；
光能异养是利用光能，以简单有机物（醇、有机酸）为供氢体同化CO2；
化能自养是通过氧化无机物获取能量，并以CO2为唯一或主要碳源；
化能异样是其碳源和能源都来自有机物，碳源直接来自有机化合物，能源来自有机物的氧化分解。
26.菌种的衰退与复壮？
27.保藏菌种的方法？
菌种保藏原理：
通过控制并创造低温、干燥、缺氧，贫乏营养等环境条件抑制菌种生长繁殖，延缓变异，降低代谢，使之处于低代谢活性或休眠状态，以保持菌种在一定时间内不染杂，以确保菌种在一定时间内不发生变异的，不因发生变异而致使重要生物性状丧失。
方法：
低温保藏：
液氮保藏；低温冰箱保藏，传代保藏等
干燥保藏：
砂土管保藏芽孢菌；
隔绝氧气保藏：
石蜡油封藏；
冷冻真空干燥保藏；
28、微生物吸收营养物质的方法主要有哪几种，并比较它们的异同。
主要有四种，扩散、促进扩散、主动运输和基团转位4种方式。
1、简单扩散：
这是一种依靠膜内外两侧营养物的浓度差，由高浓度向低浓度运输，最后达到动态平衡的吸收营养物质的方式。
简单扩散的特点是：
不消耗能量，非特异性的，不能逆浓度梯度运输营养物，也不需要载体，可运送的养料有限，主要是一些小分子物质如：
水、气体、尿素、甘油等。
2、促进扩散：
促进扩散也是依靠膜内外两侧营养物的浓度差，实现营养物由高浓度向低浓度运输的方式。
与简单扩散的区别在于其运送过程中必须有透性酶的参与，通过营养物与透过酶的可逆性结合将营养物从胞外运输进胞内。
与简单扩散相同的是不消耗能量，也不能逆营养物浓度梯度运输，但有酶饱和效应。
3、主动运输：
主动运输是指微生物在代谢能的推动下，通过膜上特殊载体蛋白逆营养物浓度梯度吸收营养物质的过程。
主动运输是微生物吸收营养物质的主要方式，广泛存在于微生物中。
主动运输的特点是：
具有与营养物专一性结合的载体蛋白，运输过程中消耗能量，可逆浓度梯度吸收营养物。
4、基团转移：
基团转移是一种类似于主动运输的方式，与主动运输相同的是：
基团转移在营养物运输过程中消耗能量，营养物也可逆浓度梯度运输，也需特异性载体蛋白参与，但在运输过程中，营养物的分子结构发生了变化，如发生了磷酸化。
29为什么大肠杆菌常被用于食品卫生检测的指示菌？
它适合指示哪些食品卫生质量。
大肠菌群是人和动物肠道中的正常微生物区系，并且只存在于人和动物肠道中，大肠菌群通常与动物肠道病原菌同时存在，动物肠道病原菌抵抗外界不良环境的能力较差，在体外环境中极易死亡，所以难以在食品中检出，因此选择了大肠杆菌。
另外，大肠杆菌有较成熟的检测方法。
适合指示的食品有：
冷冻食品，经射线照射处理的食品
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